表达猪流感病毒血凝素基因的重组腺病毒的构建及免疫原性分析

通过细菌内同源重组的方法成功构建了表达H3N2亚型猪流感病毒血凝素的重组腺病毒。首先将血凝素基因亚克隆到穿梭载体质粒pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP上,与腺病毒基因组质粒pAdenoVatorΔE1/E3共转化大肠杆菌BJ5183菌株,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAd-HA-GFP。将该重组质粒转染293细胞以包装重组腺病毒。根据报告基因GFP的表达及Western-blot分析,证明获得了可正确表达猪流感病毒血凝素的重组腺病毒rAd-HA-GFP。重组腺病毒经一次性腹腔注射接种昆明鼠,2周后可检测到血凝抑制抗体,并且抗体至少可以持续12周,证实重组腺病毒介导表达的血凝素蛋白具有良好的免疫原性,可诱导小鼠产生高滴度的特异性抗体。

海产品中砷的形态及其毒性研究进展

有毒元素的形态和毒性是当下科学研究的前沿方向。砷是常见的有毒类金属,分为有机态和无机态两种形态,一般认为无机砷毒性远大于有机砷,有机砷仅为低毒或无毒。但是随着研究技术手段的发展,越来越多的研究发现部分有机砷也存在较强的毒性。文章重点阐述海产品中砷的形态、分布特征、毒性评价以及健康风险评估的研究进展;最后,展望了砷形态在化学、生物学、预防医学、毒理学等学科交叉下的发展前景,旨在为进一步研究砷的形态、毒性以及安全性风险评估提供参考。

普鲁士蓝/石墨烯修饰电极检测畜禽饮用水中铅离子的方法和应用

为监测畜禽饮用水中铅离子的含量,对畜禽养殖场的饮用水质量进行评价,本文建立了一种基于普鲁士蓝/石墨烯修饰电极的检测畜禽饮用水中铅离子的方法。采用电化学沉淀法使石墨烯表面附着普鲁士蓝纳米颗粒,并对制备的修饰电极使用差分脉冲伏安法进行化学性质分析,以及检测铅离子在所制备的电极表面的灵敏度、稳定性和检出限,评估了试验所制备的修饰电极检测畜禽饮用水中铅离子的可靠性。结果表明,在pH 4.5的磷酸盐缓冲液(0.10 mol/L)中,铅离子在1×10^(-4)~1×10^(-9)浓度范围内与电流值呈现一次方函数关系,最低检测限为2.5×10^(-9)mol/L。综上所述,基于普鲁士蓝/石墨烯修饰电极的线性范围宽,检出限低,稳定性好,抗干扰能力强,灵敏度高,适用于畜禽饮用水中铅离子的检测。

表达H3N2亚型猪流感病毒血凝素蛋白的重组腺病毒在猪体内的免疫试验

【目的】本研究旨在评价表达H3N2亚型猪流感病毒血凝素蛋白的重组腺病毒在猪体内的免疫效果。【方法】以10-8TCID50、2×10-8TCID50和4×10-8TCID50的剂量经肌肉注射接种后2到6周每周检测血凝抑制(HI)抗体;比较肌肉注射、滴鼻、灌胃3种接种途径对仔猪免疫效果的影响,并通过攻毒保护试验进一步考察重组腺病毒rAd-HA-GFP在猪体内的免疫效力。【结果】以不同的剂量分别经肌肉注射免疫后,HI抗体水平与接种剂量呈正相关。3种接种途径均能刺激仔猪产生特异性抗体,肌肉注射组的HI抗体要高于其他2组,差异显著(P<0.01)。通过滴鼻和肌肉注射方式进行攻毒后,阴性对照组仔猪在攻毒2d后出现体温升高、打喷嚏、咳嗽、流鼻液、精神沉郁、体重减轻等症状;而各免疫组仔猪未观察到明显的临床症状,各免疫组的病毒分离率也明显低于阴性对照组。【结论】重组腺病毒rAd-HA-GFP诱导的HI抗体达到1∶320可以有效抵抗H3N2亚型猪流感病毒的侵袭,可以作为候选疫苗株。