香菇育种中的诱变处理和生化分析

本研究对化学、物理诱变的菌种,进行了栽培和生化测定,发现诱变后香菇的酯酶、过氧化物同工酶和多酚氧化酶活性均出现了变异,说明编码这些蛋白的基因位点发生了变化,虽然现在还没有根据认为这些生化性状的改变与产量有直接的关系,但产量提高与基因改变和酶活性强弱有密切的联系。因此,把同工酶及酶活性测定等生化技术应用于诱变育种预测产量变化,将为缩短育种周期提供可能性。

香菇沪农1号的选育

我国山区农民目前段木栽培香菇还较普遍,但长期以来一直使用本地的老菌种,产量低,品质差,缺乏在国际市场上竞争能力.为此,我们从1985年开始在浙江、江西等地进行了适于山区栽培的香菇菌种选育研究,从国外引进的4个菌种中,获得了适于我国山区段木栽培的香菇沪农1号及其相配套的栽培技术.目前在浙江龙泉栽培达1000多万公斤段木,江西等地也已开始试种,现将该菌种研究结果总结如下.

段木香菇菌种“沪农1号”的生育特性及栽培要点

以选育高产、优质、适宜于段木栽培的香菇菌种为宗旨,通过引种和多年品比试验,选出了“沪农1号”菌种,该菌种较传统菌种具有更强的合成、分泌多种酚氧化酶和纤维素酶的能力,菌丝定植快、生长迅速、出菇早、产量高,较对照增产42.9%,菇质好,花厚菇率提高25%～50%,出口菇比例超过80%,并能达到当年接种,当年出菇,收回成本,具有较大的社会效益和经济效益。

浅谈香菇单核原生质体杂交亲本的选择及后代性状分析

香菇菌种选育的主要手段有引种驯化、杂交育种、细胞工程育种及基因工程育种四种。当前应用最普遍的是引种驯化和杂交育种,在杂交育种中有单孢杂交、单双核杂交、单核原生质体杂交等方式,但是无论采用哪种方式杂交,亲本的选择都是不可缺少的,而且是十分重要的环节。近年来我们每年都选用不同亲本进行大量的杂交配对及杂交菌株的筛选工作。本文就1992年采用单核原生质体进行杂交得到的后代,从亲本选择、不同栽培方式的生物学效率、菇的质量诸方面进行分析评价。 我们选择了8个菌株做亲本(表1),其中包括2个栽培种,6个野生种。从大量的杂交后代中选择了138个组合,采用人造菇木和塑料袋栽培两种方式进行筛选,根据亲本的不同来源、遗传和生态特征,设计了三种组合类型(表2)。即栽培种×野生种、野生种×野生种、栽培种×栽培种,在栽培种×野生种的组合中,野生种又分别选用了在人工栽培条件下出菇和不出菇两种类型作为亲本。

原生质体单核化技术在香菇育种中的应用

利用原生质体单核化技术，以香菇栽培种Ｌｅ１和野生种７０＃为亲本，通过原生质单核体杂交选育出申香８号。它具有优质、高产、抗逆性强和栽培适应性广等特点，已开始在我国香菇主产区应用，成为香菇主栽种之一。

香菇和平菇生长发育中漆酶、酪氨酸酶和纤维素酶活性的变化

香菇和平菇的菌丝体在胞内合成和向外分泌大量的漆酶、酪氨酸酶和纤维素酶。在菌丝生长中,该两种菌的三种胞外酶活性变化基本相同,漆酶和酪氨酸酶的活性高峰出现在第25-30天,以后开始下降,而纤维素酶活性高峰在第20天时开始出现。原基形成时,香菇和平菇的胞外漆酶和酪氨酸酶活性下降,香菇的胞外纤维素酶活性上升,而平菇下降。两种菌子实体中的三种酶活性低于菌丝体的胞外酶,与胞内酶相似。子实体的不同部位中,菌褶中三种酶的活性均为最低,而菌肉和菌柄中酶活性相对较高。两种菌的胞内漆酶、酪氨酸酶和纤维素酶活性都很低,而且变化幅度小。

单核和同核原生质体技术在食用菌遗传育种上的应用

单核和同核原生质体是食用菌原生质体技术中的一个重要研究内容,由于单核和同核原生质体是没有经过减数分裂形成的无性后代,为食用菌遗传和育种研究提供了一个重要的材料。本文阐述了食用菌单核和同核原生质体的发现和作用以及在食用菌遗传研究上的应用前景。

应用RAPD技术对香菇融合菌株进行遗传鉴定

本文应用RAPD技术与聚类分析方法,对香菇细胞融合菌株F1及亲本S1、465进行遗传分析.根据DNA扩增的指纹图谱,估算融合子与亲本的DNA相似系数并构建遗传相关性聚类图.结果表明,RAPD技术与聚类分析方法可应用于香菇细胞融合菌株的遗传鉴定.

不同菌种保藏方法对香菇产量的影响

分别采用液氮和4℃冰箱保藏香菇(Lentinulaedodes)菌种,并通过栽培试验比较了二种保藏方法对香菇产量的影响。

香菇菌丝原生质体的分离与培养

原生质体的分离与培养是食用菌原生质体融合工作的重要基础。本文比较了不同溶壁酶组成及浓度、渗透压稳定剂、pH值、反应温度、菌丝培养基成分和菌丝的生理状况等因素对香菇(Lentinus edodes)菌丝原生质体分离的影响。用PDY培养基培养的幼嫩菌丝,在1.0％溶壁酶和1.0％脱壁酶的混合酶液系统中,以0.6M KC1 为渗透压稳定剂,pH5.0,反应4小时可形成10~7/ml以上的原生质体。在再生培养基中加入香菇菌丝提取液可获得较高的原生质体再生率。

香菇病毒的分离、诊断、侵染途径和生物学特性

本文系统描述了香菇病毒病在菌丝体阶段和子实体阶段的各种症状。从具有典型病毒病症状的香菇菌丝体中分离出两种带毒菌株SLV-1和SLV-2的纯培养,并从这些菌丝体中纯化出一种34～35nm的球状病毒颗粒。测定结果表明,带毒菌株的纤维素酶、半纤维素酶、木质素酶活性和对木屑培养料中纤维素、半纤维素、木质素的降解能力比其正常菌株明显下降。在用单双核杂交研究香菇病毒的侵染途径中,证实了性亲和性因子是控制香菇病毒传播的一个主要遗传因子,并讨论了病毒感染是香菇菌种退化的主要原因。

香菇和虎皮香菇的种间原生质体融合

在香菇种间原生质体融合中,对虎皮香菇进行失活原生质体标记,对香菇进行温度敏感型标记,分别以虎皮香菇和香菇的单核和双核体为亲本,用化学融合方法,以高温(35℃)为选择压,筛选并构建了32个不同组合的香菇种间融合子。这些融合子与亲本菌株形成明显的拮抗反应,在木屑代料培养基上产生形态各异的子实体,并形成了新的遗传性状——菌丝体无锁状联合,但能形成子实体。

香菇申香10号菌种的选育与推广

利用原生质体单核化技术获得香菇栽培种 2 6的原生质体单核体 ,以其为受体 ,选用栽培种苏香为供体 ,通过非对称杂交 ,选育出申香 10号。它具有优质、高产、抗逆性强和栽培适应性广等特点 ,已开始在我国香菇主产区应用 ,成为香菇主栽种之一。由此证明 。

香菇子实体组织分离物与菌丝体的遗传相关性

以中国香菇主栽品种苏香为材料，利用现代分子生物学技术扩增获得DNA指纹图谱，以此估算出同一菌种子实体菇肉、菇柄组织分离物与菌丝体DNA相似系数，并构建了遗传相关聚类图，结果显示，同一菌种子实体的菇柄组织分离物与菌丝体的遗传相关性可能低于菇肉。

香菇遗传研究和菌种选育的现状及发展

本文通过回顾香菇菌种选育的四个历史阶段,阐述了在原生质体技术基础上发展起来的育种技术,全面分析了国内外遗传研究和菌种选育的现状,指出我国香菇生产中存在的主要问题是菌种退化、菌种混乱和菌种选育滞后,剖析了解决菌种问题的技术方法,提出了香菇遗传研究和菌种选育的方向。

香菇菌丝生长中多酚氧化酶的动态变化

香菇菌丝在生长发育中是以分解木质素作为主要碳素营养的。木质素是一个以芳香族为基本结构的复杂聚合物。在自然界物质大循环中,它的降解主要是以微生物代谢中产生的多酚氧化酶为催化剂,在常温常压下把复杂的不溶性的聚合物转化为水溶性含有苯环的简单化合物,苯环最后破裂产生简单的有机小分子。由于香菇等木腐菌具有自身合成多酚氧化酶的能力,因此深入研究香菇多酚氧化酶活性,不仅对开发自然界丰富的木质素资源具有重要意义,而是研究香菇生长发育的主要生理基础。我们系统地研究了不同碳源、氮源、微量元素和维生素等营养因子对香菇合成多酚氧化酶的影响。本文报道了香菇菌丝体在生育过程中4种胞内胞外多酚氧化酶活性的动态变化。

废菌糠及其辅料对香菇培养料中木质纤维素降解的影响

香菇培养料中含有20％的废菌糠,在营养生长阶段可以加速本质纤维素复合体的解体,并将木质纤维素的降解率提高7％以上。辅料中还原糖和氮素的含量水平不同,木质纤维素降解率也不同,从17.50％到20.12％不等,辅料2对木质纤维素降解促进作用最明显,辅料3次之,辅料1和辅料4相近,为最低。

香菇交配型基因的遗传研究 Ⅰ一种交配型基因测定的新方法

本文建立了一种香菇交配型基因测定的新方法——原生质单核体系本交配到极性标记法.用这一方法不仅成功地分离和鉴定出不同香菇菌株的四种标准交配型基因,还有效地区分出亲本型和重用型两种交配型基因类型。这一技术为深入开展异宗结合食用菌的遗传研究提供了一个重要的工具。

香菇的失活原生质体融合

食用菌的原生质体融合必须对亲株进行遗传标记。筛选营养缺陷型或代谢突变型的传统方法,不仅需要花费大量的人力和物力,而且这些筛选是以诱变为基础,往往会引起亲本一些不利于产量和质量性状的突变。70年代发展起来的失活原生质体技术表明。

一种含有单链RNA的香菇球状病毒

从生长不正常的香菇(Lentinus edodes(Berk.)Sing)菌株中分离到一种等轴对称含单链RNA的病毒颗粒。病毒颗粒在电镜下直径为33～34nm,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中病毒外壳蛋白分子量为22000道尔顿。病毒核酸径DNase1和SI酶解试验及热变性紫外吸收曲线试验证明为单链RNA,在1.5％的琼脂糖凝胶电泳中,病毒核酸呈现一条带,分子量为2.38×10~6道尔顿。