FOXD1、FOXD3蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及与临床特征和预后的相关性

目的分析食管鳞癌组织中叉头框转录因子D1(FOXD1)、叉头框转录因子D3(FOXD3)的表达情况及其与临床病理特征、预后的关系。方法收集本院2011年1月至2013年12月收治的105例食管鳞癌患者临床资料。比较食管鳞癌组织及癌旁正常组织中FOXD1与FOXD3的表达情况,并分析其与临床病理特征及与患者预后的相关性。结果食管鳞癌组织中FOXD1 mRNA相对表达量高于癌旁组织,而FOXD3 mRNA相对表达量低于癌旁组织(P<0.05)。并且癌组织中FOXD1阳性表达率显著高于癌旁正常组织,FOXD3阳性表达率低于癌旁正常组织(P<0.01)。FOXD1、FOXD3表达与患者年龄、病理分化程度无关(P>0.05),与患者肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度以及是否合并淋巴结转移相关,差异均具有统计学意义(P<0.05)。FOXD1表达阳性以及FOXD3表达阴性是影响食管鳞癌患者总生存的独立危险因素。结论FOXD1、FOXD3在食管鳞癌组织中异常表达,其表达与肿瘤恶性生物学行为有关,二者有望成为评估患者预后的潜在分子标志物。

透明细胞肾细胞癌中FOXD1的表达及其对786-O细胞增殖侵袭、上皮-间质转化的影响

目的探讨转录因子FOXD1在透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,CCRCC)组织和细胞系中的表达及其对786-O细胞增殖侵袭、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法采用qRT-PCR技术检测CCRCC组织和细胞系中FOXD1基因表达,并分析FOXD1表达与CCRCC临床病理特征及预后的关系;检测敲低FOXD1表达对786-O细胞生物学行为和EMT相关标志物表达的影响。结果CCRCC组织中FOXD1的表达量(0.9172±0.09658)高于对照组(0.5569±0.07482),差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤TNM分期、淋巴结转移及FOXD1高表达均为CCRCC患者预后相关的独立危险因子(P<0.05)。下调FOXD1基因发现,CCRCC细胞系786-O的体外侵袭与增殖活性明显减弱(P<0.05)。与对照组相比,敲低FOXD1表达后N-cadherin、Ki-67和vimentin表达下调(P<0.05),E-cadherin表达上调(P<0.05),差异均有统计学意义。结论FOXD1在CCRCC中异常高表达是影响CCRCC患者预后的独立因素,沉默FOXD1可使786-O细胞的增殖侵袭活性减弱,并抑制EMT进程,FOXD1发挥促癌基因作用。

细胞因子诱导杀伤细胞治疗中晚期食管癌的疗效观察

目的探讨细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞免疫治疗中晚期食管癌的效果。方法 36例中晚期食管癌患者给予CIK细胞免疫治疗。4个疗程后随访观察疗效、生活质量、免疫功能的变化。结果 36例患者中,客观缓解率为44.4%。KPS评分增加≥10分为24例(66.7%),10例评分无变化,但食欲及睡眠均有改善。2例评分下降10分。治疗后全部病例细胞免疫功能均有所提高(P<0.05)。治疗期间5例出现发热(体温37.5℃～38.5℃),1例出现皮疹,经对症处理后治愈。结论 CIK细胞免疫治疗是中晚期食管癌的有效手段,能够提高患者的免疫功能及改善生活质量且无明显不良反应。

泛素连接酶WWP1和Smurfs在前列腺癌组织中的表达及其与骨转移的关系

目的探讨泛素连接酶E3 WWP1(WW domain containing E3 ubiquitiin pProtein ligase 1)、Smurf1(smad ubiquitination regulatory factor 1)、Smurf2在前列腺癌骨转移中的作用。方法采用免疫组织化学法和实时定量PCR法分别对良性前列腺增生(对照组)、前列腺癌不伴骨转移患者(无转移组)及前列腺癌伴骨转移患者(转移组)前列腺癌组织中泛素连接酶E3 WWP1、Smurf1、Smurf2进行检测。结果与对照组相比,前列腺癌患者肿瘤组织中泛素连接酶E3 WWP1、Smurf1、Smurf2免疫组织化学染色累积光密度值及mRNA表达显著增高,且具有统计学意义(P<0.05);与无转移组相比,转移组患者前列腺癌肿瘤组织中泛素连接酶E3WWP1、Smurf1、Smurf2免疫组织化学染色累积光密度值及mRNA表达显著增高,且具有统计学意义(P<0.05)。结论泛素连接酶E3 WWP1、Smurf1、Smurf2表达增高是前列腺癌发生发展及侵袭转移过程中的可能机制之一。

CIK细胞治疗中晚期食管癌的疗效观察及护理

目的总结CIK细胞免疫治疗中晚期食管癌的效果和护理经验。方法 2009年10月～2010年10月间36例中晚期食管癌患者给予CIK细胞免疫治疗,治疗前、中、后给予全面的护理并记录不良反应。治疗结束1周后查T淋巴细胞亚群及NK细胞群,四个疗程后随访观察瘤体、生活质量的变化。结果 36例患者中,客观缓解率为44.4%。KPS评分增加≥10分为24例(66.7%),10例评分无变化,但食欲及睡眠均有改善。2例评分下降10分。复查T淋巴细胞亚群及NK细胞群,提示全部病例细胞免疫功能均有所提高。治疗期间5例出现发热(体温37.5℃～38.5℃),1例出现皮疹,经对症处理后治愈。结论 CIK细胞免疫治疗是中晚期食管癌的有效手段,能够提高患者的免疫功能及改善生活质量。在治疗过程中,全面、细致、规范的护理是保证治疗取得成功的前提。

肺癌生物治疗的研究现状及进展

肺癌的发病率高居恶性肿瘤之首,是恶性肿瘤病死率中增长最快,危害最大的之一。尽管近年来的化疗药物层出不穷,但疗效方面仍然处于难以突破的平台期。近年来肿瘤生物疗法作为辅助疗法,可消除患者体内残存的肿瘤细胞,

树突状细胞的肿瘤个体化治疗

肿瘤免疫治疗这一概念是基于机体的免疫系统在对抗肿瘤时的调节与反应。有效的免疫治疗的最主要的优点在于相对较少的副作用,针对肿瘤细胞的靶向特异性,并且能产生对抗肿瘤特异性抗原的长期记忆[1]。

树突状细胞瘤苗预防接种联合吉西他滨治疗可提高胰腺癌小鼠模型的生存率

目的应用胰腺癌小鼠模型来研究吉西他滨是否可以提高树突状细胞瘤苗接种的疗效。方法 C57B L/6小鼠成功负载经紫外线辐射后的PanO2癌细胞后,从小鼠体内获得骨髓源性DCs然后经皮下给药。预防性接种的小鼠在PanO2癌细胞形成肿瘤威胁前接种瘤苗,每隔一周接种3次,治疗性接种于肿瘤形成可触及结节时开始。吉西他滨经腹腔给药,每周两次。结果预防性DC瘤苗接种可全面阻止皮下及原位肿瘤的发展并且可诱导肿瘤抗原特异性CTLs及免疫记忆。对于已形成皮下肿瘤的模型,治疗性DC瘤苗接种与吉西他滨同样有效(肿瘤威胁形成后58天生存率分别为14%和17%,对照组0%)。以上两种方法联合可显著提高带瘤小鼠的生存率(肿瘤威胁形成后58天生存率为50%)。树突状细胞瘤苗接种也可以预防静脉注射PanO2细胞后肺转移导致的死亡。结论:树突状细胞免疫治疗不仅可以成功地与吉西他滨联合治疗晚期胰腺癌,还能够有效地预防无瘤患者的肿瘤局部复发及转移。

NEDD4-l对前列腺癌PC3细胞TrkA泛素化的影响

目的检测前列腺癌PC3细胞中泛素连接酶NEDD4-l(neural precursor cell expressed developmentally downregulated 4-1,NEDD4-1)对酪氨酸蛋白激酶A(tyrosine kinase A,TrkA)泛素化作用的研究,探讨NEDD4-l调节前列腺癌PC3细胞侵袭及迁移的机制。方法采用脂质体瞬时转染法将NEDD4-l质粒转染入前列腺癌PC3细胞中,应用蛋白免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)结合免疫印迹(immunoblotting,IB)法,观察外源的NEDD4-l和TrkA的相互作用;共表达NEDD4-l和ubiquitin,用Co-IP结合IB法检测NEDD4-1对TrkA的泛素化作用;共表达NEDD4-l和ubiquitin的同时,用蛋白酶体抑制剂MG132处理,观察TrkA水平的改变。结果转染NEDD4-1质粒后,外源性表达的NEDD4-l可与TrkA共沉淀;共表达NEDD4-1和ubiquitin后,NEDD4-1对内源的TrkA有泛素化作用,TrkA能与泛素共沉淀;共表达NEDD4-1和ubiquitin,用蛋白酶体抑制剂MGl32处理后,TrkA的泛素化降解被抑制。结论在前列腺癌PC3细胞中,TrkA是NEDD4-1的底物之一;NEDD4-1可调节TrkA的泛素化作用,促进其在蛋白酶体降解。

老年前列腺癌组织中Nedd4L对TrkA的泛素化调控

目的探讨神经前体细胞表达发育调控样蛋白(Nedd4L)通过泛素化降解癌蛋白神经生长因子酪氨酸激酶受体(Trk A)抑制老年前列腺癌的分子作用机制。方法收集手术切除的43例老年前列腺癌组织及对应癌旁组织标本。免疫组化染色检测Nedd4L及Trk A的表达,在人前列腺癌LNCa P细胞中转染Nedd4L特异性si RNA后,采用q RT-PCR及Western印迹检测LNCa P细胞内Trk A m RNA及蛋白的表达变化。结果Nedd4L蛋白在老年前列腺癌组织中表达明显降低,而Trk A表达显著升高(P<0.05);二者呈显著负相关(P<0.05),Nedd4L的表达降低与Trk A表达升高均与肿瘤淋巴结转移、高TNM分期显著相关(P<0.05);在体外,下调Nedd4L表达后可显著升高Trk A蛋白的表达水平(P<0.05),而对Trk A m RNA表达无明显影响(P>0.05)。结论 Nedd4L及Trk A在老年前列腺癌组织中异常表达,Nedd4L可能通过泛素化降解癌蛋白Trk A实现其抗肿瘤作用。

树突状细胞为基础的胰腺癌与黑素瘤疫苗

基于最近的动物实验所获得的线索,本研究开展了一系列新的临床实验以评估针对黑素瘤和胰腺癌的树突状细胞(DC)疫苗的改进潜力。第一种新策略运用了一种强大的趋化因子(即次级淋巴组织趋化因子,SLC/CCL-21),既可在接种肿瘤负载的DC疫苗的位点产生功能性淋巴结样结构,又可极大地提高疫苗在动物肿瘤模型中的有效性。应用这种策略,本研究小组正在着手在黑素瘤患者中开展一项临床试验,旨在创造出有功能的、异位的、淋巴结状结构,以增强宿主的抗肿瘤免疫能力。第二种策略在胰腺癌患者中进行,包含一种基因治疗和免疫治疗,联合了辐射(用以诱导肿瘤凋亡/坏死)后局部给予肿瘤坏死因子α基因载体及肿瘤内给予单核细胞源性的DCs(用以从正在死亡的肿瘤细胞中提取并呈递抗原,进而引发强有力的、系统性的抗肿瘤免疫能力)。

自体CIK细胞联合同步放化疗治疗局部晚期食管癌的临床研究

目的:探讨自体CIK细胞联合同步放化疗对局部晚期食管癌患者的临床疗效,监测患者细胞免疫功能、生活质量的变化,并评价其近期疗效和毒副反应。方法:选取2011年9月至2013年12月60例局部晚期食管癌患者,分为对照组30例,采用同步放化疗治疗;试验组30例,采用同步放化疗联合CIK细胞治疗。采用流式细胞术检测患者外周血T淋巴细胞亚群水平变化。结果:治疗后组间比较,试验组患者较对照组患者细胞免疫功能显著升高,其中CD3+T淋巴细胞百分率[(73.5±5.6)%vs(64.8±5.8)%,P=0.041]和CD3+CD56+T淋巴细胞百分率[(16.1±1.6)%vs(4.2±0.8)%,P=0.011]均较对照组显著升高。试验组的DCR较对照组明显提高,差异有统计学意义(90.0%vs 63.3%,P=0.030)。试验组生存质量明显改善且毒副反应轻。结论:与单纯同步放化疗相比,自体CIK细胞联合同步放化疗可显著提高局部晚期食管癌患者T淋巴细胞免疫功能,有效控制肿瘤生长,安全可靠。

食管鳞状细胞癌患者外周血PD-1和PD-L1的表达及其临床意义

目的:检测食管鳞癌患者外周血中程序性死亡分子1(programmed cell death 1,PD-1)、程序性死亡分子1配体(programmed cell death ligand 1,PD-L1)及IFN-γ表达情况,并分析其临床意义。方法选取2016年6月至2017年4月河北医科大学第四医院胸外科90例食管鳞状细胞癌患者(其中50例患者行手术治疗)和40例健康对照者为研究对象,收集研究其外周血液标本,采用酶联免疫吸附方法检测血清中可溶性PD-1(sPD-1)、可溶性PD-L1(sPD-L1)及IFN-γ的表达水平。采用SPSS 24.0软件对数据进行检验和相关性分析。结果:食管鳞癌组血清中sPD-1、sPD-L1及IFN-γ水平均明显高于正常对照组(P<0.05);食管鳞癌组手术前血清sPD-L1、IFN-γ水平均明显高于术后(P<0.05),而sPD-1水平两组比较无明显差异(P>0.05)。sPD-1、sPD-L1的表达水平与临床病理特征无明显相关(P>0.05),IFN-γ的表达水平与淋巴结转移情况相关(P<0.05),与T分期、TNM分期、肿瘤体积大小、肿瘤部位、组织分化程度、性别、年龄无明显相关(P>0.05)。血清中sPD-L1表达水平与IFN-γ无明显相关(P>0.05)。结论:食管鳞癌患者血清中sPD-L1较正常人表达升高,且术后表达较术前减少,说明血清中sPD-L1表达水平与病情发展变化有一定相关性。

晚期非小细胞肺癌免疫检查点抑制剂治疗专家共识解读

在全球范围内,肺癌是常见和致死率最高的恶性肿瘤,占所有癌症相关死亡的近20%[1]。2018年全球肺癌新发病例达到209万余例,肺癌相关死亡病例高达176万余例,同年我国统计数据显示约有77.4万的新增肺癌病例,其中69万人死于肺癌[2]。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是最常见的肺癌类型,约占所有原发性肺癌的85%,并且由于NSCLC的生理病理学特点,使很多患者在诊断时已是晚期,失去了最佳手术时机[1,3]。许多年以来,细胞毒性化疗是唯一可以延长晚期NSCLC患者存活率的治疗,传统的含铂双药化疗是治疗晚期NSCLC的标准方案,但5年生存率不足5%[3-4]。近年来,随着测序技术的进步和对肿瘤细胞生物学的进一步了解,NSCLC靶向治疗有所发展[5-6],但其仅针对特定驱动基因突变,驱动基因阴性患者仍亟待新的治疗方法。癌症免疫疗法是一种激活免疫系统识别并杀伤癌细胞的治疗方法[7-8]。针对肿瘤免疫逃逸的免疫检查点抑制剂已被研发问世[9],这些药物通过调节T细胞功能发挥作用,增强宿主对肿瘤细胞的免疫反应[3,5,8]。

CAR-T细胞治疗肿瘤的脱靶效应及其预防策略

嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)是单链抗体的可变区(single-chain variable fragments,scFv)和T细胞信号分子的重组融合蛋白,它使T细胞可以通过非MHC限制性方式识别特异性抗原。最近的临床研究证明,CAR-T细胞在治疗B细胞肿瘤中取得了显著效果。但在目前的临床应用中存在诸多限制,尤其是当肿瘤抗原在正常组织中表达时会造成脱靶效应。本文就靶抗原的选择、脱靶效应及相应的预防策略作一综述,期望这些策略的实施,将会提高CAR-T细胞治疗的安全性及有效性,使更多肿瘤患者从中获益。

维生素E琥珀酸酯诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡

目的研究维生素E琥珀酸酯(VES)对人食管癌Eca-109细胞系增殖、凋亡及相关蛋白表达的影响。方法实验组为不同浓度VES,对照组为同等体积RPMI-1640培养基,分别作用24、48和72 h后,MTT测细胞增殖;电镜观察细胞凋亡的形态学;流式细胞术(FCM)测凋亡率及survivin、caspase-3蛋白表达。结果各实验组抑制率随VES处理浓度的增加、作用时间的延长而逐渐升高(P<0.01)。实验组细胞呈现不同程度凋亡改变,且随VES浓度增加,凋亡率逐渐升高(P<0.05)。各实验组survivin蛋白表达减少(P<0.05),caspase-3蛋白表达增加(P<0.05)。Survivin与caspase-3表达呈负相关(r=-0.95,P<0.05)。结论 VES可抑制Eca-109细胞增殖、诱导凋亡,可能与下调survivin蛋白和上调caspase-3蛋白表达有关。

肿瘤免疫逃逸作用机制及在食管癌中的研究进展

肿瘤免疫逃逸对于肿瘤的存活和进展至关重要。肿瘤细胞可通过募集抑制性免疫细胞及分子来抑制抗肿瘤免疫应答,导致肿瘤逃逸。食管癌患者的病死率居于世界肿瘤致死疾病的第6位,尽管在诊断和治疗方面取得了一定进展,但其预后依然较差。通过对食管癌免疫逃逸机制的探索,可以为食管癌治疗提供新思路。本文就肿瘤免疫逃逸相关因子作用机制及在食管癌中的研究进展做一综述。

芍根方水煎剂与颗粒剂药效学作用比较研究

目的对比芍根方水煎剂与颗粒剂的药效学作用。方法取80只昆明种(KM)雄性小鼠,按体质量随机分为8组,即空白对照组,阳性对照组,颗粒剂高、中、低浓度组及水煎剂高、中、低浓度组,每组各10只。颗粒剂及水煎剂高、中、低浓度分别含生药3.066、1.533、1.022 g/mL。阳性对照组予0.2 mL/10 g云南白药灌胃,空白对照组予等容积蒸馏水灌胃,其余各组予等容积相应药液灌胃,连续7 d。末次给药后30 min,采用耳肿胀法制作炎症模型,观察各组小鼠耳肿胀率。另取80只KM雌性小鼠,分组及给药方法同上,采用热板致痛法观察末次给药1 h后,第30、60、90、120 min小鼠痛阈值。结果与空白对照组比较,阳性对照组颗粒剂高、中、低浓度组及水煎剂高、中、低浓度组耳肿胀率明显下降(P<0.05),60、90、120 min痛阈值明显提高(P<0.05),但颗粒剂高、中、低浓度组耳肿胀率及60、90、120 min痛阈值与水煎剂相同浓度组之间比较差异无统计学意义(P>0.05),抗炎、镇痛效果相当。与阳性对照组比较,颗粒剂及水煎剂高浓度组耳肿胀率比较差异无统计学意义(P>0.05),120 min痛阈值明显提高(P<0.05)。结论芍根方水煎剂与颗粒剂在抗炎消肿、镇痛作用方面无明显差异。与云南白药相比,芍根方2种剂型高浓度组镇痛作用显著。

PD-1、CTLA-4、BLTA在食管鳞状细胞癌患者外周血中的表达及临床意义

目的检测食管鳞癌患者外周血中抑制性协同刺激因子受体PD-1、CTLA-4、BLTA表达情况,并分析其临床意义。方法选取2016年6月—2017年4月河北医科大学第四医院胸外科90例食管鳞状细胞癌患者(其中50例患者行手术治疗)和40例健康对照者为研究对象,收集其外周血液标本,采用酶联免疫吸附方法检测血清中可溶性PD-1(s PD-1)、可溶性CTLA-4(s CTLA-4)及可溶性BLTA(s BLTA)的表达水平。结果食管鳞癌组血清中s PD-1、s CTLA-4及s BLTA水平均明显高于对照组(P<0.05);食管鳞癌组手术前后血清中s PD-1、s CTLA-4及s BLTA水平均无统计学差异(P>0.05)。s PD-1和s BLTA的表达水平与临床病理特征无相关性,s CTLA-4的表达水平与TNM分期相关(P<0.05),与T分期、N分期、肿瘤体积大小、肿瘤部位、组织分化程度、性别、年龄无相关性;血清中s PD-1、s CTLA-4及s BLTA两两间无相关性(P>0.05)。结论食管鳞癌患者血清中s CTLA-4较正常人表达升高,且s CTLA-4的表达水平与TNM分期相关,说明血清中s CTLA-4表达水平与病情发展变化有一定相关性。

胃腺癌骨骼肌转移癌1例

患者男性，74岁，2015年5月因左上腹痛就诊于河北省故城县医院。入院检查胃镜显示食管下段距鼻孔约41 cm始见全周浸润生长的隆起、溃烂，向下延续至贲门、胃底至胃体中段。咬检病理考虑贲门低分化腺癌。后患者就诊于河北医科大学第四医院，完善相关检查，初步诊断为胃腺癌Ⅳ期。期间行双下肢深静脉彩超显示双小腿肌间静脉增宽伴管腔内实性回声（考虑血栓形成）。给予氟尿嘧啶＋顺铂方案化疗1个周期，mFOLFOX6方案化疗5个周期，化疗结束日为2015年9月21日。治疗完毕全面复查，疗效评价为稳定。2015年10月患者右大腿出现疼痛的肿块，就诊于河北省故城县医院行肿物超声显示右大腿肌肉层不均质回声。患者再次就诊于河北医科大学第四医院，行右大腿肿物穿刺，病理活检示可见异型细胞团。免疫组织化学显示：CK（＋），CK7（＋），CK20（-），Vil？lin（＋），Ki-67（50%阳性），CDX2（灶性＋），CEA（-/＋），HER-2（3＋），低分化腺癌，不除外胃源性（图1）。请骨科会诊后因病变范围较大，且患者年老体弱，不建议手术。遂给予患者右大腿转移灶局部放疗联合阿帕替尼靶向治疗。靶向治疗过程中出现血痰，考虑不能排除药物不良反应所致，停用阿帕替尼。共放疗9次。患者身体不能耐受，拒绝继续治疗，出院。