酰亚胺酶法制备普瑞巴林中间体(R)-3-异丁基戊二酸单酰胺

目的 利用重组酰亚胺酶催化3-异丁基戊二酸亚胺(3-isobutylglutaric anhydride, IBI)的去对称化水解,制备普瑞巴林的重要中间体(R)-3-异丁基戊二酸单酰胺[(R)-3-isobutyl glutaric acid monoamide,(R)-IBM]。方法 构建酰亚胺酶BpIH基因工程菌pT67/BL21(DE3),并在摇瓶和3 L发酵罐上进行表达,细胞均质后用于底物IBI的转化反应,提取及精制得到产物(R)-IBM,并测定其色谱纯度、对映体过剩值和相对分子质量。结果与结论酰亚胺酶BpIH得到了较好的表达,3 L发酵罐中的酶活达到了1 880 mU·L^(-1),利用该酶液进行IBI的转化,产物(R)-IBM的质量浓度达到了49.11 g·L^(-1),转化率和提取收率分别达到了90.9%和68.74%,产物的对映体过量值达到了99.96%,该工艺路线已经具备了替代常规酶拆分路线的基础。