肺结核患者外周血miR-23a-3p的表达及其对患者诊断及预后评估的价值分析

目的:探究miR-23a-3p在肺结核(PTB)患者中的表达及其对PTB患者的诊断和预后的价值。方法:将2020年6月至2021年6月本院传染病科收治的98例PTB患者设为PTB组,同期另选取92例健康志愿者作为健康组。采用qRT-PCR法检测受试者外周血miR-23a-3p、核转录因子SP1(SP1)和干扰素调节因子1(IRF1)的表达;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-23a-3p对PTB的诊断价值和预后价值;采用Pearson相关系数分析PTB患者外周血miR-23a-3p与SP1、IPF1之间的相关性;对PTB患者完成6个月随访,采用Kaplan-Meier法分析miR-23a-3p与PTB患者预后关系;Cox回归分析影响PTB患者预后的危险因素。结果:与健康组相比,PTB组患者miR-23a-3p水平显著降低,SP1和IPF1表达显著升高(P<0.05);ROC曲线显示,外周血miR-23a-3p诊断PTB的曲线下面积(AUC)为0.861(95%CI:0.809~0.913),灵敏度和特异度分别为85.70%和70.70%;Pearson相关系数分析显示,PTB患者外周血miR-23a-3p的表达与SP1表达和IPF1表达均呈负相关(r值分别为-0.570、-0.435,均P<0.05),PTB患者SP1表达与IPF1表达呈正相关(r=0.524,P<0.05);随访期间,患者预后良好87例,预后不良11例;ROC曲线显示,miR-23a-3p预测PTB患者预后的AUC为0.881(95%CI:0.790~0.971),灵敏度和特异度分别为72.70%和92.00%;与预后良好组相比,预后不良组miR-23a-3p水平显著降低,SP1和IPF1表达显著升高(P<0.05);Kaplan-Meier分析结果显示,miR-23a-3p高表达PTB患者复发率明显低于miR-23a-3p低表达患者;Cox回归分析显示,肺部空洞、痰液MTB培养阳性、miR-23a-3p低表达、SP1高表达、IPF1高表达是影响PTB患者预后的危险因素。结论:PTB患者外周血miR-23a-3p表达明显降低,其低表达是影响PTB患者预后的危险因素,对PTB诊断和预后判断均具有良好的价值。

自身免疫肝炎患者外周血PBMCs自噬基因表达及Th17/CD4^+CD25^+CD127^(low)Treg细胞与肝脏功能相关性研究

目的通过检测自身免疫性肝炎(AIH)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中自噬相关基因Beclin 1、LC3mRNA表达及外周血Th17细胞、调节性CD4^+CD25^+CD127^(low)(Treg)细胞含量,分析与肝脏功能相关性,探讨自噬与免疫平衡在AIH疾病发生中的作用。方法选取经我院诊断为AIH患者35例为AIH组,同时期我院健康管理中心体检者31例为对照组(control组),应用逆转录实时荧光聚合酶联反应RT-qRCR检测两组PBMCs细胞中Beclin1、LC3mRNA表达情况,用间接免疫荧光检测抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(ASMA),免疫印迹法检测ANAs以及肝病相关自身抗体:抗肝肾微粒体抗体(LKM)、抗线粒体抗体M2、抗可溶性肝抗原SLA/LP、抗细胞浆肝抗原LC-1、抗核蛋白sp100、抗核蛋白gp210抗体。流式细胞术检测外周血细胞中Th17和Treg细胞在淋巴细胞亚群中相对CD4^+T的相对百分率。全自动生化仪检测肝脏生化指标ALT、AST、GGT、AKP、TBIL、IgG水平,ELISA检测外周血清中白细胞介素IL-17含量。结果 AIH组ALT、AST、TBIL、GGT、AKP、IgG均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.001)。AIH组ANA及免疫性肝病自身抗体阳性率为74.3%、65.7%,均高于对照组,P=0.000。AIH组Beclin 1基因相对表达量为(5.73±4.07)×2^(-7),与对照组比较,差异无统计学意义(t=0.587,P=0.559),AIH组LC3mRNA基因表达相对含量为(2.82±2.06)×2^(-6),对照组为(6.45±5.04)×2^(-6),差异具有统计学意义(t=-3.745,P=0.001)。AIH组Th17/CD4^+T均值为2.61±2.09%,对照组为1.27±0.99%(t=3.394,P=0.001),Treg/C4^+T在AIH组为4.86±2.49%,低于对照组(t=-5.882,P=0.000),AIH组血清IL-17结果为16.03±5.21pg/ml,对照组12.86±4.19pg/ml(t=2.704,P=0.009)。AIH组中LC3mRNA与ALT的相关系数r为-0.360,P<0.05,与AST、AKP、TBIL、GGT、IgG相关系数分别为r=-0.178、-0.166、-0.097、-0.074、0.003,P>0.05。Th17/Treg与ALT、GGT的相关性分别为r=0.596、0.506,P<0.05;与AST、AKP、TBIL、IgG的相关性分别为r=0.260、0.092、0.077、-0.061,P>0.05。结论 AIH患者外周血PBMCs存在自噬和Th17/Treg比值增高现象,且与肝脏功能有一定的相关性。表明自噬和Th17/Treg免疫失衡参与了AIH疾病的发生和发展。

液压挖掘机回转装置的回转支撑选型计算及设计

介绍了回转装置与回转支撑的关系,分析了回转支撑的结构特征,通过几种回转支撑对比,选择了较好的回转支撑的形式;并且根据不同的工况应用和选择性计算,最终确定了回转支撑的设计,并且通过了该种回转支撑的验算。

抗核抗体与免疫性肝病抗体对乙型肝炎患者预后与转归的意义

目的探讨乙型肝炎患者抗核抗体与免疫性肝病抗体检测的临床意义。方法用间接免疫荧光与免疫印迹法检测内江市第二人民医院2012年9月～2013年1月慢性乙型肝炎（CHB）95例和同期正常对照67例抗核抗体（ANA），nRNP／sm，sm，dsDNA，核糖体P蛋白，SSA，SSB和R052，以及自身免疫性肝病相关自身抗体：抗平滑肌抗体（ASMA），抗肝肾微粒体抗体（LKM）与抗线粒体抗体M2。用定量PCR检测HBV-DNA与HBV基因分型；自动生化仪检测血清ALT与AST，放射免疫法检测肝脏纤维化指标。结果①CHB组ANA的阳性率为23．2％，与正常对照组（3．0％）比较差异具有统计学意义（χ^2=6．85，P=0．001），以低滴度为主，核型以核颗粒型为主。②CHB组肝病相关抗体主要为ASMA，LKM和M2，对照组未发现此类抗体。③自身抗体阳性的CHB组（CHB自抗阳性）ALT，AST，病毒载量与HBV基因型分别为116．2IU／L，86．3IU／L和4．8IU／ml，HBVB型21／25，C型3／25，与自身抗体阴性的CHB组（CHB自抗阴性）比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。④CHB自抗阳性组血清IV型前胶原，层黏连蛋白LN，透明质酸酶HA与CHB自抗阴性组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论乙型肝炎患者血清中存在抗核抗体与自身免疫性肝病抗体，这些自身抗体的存在与HBV含量与基因型没有关联，ANA与肝病相关抗体检测对乙型肝炎患者预后与转归有一定意义，可能是诱发乙肝后肝硬化的病因之一。

基于Logistic回归分析重症手足口患儿合并细菌性脑炎的危险因素研究

目的探讨重症手足口病患儿合并细菌性脑炎的危险因素,为预防手足口病并发细菌性脑炎提供依据。方法回顾性分析2010年2月至2018年1月在本院住院诊断为重症手足口病的患儿,经脑脊液常规检查与培养诊断为细菌性脑炎的患儿56例作为研究组,随机选取同一时间段住院、年龄与性别相匹配的无合并细菌性脑炎的重症手足口患儿114例为对照组,利用Logistic回归方法,分析两组之间有差异的指标。结果重症手足口合并细菌性脑炎患儿占重症手足口的12%,组间性别、年龄、WBC计数、发热、空腹血糖水平、肌酸激酶同工酶CK-MB水平、发病至就诊时间等无统计学意义,P>0.05;精神差、呕吐、神经反射异常、PCT水平增高、肠道病毒EV71比例、呼吸系统细菌培养阳性经单因素分析比较,组间存在显著性差异,P<0.05,通过Logistic分析后,重症手足口合并细菌性脑炎的独立危险因素为PCT水平增高(OR=4.265,95%CI 1.514-7.362)、呼吸系统细菌培养阳性(OR=2.535,95%CI1.029-4.568)、神经反射异常(OR=2.592,95%CI 1.358-6.453)。结论重症手足口合并细菌性脑炎具有独立危险因素,临床上发现PCT增高、呼吸系统感染及神经反射异常时,需预防并发细菌性脑炎的发生。

大型卷板机主参数的力学设计模型及应用

主要用力学分析的方法阐述大型卷板机的工作机理,探讨该类机型主参数之间的关系,并建立起力学设计模型,并对其主参数进行分别确定,为设计其系列产品提供了行之有效的理论依据,并在其实践运用中证明其主参数的选择完全是可行的。

基于GeoServer的移动GIS旅游系统设计与实现

在对移动GIS技术和框架分析的基础上,选取GeoServer地理信息发布平台,进行移动GIS旅游系统功能设计;采用OGC提出的空间数据互操作规范WMS、WFS实现地理信息数据交换;以七台河旅游数据作为专题数据,实现移动端旅游景点查询与语音导游系统。

RNA干扰技术在肿瘤治疗研究中的应用进展

RNA干扰技术能有效地沉默外源性或内源性的基因表达,即序列特异性转录后在mRNA水平阻断基因的翻译,具有效果确切、高特异性、高效性的特点,它为肿瘤的基因治疗开辟了一条新途径,现对近几年这方面的成果作一综述。

反向斑点杂交-基因芯片检测人类乳头瘤病毒及分型

目的检测人类乳头瘤病毒（humanpa pilloma virus，HPV）及其分型，了解其在女性宫颈中的感染情况与宫颈癌防治方面的意义。方法采用反向斑点杂交．基因芯片检测220例不同年龄患者宫颈中HPV感染情况与分型情况，对比分析低危型与高危型HPV亚型感染率以及其与年龄的关系。结果220例标本中HPV感染阳性率为12．3％，其中单一型感染阳性率为10．9％，两种亚型同时感染率为1．4％；高危亚型与低危亚型的阳性率分别为10．0％与2．3％，二者比较有统计学意义（P〈0．05）；20-30岁年龄组、30-40岁年龄组、40～50岁年龄组与50岁及以上年龄组HPV感染率分别为13．0％、12．3％、4．9％与35．3％（P〈0．05），HPV高危亚型感染率分别为8．7％、9．6％、4．9％与35．3％，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论反向斑点杂交一基因芯片可以准确、快速地对HPV进行分型，为宫颈癌的防治与HPV流行病学研究奠定了技术基础。

外周血Th17/CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg细胞区分活动性肺结核和潜伏期结核合并肺炎

目的研究外周血Th17/CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg以及特异性TB Ag(早期分泌型抗原靶标6,ESAT-6,培养滤液蛋白10,CEP-10)诱导γ干扰素释放试验(TB-IGRAs)区分活动性肺结核和潜伏期结核(LTBI)合并肺炎的诊断价值。方法将2018年1月至2020年2月在内江市第二人民医院就诊并诊断为活动性肺结核患者41例为研究对象,48例初诊疑似结核患者(最后因诊断为肺炎,非结核感染肺炎),其中21例肺炎患者按照IGRAs阳性列为LTBI^(+)肺炎组(LTBI合并肺炎),27例肺炎患者按照IGRAs阴性列为LTBI-肺炎组(非LTBI肺炎)。所有研究对象均接受IGRAs检查,流式细胞术检测外周血Th17/CD4^(+)、Treg/CD4^(+)比值,ROC曲线评价活动性肺结核和肺炎以及与LTBI^(+)肺炎的诊断价值,并根据约登指数为最佳诊断点计算敏感度、特异度。结果活动性肺结核外周血Th17/CD4^(+)水平低于LTBI^(+)肺炎组和LTBI-肺炎组(P<0.01),LTBI^(+)肺炎组和LTBI-肺炎组之间无统计学意义,P>0.05。活动性肺结核Th17/Treg比值低于LTBI^(+)肺炎组(P<0.01),与LTBI-肺炎组比较无统计学意义,P>0.05。以肺炎(不论是否合并LTBI)为对照,Th17/CD4^(+)和Th17/Treg区分活动性肺结核和肺炎的ROC曲线下面积为AUC=0.7485(P<0.0001)与AUC=0.6796(P=0.0036),Th17/CD4^(+)<2.125为cut-off值,诊断灵敏度为87.80%,特异性为52.08%,Th17/Treg<0.355为cut-off值时,诊断灵敏度为63.41%(26/41),特异性为68.75%。以LTBI^(+)肺炎患者为参照,Th17/CD4^(+)和Th17/Treg诊断活动性肺结核的ROC曲线下面积为:AUC=0.8287(P<0.0001)与AUC=0.7439(P<0.0018),Th17/CD4^(+)<1.060为cut-off,诊断灵敏度为51.22%,特异性为95.23%,Th17/Treg<0.3550为cut-off,诊断灵敏度为63.41%,特异性为85.71%,以诊断活动性肺结核灵敏度大于85%为标准,ROC曲线显示Th17/CD4^(+)的cut-off值为小于2.10,其诊断活动性肺结核灵敏度为85.37%,特异性为57.14%。结论以TB-IGRAs为诊断第一步,外周血Th17/CD4^(+)可以较好的区分活动性肺结核和潜伏期结核合并肺炎。

新型断开螺旋双轴搅拌机优化设计方法

优化设计方法以新型断开螺旋双轴搅拌机的主要技术参数及工作机理,结构设计等方面作为优化设计参数,并以实践条件来确定其约束条件,达到了预期目的;并对该机系列化设计提供了可靠的依据,具有较好的指导方法和应用价值。

基于Android平台的海量真三维数据显示技术

在对移动三维GIS技术分析的基础上,选取OSG渲染引擎作为真三维开发平台。重点对实景三维数据、osg模型组织方式、海量数据显示等关键技术进行深入研究,确定了基于Android平台加载海量真三维数据的可行性。最后,将osg三维引擎成功移植到Android端,完成了真三维场景的加载与显示。实验结果表明,海量真三维数据在Android平台上运行流畅、图形质量高、响应速度快,扩展了实景三维数据的应用范围。

hif-1α基因沉默对宫颈癌HeLa细胞增殖及对顺铂敏感度的影响

目的研究靶向干扰hif-1α基因表达后,对HeLa细胞增殖及其对顺铂敏感度的影响。方法构建针对hif-1α基因的干扰载体并转染HeLa细胞,G418筛选阳性克隆,经RT-PCR与Western blot鉴定抑制效果,用MTT法观察抑制hif-1α基因表达后,HeLa细胞增殖的变化,RT-PCR检测在低氧培养条件下HeLa/shRNA-i细胞葡萄糖转运蛋白1mRNA的水平,利用MTT法观察抑制hif-1α表达后HeLa细胞对顺铂敏感性的改变。结果 HeLa/shRNA-i细胞与对照细胞组相比,hif-1α基因mRNA表达降低了62%,蛋白表达明显降低,MTT显示细胞吸光度值降低,低氧条件下葡萄糖转运蛋白1mRNA表达降低,对顺铂药物的敏感度增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 hif-1α基因的沉默可以抑制HeLa细胞的增殖并且能够增强HeLa细胞对顺铂的敏感度。

抑癌基因甲基化谱分析在肝细胞癌诊断中的价值

目的探讨beclin 1、RASSFA-1、p16、DAPK等抑癌基因启动子异常甲基化及其联合检测在肝癌早期诊断中的价值。方法采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法,检测37例肝癌组织和相应的癌旁组织中beclin 1、RASSFA-1、p16和DAPK 4种基因启动子区甲基化状态。通过与AFP的单一ROC曲线分析及其逐步Logistic回归的ROC曲线下面积,对单一及组合方式的敏感度、特异性、Youden指数和阳性似然比/阴性似然比进行比较分析。结果肝癌组织中beclin 1、RASSFA-1、p16和DAPK基因启动子区甲基化检出率分别为5.4%(2/37)、94.6%(35/37)、73.0%(27/37)和35.1%(13/37),其中相应的癌旁组织RASSFA-1、p16和DAPK基因启动子区甲基化检出率与肝癌组织比较差异有统计学意义(P<0.05),RASSFA-1基因启动子区甲基化和AFP肿瘤标志物联合检测可显著提高肝癌检测的敏感度(95.0%)和特异性(97.3%),曲线下面积最大(0.903),并获得高于单一基因甲基化的敏感度、Youden指数、阳性似然比/阴性似然比。结论 RASSFA-1基因启动子区甲基化和AFP肿瘤标志物联合检测,可能是早期筛查和诊断肝细胞癌的有效指标。

靶向CGI-100基因shRNA干扰载体的构建与鉴定

目的:构建靶向CGI-100基因的RNAi表达载体并鉴定其抑制效率。方法:设计及化学合成3对靶向CGI-100基因的短发夹结构寡核苷酸,经退火成双链DNA片段,将其与经限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ双酶切的PGenesil-1质粒连接,构建表达shRNA的重组质粒,用脂质体2000转染到K562细胞中进行表达,经RT-PCR和斑点杂交检测转染前后CGI-100基因表达的变化。结果:经DNA测序证实3对靶向CGI-100基因的RNA干扰表达载体PGenesil-1-CGI-100构建成功,其中第1对PGenesil-1-CGI-100在mRNA水平抑制白血病K562细胞中CGI-100基因表达的效率最高,达54%。结论:成功构建针对CGI-100基因的RNA干扰的表达载体,并筛选出1对抑制效率较高的重组干扰载体,为进一步研究K562细胞中CGI-100基因的功能奠定基础。

基于WebGIS技术的农用地管理平台建设探索

土地是我国农业的根本,近年来中央一号文件一直在强调推进农业现代化,推动新型工业化、信息化、城镇化和农业现代化同步发展。农用地的质量、数量、利用情况及其地理位置分布是构成农业信息化的基础。针对农用地信息的动态采集和实时跟踪管理是农业布局规划实施评估的重要手段。为响应国家对于加强农业现代化、打赢脱贫攻坚战的要求,提高农用地管理水平,结合喀什地区农用地数据、管理现状,开展该地区农用地管理平台建设探索。

地高辛标记DNA探针快速筛选肿瘤细胞株基因表达差异

目的建立寡核苷酸探针正向斑点杂交技术,快速筛选不同细胞株同一基因HIF-1a表达差异,探讨斑点杂交筛选基因表达的可行性。方法将多种培养肿瘤细胞株提取总RNA后,点样于尼龙膜上,与地高辛标记的HIF-1a基因探针杂交,结果与半定量RT-PCR结果比较。结果斑点杂交实验结果与RT-PCR结果一致,无统计学差异(P>0.05)。结论用随机引物地高辛标记DNA探针可以快速筛查不同细胞株同一基因表达差异,可以作为研究肿瘤基因表达差异的工具。

抗核抗体在狼疮肾炎与慢性肾炎中的临床意义

系统性红斑狼疮是一种累及全身多系统损伤的自身免疫系统疾病,其中有57.8%的女性SLE患者并发狼疮肾炎,发病机制尚不明确,近年慢性肾小球肾炎发病率呈现上升趋势,虽然慢性肾炎发病机制不同于狼疮肾炎,但慢性肾炎有明显的免疫功能变化,目前未见慢性肾炎患者抗核抗体与抗可提取核抗原关系的文献报道,因此本研究对比研究狼疮肾炎与慢性肾炎患者自身抗体的变化及与肾功能损害的关系。

新型钢丝拉绳主参数的优化设计及应用

要求钢丝拉绳能快速更换,形式为两头用螺钉压紧,压紧力更大,能达到设计要求,且制作安装更方便可靠,作为最终实施方案。

积极发挥工程训练指导人员在素质教育中的作用

在工程训练教学环节中要求对学生进行素质教育，关键在于加强规范化管理，提高训练指导人员的素质。