哮喘免疫治疗的国内外研究现状

过敏性哮喘作为世界范围的高发疾病,严重影响患者的生活质量,传统药物治疗不良反应较多,且不能根治。而免疫治疗过程结束后效果仍能持续,免疫治疗通过改变免疫反应,特别是T细胞的反应模式,通过相关细胞因子的产生,诱导患者对过敏原的耐受性,特异性免疫治疗是唯一针对病因而不仅仅针对呼吸道过敏症状的治疗方法。本文回顾了现有文献,包括大量随机对照试验、荟萃分析和关于免疫治疗结果的研究,总结了该领域的现有发展和未来前景。

微生物学实验室生物安全问题探讨

生物安全就是生物性的传染媒介通过直接或间接感染导致对人类及动植物的真实或潜在的危险,微生物实验室就存在这种安全隐患。任何疏忽和意外事故不仅会导致工作人员的感染,也可造成环境污染和疾病的爆发与流行。本文将通过技术和管理两种手段,从生物安全实验室水平分级、布局、设备以及应急处理办法等方面探讨如何预防和控制生物危害。

河野脂螨发育各阶段外部形态扫描电镜观察

【目的】了解河野脂螨Lardoglyphus konoi各发育阶段外部形态和超微结构特征。【方法】利用室内培养获得的不同发育阶段的河野脂螨个体样本,在扫描电镜下观察各发育阶段(卵、幼螨、若螨和成螨)的外部形态和超微结构。【结果】河野脂螨卵呈椭圆形;幼螨足3对,未见生殖器官生长痕迹,生殖毛和肛毛缺如;若螨足4对,生殖器官发育不完全,有生殖毛和肛毛,但发育亦不完全。休眠体前端尖细,后端钝圆,呈梨形状。在末体区有吸盘板,其上有13个吸盘,呈2-2-4-5分布。成螨螯肢细长,剪刀状,其上的定趾和动趾上有几个小齿;顶外毛长度约为顶内毛的50%,与顶内毛处同一水平线上。雄成螨第3对足的跗节末端为2个粗钝的齿所替代;腹面有1个生殖区和带有1对肛门吸盘的肛区。雌成螨所有的爪均分叉;腹面生殖孔为1个纵向裂缝;肛门不伸达后缘。【结论】通过电镜扫描对河野脂螨不同发育阶段外部形态和超微结构的观察,更加详细地了解了该螨的形态结构,从而为脂螨科螨类的分类和生物学研究提供了理论依据。

石菖蒲提取物有效成分及对粉尘螨杀灭活性研究

目的 分析石菖蒲提取物对粉尘螨的杀灭活性,并对其有效成分进行分离鉴定。方法 以甲醇为溶剂,采用旋蒸法从石菖蒲根茎磨粉中获得冷浸提取物,再以石油醚进行萃取,再次旋蒸获得石菖蒲精油成分。将石菖蒲精油与吐温-80以1∶1比例混匀后用蒸馏水进行倍比稀释至1.000 00%、0.500 00%、0.250 00%、0.125 00%、0.062 50%和0.031 25%等6个浓度,同时将吐温-80用蒸馏水以同样比例稀释作为对照组。取200μL各浓度石菖蒲精油分别均匀滴加于有100只成螨的滤纸上,每一浓度重复实验3次,各浓度石菖蒲精油均设置1个对照组,于25℃,75%相对湿度培养箱内处理24 h后,计算螨虫校正死亡率平均值并进行统计分析。采用硅胶柱层析法分离精油成分,石菖蒲精油经正向柱中压制备,收集其中各个组分。运行条件:流动相为含10%乙酸乙酯的石油醚溶液和纯乙酸乙酯,检测波长为254 nm,色谱柱使用正向硅胶柱,柱温为室温。将分离纯化得到的石菖蒲精油各组分均稀释至1.000 00%浓度进行杀螨活性测定,舍弃杀螨活性低于100%的组分后,将保留组分稀释至上轮50%浓度后再进行多轮杀螨活性测定。将有杀螨效果的组分采用高效液相色谱、液相色谱-质谱联用仪和超导脉冲傅里叶变换核磁共振波谱仪进行质谱和核磁分析,通过计算机标准谱图库检索并与文献资料比较,确定活性单体化合物结构。结果 1.000 00%、0.500 00%、0.250 00%和0.125 00%浓度石菖蒲精油可将实验粉尘螨全部杀灭,校正死亡率均为100%。石菖蒲提取物有效浓度为0.062 50%时对粉尘螨的24 h致死率可达94.33%。采用硅胶柱层析法对其进行分离纯化,分离出A~F等6个组分,对分离出的不同成分进行杀螨活性对比,发现D、E组分杀螨效果良好,在0.500 00%浓度下均达到100%的杀螨率。质谱和核磁分析结果显示,D组分为异丁香酚甲醚、E组分为β-细辛脑。结论 石菖蒲精油提取物具有杀螨活性,其中异丁香酚甲醚对粉尘螨有显著杀灭活性。

速生薄口螨成螨的形态观察和系统进化分析

目的了解速生薄口螨成螨扫描电镜下形态特征,并探讨该物种与粉螨中其他螨种之间的亲缘关系。方法从纯培养的速生薄口螨中分离出成螨,使用扫描电子显微镜观察其外部形态。提取该螨的DNA,PCR扩增细胞色素氧化酶亚基1(cox1)基因和内转录间隔区(ITS)并测序,与GenBank上8种粉螨的ITS序列和cox1序列进行比对,采用最大似然法构建系统进化树。结果扫描电镜下可见速生薄口螨的腹面表皮内突较发达,足Ⅰ表皮内突愈合成胸板,足Ⅱ表皮内突伸达中央,未连接;腹面有2对几丁质环,雄螨位于足Ⅱ~Ⅳ基节之间;雌螨前对几丁质环位于足Ⅱ~Ⅲ之间,后对几丁质环位于足Ⅳ基节水平;雄螨可见生殖褶、叶状瓣及阳茎等结构。PCR扩增和测序结果显示,cox1序列长539 bp,ITS基因片段序列长1633 bp,与预期一致。ITS序列比对结果显示,速生薄口螨与热带无爪螨(GenBank登录号为KC215362)序列相似性最高为90.41%,与其他粉螨序列相似性为83.33%~89.73%。cox1序列比对结果显示,速生薄口螨与害嗜鳞螨(GenBank登录号为MT075728)序列相似性最高,为83.55%,与其他粉螨序列相似性为79.78%~82.12%。基于ITS和cox1序列构建的系统进化树在拓扑结构上存在差异:在cox1序列构建的系统进化树上,速生薄口螨为一单支,与其他8种粉螨不在同一进化支上,与形态学分类较为接近;在ITS序列构建的系统进化树上,速生薄口螨与罗宾根螨聚为一支,与形态学分类存在差异。结论扫描电镜下可清晰观察到速生薄口螨雌雄成螨的形态结构。基于cox1序列分析结果显示速生薄口螨与其他粉螨的亲缘关系较远。

吸腐薄口螨休眠体的形态和分子特征鉴定

目的利用形态学和分子学方法对吸腐薄口螨的休眠体进行鉴定,了解其形态和分子特征。方法采用光镜和扫描电镜方法对生姜样品中的吸腐薄口螨进行表面和超微结构观察,同时提取休眠体基因组DNA,测序分析cox1和ITS基因。结果吸腐薄口螨休眠体足4对,腹面凹而背面凸,体壁较硬,清晰可见前足体和后足体被背沟分开。足上有刚毛,背毛短,躯体末端清晰可见吸盘板,共4对。经PCR扩增得到基因片段,大小为417 bp,ITS序列长度为1613 bp。结论利用吸腐薄口螨休眠体光镜和电子显微镜观察结合cox1和ITS序列,可鉴定吸腐薄口螨的休眠体,为吸腐薄口螨的生物学研究奠定了基础。

粉尘螨各发育阶段外部形态扫描电镜观察

目的 观察粉尘螨(Dermatophagoides farinae)不同发育阶段的形态特征。方法 将纯培养的粉尘螨分离后,应用扫描电子显微镜观察卵、幼螨、若螨、成螨等不同发育阶段外部形态。结果 粉尘螨卵呈长椭圆形。幼螨足3对,若螨足4对,生殖孔不发达,有生殖毛和肛毛。成螨呈长圆形,表皮有细致花纹,足4对;雄成螨足Ⅰ明显加粗,足Ⅲ较足Ⅳ粗长,生殖区位于足Ⅲ、Ⅳ基节间,肛门被一圆形围肛环包围,环内有肛门吸盘和刚毛1对;雌成螨足Ⅲ、Ⅳ较细,长度相等,腹面有1个呈“人”字形的生殖孔,其前端有1个类似月牙形的生殖板,肛门为1个纵形裂缝。结论 对粉尘螨进行扫描电镜观察能够清晰了解其形态结构特征,对粉尘螨分类鉴定具有重要意义。

江苏省徐州地区地脚粉中粉螨孳生现况调查

目的调查江苏省徐州部分地区地脚粉中粉螨孳生情况及其多样性。方法采集徐州市某菜市场馒头铺、烙饼铺和烧饼铺的地脚粉,直接镜检法分离粉螨,制成玻片标本,进行螨种鉴定及统计分析。结果共采集地脚粉460 g,检出粉螨58 647只,隶属4科8属9种,优势种为腐食酪螨。馒头铺、烙饼铺和烧饼铺地脚粉粉螨平均孳生密度依次为151.70、116.28和71.28只/g,平均孳生密度为127.49只/g。物种丰富度、物种多样性、物种均匀度均为烙饼铺>烧饼铺>馒头铺;物种优势度为烧饼铺>馒头铺>烙饼铺;3种场所地脚粉中粉螨物种相似性较高。结论徐州地区地脚粉有大量粉螨孳生,应予以重视,加强防制措施,降低粉螨危害人类的风险。