合肥市蜱系统发育分析及安徽省一蜱种新纪录

目的了解安徽省合肥市蜱类系统发育情况,并对安徽省一新纪录种进行描述。方法选取合肥市长丰县、蜀山区、肥西县作为采样点,采集蜱样进行形态学鉴定后,选取部分样本,用PCR方法扩增线粒体核糖体核糖核酸大亚基(16S rRNA)和细胞色素C氧化酶I(COI)基因,测序后进行相似性及系统发育分析,并对发现的安徽省硬蜱科一新纪录种进行鉴定。结果长丰县、蜀山区、肥西县3个采样点共采集到18只蜱样,其中长丰县1只,蜀山区11只,肥西县6只。形态学鉴定为褐黄血蜱12只,长角血蜱5只,豪猪血蜱1只。16S rRNA和COI基因序列与Genbank上下载的序列比对显示,本次所获得长角血蜱、褐黄血蜱、豪猪血蜱分别聚于不同分支,长角血蜱与豪猪血蜱亲缘关系较近,与褐黄血蜱亲缘关系较远。采集到的豪猪血蜱为安徽新纪录种。结论初步了解了合肥市蜱类构成,安徽省蜱类新增纪录种为豪猪血蜱。

集卵孵化法与Kato-Katz法不同检查次数诊断血吸虫病的效果

目的 选择一种适宜现场应用的血吸虫病病原学检查方法.方法 采用尼龙绢集卵孵化法和Kato-Katz法不同的检查次数对血吸虫病流行村的337例居民进行检查,比较不同检查次数诊断血吸虫病的效果.结果 337份粪样中,Kato-Katz法1送3检血吸虫卵检出率为19.6%,Kato-Katz法2送6检的检出率为22.6%,差异有显著性意义(χ2=281.59,P＜0.05);Kato-Katz法1送3检的血吸虫卵检出率为18.1%,集卵孵化法血吸虫毛蚴检出率为17.5%,两种方法的差异无显著性意义(χ2=153.878,P＞0.05);Kato-Katz法2送6检的检出率为22.55%,Kato-Katz法加集卵孵化法的检出率为22.55%,两法差异无显著性意义 (χ2=251.619,P＞0.05) .结论 Kato-Katz法1送3检与尼龙绢集卵孵化法联合运用可以取代Kato-Katz法2送6检,是一种适宜于现场应用的病原学检查方法.

“引江济淮”工程对钉螺扩散和血吸虫病蔓延的影响

目的论证"引江济淮"工程能否造成钉螺扩散和血吸虫病蔓延。方法调查工程途经地区血吸虫病流行现状,包括常规方法调查钉螺分布情况,间接血凝试验(IHA)检测居民血清中血吸虫抗体,尼龙绢集卵孵化法检查耕牛血吸虫感染情况;现场螺笼放养,定期观察巢湖实验区钉螺的生存繁殖情况,为期1年,同时设立对照区。结果工程引水口附近江外滩钉螺密度最高达326只/框。工程途经的无为县、和县钉螺分布广,居民IHA血吸虫抗体阳性率分别为22.1%(168/760)和18.6%(37/199),耕牛血吸虫感染率分别为2.4%(9/371)和0.2%(2/997)。工程沿线巢湖市居巢区和芜湖市裕溪口地区居民血吸虫感染率分别为1.3%(46/3598)和10.5%(310/2960)。在巢湖2个实验区放养肋壳钉螺和光壳钉螺各100只,1年后回收活螺分别为6～189只和20～47只,放养期间查见幼螺;2个实验区和对照区肋壳钉螺的产卵季节存活率分别为11.3%(6/53)～16.7%(10/60)、3.0%(1/33)～20.8%(11/53)和4.7%(2/43)～14.7%(10/68),差异无统计学意义(χ2=0.093,0.760,P>0.05;χ2=0.647,0,P>0.05);光壳钉螺分别为24.1%(14/58)～44.4%(32/72)、37.8%(17/45)～67.3%(37/55)和86.3%(44/51)～93.1%(54/58),差异有统计学意义(χ2=9.575,5.302,P<0.05;χ2=56.863,36.218,P<0.05)。产卵季节(放养1个月)的雌螺卵巢含卵量,2个实验区和对照区肋壳钉螺为5.90±1.64个、3.00±2.41个和4.44±2.65个(t=1.396,1.460,P>0.05);光壳钉螺同地卵巢含卵量为3.52±3.90个、2.92±3.36个和3.42±2.40个(t=0.656,0.201,P>0.05),差异均无统计学意义。结论钉螺可在巢湖环境中存活、繁殖;"引江济淮"工程可引起钉螺扩散,相关地区开始具备血吸虫病传播条件。

钉螺在巢湖生存繁殖的现场研究

目的了解钉螺能否在巢湖生存繁殖。方法选择巢湖湖区的马尾河口和巢湖闸两处为实验区,巢湖东岸高林山区为对照区,投放无为县江外滩的肋壳钉螺和巢湖东岸高林山区的光壳钉螺,观察钉螺在放养不同时间后的生存繁殖情况。结果1年后,实验区和对照区均有相当数量存活的肋壳钉螺和光壳钉螺成螺;研究期间在实验区和对照区均检获了一定数量的光壳钉螺和肋壳钉螺幼螺;产卵期间实验区和对照区肋壳钉螺存活率差异无显著性(P>0.05),而光壳钉螺存活率差异具有显著性(P<0.05);产卵期间无论是光壳钉螺还是肋壳钉螺,各实验区雌螺卵巢中所含螺卵数与同一月份对照区同类雌螺卵巢中所含螺卵数的差异均无显著性(P均>0.05)。结论肋壳钉螺、光壳钉螺均能够在巢湖生存繁殖,但光壳钉螺在巢湖的生存状况不及其在高林山区的生存状况理想。

日本血吸虫病流行区HBV与血吸虫感染相关性血清流行病学调查

目的 了解血吸虫病流行区HBsAg人群分布规律及其与血吸虫感染的相关性。方法 在安徽省一中度血吸虫病流行村，采用病原学方法（Kato-Katz法，二送六检）和血清学方法（ELISA法、IHA法串联筛检方案）进行血吸虫感染情况检测，同时平行检测HBsAg（ELISA法），并进行相关个案调查。结果 1）居民HBsAg阳性率11．21％（105／937），其中男性12．38％（50／404），女性10．32％（55／533），性别间差异无显著性（wald=1．545，P=0．214）；25-34岁及以上年龄组HBV感染的危险度（OR）是5～14岁组的8．852～10．5ll倍（P均d0．001）；2）血吸虫抗体阳性率与HBsAg携带率年龄性别分布曲线走向基本一致，有随年龄增大而上升趋势；≥25岁居民血吸虫抗体阳性率、粪检阳性率、HBsAg携带率分别在30％、3．13％和10％以上；3）慢性血吸虫病患者与非血吸虫病患者HBsAg携带率分别为7．69％和9．96％，HBsAg平均A值分别为0．180（一0．005，0．364）和0．234（0，141，0．327），差异无显著性（P均〉0．05）。血吸虫抗体阳性与阴性者HBsAg携带率分别为12．26％、10．66％，HBsAg平均A值分别为0，246（0，166，0．327）和0．241（O．182，0．301），差异无显著性（P均〉0．05）。结论 本研究未发现HBV与血吸虫感染有相关性，但≥25岁居民血吸虫合并HBV感染的潜在威胁不能忽视。

HIV感染合并肺孢子虫肺炎1例

肺孢子虫病（pneumocystosis）是由肺孢子虫（Pneumocystis spp．）寄生于人和哺乳动物肺组织引起的临床疾病。肺孢子虫肺炎（Pneumocystis carinii pneumonia，PCP）是艾滋病（AIDS）患者和肿瘤化疗患者常见的合并症和死亡原因之一，目前国内临床诊断主要依靠患者体征和X光片进行，缺乏病原学诊断的报道。现将1例依靠病原学方法确诊的人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者合并肺孢子虫肺炎的病例报告如下。

淡水鱼华支睾吸虫囊蚴LAMP检测方法的建立

目的建立一种高效灵敏的环介导等温扩增(LAMP)方法检测淡水鱼中华支睾吸虫囊蚴。方法以华支睾吸虫ITS 2基因序列为靶序列,合成Cs-1、Cs-2、Cs-3三组LAMP引物体系。以华支睾吸虫囊蚴DNA样本为模板,日本血吸虫成虫、带绦虫成虫、蛔虫虫卵及其他吸虫囊蚴DNA样本为参考,比较三组引物体系的特异度;以不同浓度的华支睾吸虫成虫基因组DNA为模板,比较三组引物体系的灵敏度;用LAMP法及PCR法平行检测16份华支睾吸虫囊蚴样本和23份其他吸虫囊蚴样本,评价LAMP法的敏感性和特异性。结果三组引物体系的灵敏度及特异度以Cs-3为最优,以其建立的LAMP法反应体系,检测华支睾吸虫成虫DNA的最低检出浓度可达到3.33×10^(-4)ng/μL,敏感性和特异性与PCR法一致,均为100%。结论成功建立了一种可用于检测淡水鱼中华支睾吸虫囊蚴的LAMP方法,为淡水鱼寄生虫病监测工作提供了便捷高效的检测手段。

山区水库常年灌溉对血吸虫病传播潜在影响的研究

目的 了解山区水库灌区引水灌溉对血吸虫病传播的潜在影响，为控制血吸虫病扩散提供科学依据。方法在泾县陈村水库总干渠自流灌溉区，选择一处引水干渠和一条灌溉斗渠为螺情观察点，每月进行系统抽样查螺，观察钉螺含血吸虫情况；并收集气象、水文资料和结合已有的基础理论，推算感染性钉螺被毛蚴攻击感染的季节以及感染性钉螺生存时期。结果干渠分别在6、7月份，斗渠分别在7、10月份发现感染性钉螺；6月份舍尾蚴之钉螺，其被血吸虫毛蚴攻击感染最近时间在上年9月份。7月中旬舍尾蚴之钉螺其被毛蚴攻击最近时间在当年5月份，10月中旬舍子胞蚴之钉螺其被攻击时间在当年8月份及此后。理论上在干渠坡滩，6～11月份有感染性钉螺存在，在斗渠感染性钉螺可常年存在。干渠虽常年有水，但淹滩主要在4、5月份及上年8、9月份，而斗渠较浅且常年有水。结论在总干渠自流灌溉区，干渠内感染性钉螺的形成及人畜感染的发生与水位变化有关；而在小型灌溉渠中，血吸虫传播可在大多数季节实现。

安徽石台县日本血吸虫病传染源调查

目的了解石台县血吸虫病传染源种类,指导当地防治工作。方法选择龙泉、垄上及源头3个流行村,开展人畜及野生动物的病原学查病,计算感染率及感染度。结果3个村感染日本血吸虫的宿主有人、狗、猫及野鼠,其中人感染率分别为0、1.01%和0.87%,野鼠和狗感染率分别在22.22～33.33%和4.35～26.47%。感染度以野鼠最高,达609.91(算术均数)和259.06(几何均数)。并在当地另一乡发现1只野兔感染血吸虫。结论当地血吸虫病流行可能与野鼠、狗等有关,但明确各种感染宿主在血吸虫病传播中的地位尚有待分子生物学研究。

ELISA与IHA在血吸虫病不同流行程度地区的现场筛查效果评价

目的评价与比较ELISA法和IHA法在血吸虫病不同流行程度地区的筛查效果。方法选择四个日本血吸虫病流行程度不同的试点村,对5～65岁适检人群进行Kato-Katz法(二送三检)、ELISA法、IHA法等3种方法平行检测。结果ELISA法的敏感度和特异度分别为96.05%、95.74%,IHA分别为89.74%、100%。但两种方法现场“特异度”较低(ELISA:43.21%￣92.17%;IHA:67.56%～91.55%),且其阳性预测值亦较低(ELISA法:3.1%￣18.6%;IHA:2.9%￣15.8%)。两法平行检测比较:两者的测定值具有一定的相关性(r=0.767,P<0.01),但IHA法阳性阈值(1∶10)对应的OD值高于ELISA阳性阈值水平(0.105),在0.124￣0.308左右。在疫情相对较重的地区,ELISA法阳性率高于IHA,其阳性预测值低于IHA;在疫情相对轻的地区,两法阳性率、阳性预测值无显著性差异。结论在血吸虫病疫情未控制地区,IHA法现场筛查效果相对优于ELISA法,但两者均存在假阳性率较高、阳性预测值较低的缺陷。

长江特大洪水溃堤洲滩灾后血吸虫病疫情监测

目的探讨洪涝灾害对血吸虫病传播中、远期的影响。方法通过收集安徽枞阳县1998～2009年疫情以及水文、气象资料．研究洪涝灾害对血吸虫病传播宿主的分布以及人群血吸虫感染的中、远期影响。结果钉螺密度在2000～2004年维持在较高水平，其中2001年最高3．0375只／0．11m^2，之后基本呈波动下降趋势：灾后人群IHA和粪检阳性率变化趋势基本一致、IHA阳性率于1999年达到最高水平31．63％（593／1875）。粪检阳性率于2001年达到最高水平31．78％（41／129），之后基本呈下降趋势，至2007年粪检阳性率趋于平稳。结论洪涝灾害短期内可引起钉螺的扩散及人群血吸虫病感染率的升高．但采取有效的防治措施后．洪涝灾害对血吸虫病传播流行的远期影响并不大。

安徽省宁国市有螺无病地区钉螺对日本血吸虫易感性的研究

目的研究安徽省有钉螺无血吸虫病流行地区(简称"有螺无病地区")钉螺对日本血吸虫的易感性,为制定该类地区血吸虫病防治策略提供依据。方法采集宁国市有螺无病地区钉螺400只,随机分为2组,每组200只,以本省日本血吸虫毛蚴在实验室内进行钉螺群体感染,两组钉螺与毛蚴比例分别为1∶20和1∶40,感染时间为4小时,感染时的温度为24～28℃。以同样方法感染该省血吸虫病流行区宣城市有螺有病地区钉螺作为对照。感染后将钉螺置于室内常温下饲养60天,观察有螺无病地区和有螺有病地区钉螺感染率和死亡情况。结果在1∶20(钉螺/毛蚴)组和1∶40(钉螺/毛蚴)组中,有螺无病地区钉螺均未能成功感染日本血吸虫毛蚴,而有螺有病区钉螺感染率分别为5.89%(2/51)和16.67%(7/42),且两组中有螺有病区钉螺感染率的差异具有统计学意义(χ2=4.15,P<0.05)。观察期结束时,在1∶20(钉螺/毛蚴)组中,有螺无病地区钉螺与有螺有病地区钉螺死亡率分别为77%(154/200)和74.5%(149/200),两地钉螺死亡率无显著性差异(χ2=0.661,P>0.05);在1∶40(钉螺/毛蚴)组中,两地钉螺死亡率分别为81%(162/200)和78%(156/200),死亡率差异无统计学意义(χ2=0.507,P>0.05)。结论尽管本研究中有螺无病地区钉螺未能成功感染日本血吸虫毛蚴,但今后仍需加强有螺无病地区输入性血吸虫病传染源的监测工作。

安徽省土源性线虫病监测点居民生境中蛔虫卵污染情况监测报告

目的了解农村居民的菜园、厕所周边、厨房和庭院4类环境蛔虫卵污染情况。方法选择安徽蒙城县立仓镇路楼村、含山县清溪镇新兴村和霍山县下符桥镇圣人山村为观察地点,每个村抽取10户采集菜园、厕所周边、庭院、厨房四类地点的土样。采用饱和的硝酸钠漂浮镜检法检查4类环境土样蛔虫卵污染情况。结果4类生境蛔虫卵总检出率为35%,其中菜园、厕所周边、庭院、厨房蛔虫卵检出率分别为33.3%,11.1%,33.3%和50.0%。活蛔虫卵总检出率26.7%。结论居民生境中蛔虫卵污染较大,有潜在感染的危险。

中国血吸虫病流行地区农村家庭卫生厕所建造资金状况分析

为了解我国血吸虫病流行地区农村卫生厕所建造资金的管理状况,对目前仍然存在血吸虫病流行的湖南、湖北、江西、安徽、江苏、云南、四川7个省,每省随机抽取2个县,每县分别选取2个完成改厕的村,每村随机抽取30个使用卫生厕所的农户家庭进行现场调查。结果显示:血吸虫病流行地区农村833个不同类型无害化卫生厕所,不同来源投入差异较大,卫生厕所类型、政府投入、家庭收入、施工方式和家庭人口对卫生厕所造价有显著性影响。政府投入是中国血吸虫病流行地区农村卫生厕所建造资金的主要来源,政府主导、个人参与是我国血吸虫病流行地区农村建造卫生厕所的主要模式。应重点加强政府投入资金管理,提高改厕资金的使用效率。

1992-2012年安徽省长江流域螺情变化趋势分析

目的：分析安徽省长江流域螺情变化趋势，为钉螺防控提供理论依据。方法收集1992-2012年间安徽省长江流域活螺和感染性钉螺密度及钉螺感染率资料，观察其变化趋势，并分析影响螺情变化的相关因素。结果山丘活螺密度总体上最高，并于1993、1996、2001年出现高峰期；1992-1998年江滩活螺密度高于洲滩，1998年之后洲滩高于江滩，江滩活螺密度于1996、1998年出现高峰期，洲滩于2003年出现高峰期。洲滩感染性钉螺密度及钉螺感染率高于江滩、山丘，并于2004年出现高峰期，山丘于1993、1997年出现高峰期。结论长江流域螺情变化受自然和社会环境等多方面因素影响，在加强传染源控制的同时应重视螺情控制。

粪便中日本血吸虫虫卵DNA的提取及PCR检测方法的优化

目的建立一套系统、完整的粪便日本血吸虫虫卵DNA提取法及PCR优化体系。方法利用蛋白酶K和苯酚法从感染日本血吸虫尾蚴的家兔粪便中提取DNA,根据日本血吸虫基因(AF00369)设计特异性引物,以粪便中提取的DNA为模板,采用PCR方法扩增目的基因片段,对PCR方法的各种反应条件进行优化并采用有限稀释法推测PCR检测法可检测到的最低虫卵数。结果以感染家兔的粪便中提取的DNA为模板,用PCR方法可扩增到分子量大小约为400 bp的特异性条带,测序结果经BLAST工具进行分析,与日本血吸虫基因(AF00369)比对的同源性为96%;25μl PCR反应体系的最优化反应条件:MgCl2 1.5μl;dNTP 0.5μl;引物1.0μl;DNA模板5.0μl;Taq DNA聚合酶0.5μl。扩增程序为:94℃预变性5min、94℃变性30s、53℃退火30s、72℃延伸30s,30个循环、72℃延伸7min、4℃保存。PCR检测法可检测到的最低虫卵数为0.015个。结论成功建立感染家兔粪便中虫卵DNA的提取方法及PCR血吸虫基因片段检测方法,同时对PCR反应条件进行优化,为从分子角度检测日本血吸虫虫卵DNA提供科学的实验依据。

2008年安徽血吸虫病传播控制与传播阻断达标地区疫情评估

目的调查7个县(区)血吸虫病疫情状况,判定其是否符合血吸虫病传播控制或传播阻断标准。方法在每个县(区)随机抽取3个乡,每个乡随机抽取1个行政村开展人畜感染情况调查。人群查病采用IHA法对6～65岁的常住居民进行筛查,阳性者再采用尼龙绢集卵孵化法检查;对所有敞放的牛和羊采用粪便直接毛蚴孵化法检查。传播控制达标评估县(区)对近3年查出钉螺且人、畜活动频繁的环境,采用系统抽样结合环境抽样调查法查螺;传播阻断达标评估县(区)对历史有螺环境、可疑有螺环境采用全面细查法查螺。同时,审核近5年的血吸虫病疫情资料。结果 4个区居民和家畜血吸虫感染率均低于1%,未出现当地感染的急性血吸虫病病例;连续2年以上查不到感染性钉螺;3个县(市、区)已连续5年未发现当地感染的血吸虫病病例,连续2年以上查不到钉螺。结论 4个区的血吸虫病疫情达到了传播标准,3个县(市、区)的疫情达到了传播阻断标准。

日本血吸虫终宿主粪便中虫卵存活力的实验观察

目的观察不同宿主粪便中日本血吸虫虫卵存活时间。方法采集日本血吸虫虫卵阳性居民、水牛、猪、兔子和鼠等不同宿主粪便,观察不同宿主粪便中虫卵的孵化率,以及不同温度和不同时间内虫卵的存活情况。结果来自猪、鼠、人、兔和水牛新鲜粪便中血吸虫虫卵的孵化率分别为78.9%、53.7%、41.7%、28.9%和22.1%。在37℃、30℃、20℃和4℃温度下不同时段粪便中虫卵存活率差异很大,其中干燥和样本粪便的大小是影响虫卵存活的重要因素。水牛和猪粪便中虫卵存活率高,随着温度的降低存活率逐渐增加。结论不同宿主粪便中虫卵的孵化率,以及不同温度和不同时间内虫卵的存活情况存在显著性差异。

2013年安徽省寄生虫病防治技术竞赛成绩分析报告Ⅰ.理论知识成绩分析

目的通过竞赛了解我省基层寄生虫病防治机构专业技术人员理论知识水平,从而推动防治专业人才的培养工作。方法将参赛选手按性别、年龄、职称、单位级别和不同寄生虫病防治任务进行分组,对各组选手的理论知识总成绩及血吸虫病、疟疾、其它寄生虫病和综合知识部分成绩进行比较分析。结果来自全省16个市和广德、宿松县18支参赛队伍的72名选手理论知识平均总成绩未达及格线,及格人数占54.17%。对各部分成绩进行分析,仅血吸虫病和其它寄生虫病部分平均成绩勉强达到及格线,其它寄生虫病和综合知识部分不及格人数均超过50%。不同性别、年龄和职称参赛选手之间的理论知识总成绩差异无统计学意义(P>0.05);市级机构选手理论知识平均总成绩优于县级机构选手(P<0.05);不同寄生虫病防治任务组选手之间的理论知识总成绩和各部分成绩的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论我省基层寄生虫病防治机构专业技术人员理论知识水平较薄弱,需要进行继续教育和加强提高。