建兰‘高山春色’在不同环境条件下栽培对比试验

本试验选用建兰‘高山春色’的新老成苗做为母苗,分别在人工气候室和种植大棚进行栽培对比试验。经过2个月的培养,结果表明,在主要气候因子中,人工气候室的昼夜温差和高光照量有利于‘高山春色’的叶芽生长,其新老成苗的叶芽增殖和叶片营养含量明显优于种植大棚。人工气候室栽培的新老成苗新长叶芽数倍率分别是种植大棚的2.1倍与4.4倍。叶绿素含量相对值与氮含量方面,用Duncan法进行显著性分析比较,得出人工气候室培养显著(P<0.05)高于大棚。因此,本次试验为建兰在人工气候室内高效栽培技术提供了新的方向,为后续高价值建兰的高效栽培提供技术支持。

沼泽型水牛FST基因克隆分析与组织表达模式

旨在克隆水牛卵泡抑素(follistatin, FST)基因,并对该基因进行生物信息学分析,检测其在水牛不同组织中的表达情况,为进一步探讨FST在水牛胚胎发育过程中的功能奠定基础。从水牛卵巢组织中提取RNA,反转录成cDNA后,利用RT-PCR技术克隆获得水牛FST基因CDS区的全长序列,并进行生物信息学分析。结果显示,水牛FST基因编码区全长1 035 bp,编码344个氨基酸。水牛FST基因与黄牛、鸡、绵羊、人、黑猩猩、褐家鼠、野猪和山羊的同源性分别为99.1%,81.4%,98.4%,91.9%,91.4%,89.3%,93.4%和81.4%,且在不同物种间高度保守,符合生物的进化规律。FST蛋白包含40个α-螺旋、63个延伸链及241个无规则卷曲,分别占11.6%(40个),18.3%(63个)和70.0%(241个),为经典分泌蛋白。qRT-PCR结果显示,FST在水牛胃、肌肉、卵巢、睾丸、心脏、肝脏、肺脏和脾脏组织中均有表达,其中在肺脏和卵巢中表达最高,睾丸中表达最低。本研究克隆得到了沼泽型水牛FST基因,并对不同组织内FST进行了基础的生物信息学分析,为阐明FST在水牛胚胎发育过程中的功能,提高水牛胚胎发育水平提供理论基础。

虾青素对猪卵母细胞体外成熟的影响

本研究旨在探讨虾青素(astaxanthin,Ast)对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活胚胎发育的影响,为进一步优化猪卵母细胞体外成熟培养体系提供参考。首先,将GV期猪卵母细胞培养在添加有不同浓度虾青素(0,5,10,20,40μmol/L)的体外成熟液中,40~44 h后统计第一极体排出率。结果显示与对照组相比,各处理组卵母细胞的第一极体排出率均显著升高(P<0.05),其中10μmol/L处理组卵母细胞的第一极体排出率显著高于5,20,40μmol/L处理组(P<0.05)。随后对MⅡ期卵母细胞进行孤雌激活处理,结果发现10μmol/L和20μmol/L处理组的卵裂率和囊胚发育率显著高于对照组(P<0.05),且10μmol/L处理组囊胚发育率显著高于20μmol/L处理组(P<0.05)。最后,检测虾青素处理后MⅡ期卵母细胞的活性氧水平、丙二醛及谷胱甘肽的含量,以及整个胚胎发育阶段中抗氧化酶相关基因SOD1和GPX4的表达变化,发现GV期卵母细胞经10μmol/L虾青素处理后,孤雌激活囊胚的细胞数极显著升高(P<0.01);而MⅡ期卵母细胞的活性氧水平和丙二醛含量与对照组相比极显著降低(P<0.01),谷胱甘肽含量显著升高(P<0.05)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,与对照组相比,GPX4基因在10μmol/L处理组MⅡ期卵母细胞中显著升高(P<0.05)。SOD1基因在10μmol/L处理组中MⅡ期卵母细胞、4-细胞和囊胚期的表达极显著高于对照组(P<0.01)。结果表明,卵母细胞体外成熟液中添加适量浓度的虾青素可有效促进卵母细胞的发育潜能。

睾酮对水牛卵泡颗粒细胞雌激素合成能力的影响

为了系统研究雄激素对水牛卵泡颗粒细胞类固醇激素合成的影响,本研究采用在颗粒细胞培养液中添加睾酮的方法,探讨睾酮对水牛颗粒细胞雌激素合成的影响。结果表明:添加10^(7)mol/L睾酮到水牛颗粒细胞培养液中能显著提高水牛颗粒细胞雌激素合成相关基因(CYP11A1、CYP19A1、3β-HSD和17β-HSD)表达和雌二醇分泌水平(P<0.05);且睾酮添加到水牛颗粒细胞培养液中48或72 h能显著提高水牛颗粒细胞雌激素合成相关基因(CYP11A1、CYP19A1和3β-HSD)表达和雌二醇分泌水平(P<0.05)。综上所述,10^(7)mol/L睾酮处理水牛颗粒细胞48或72 h有利于提高水牛颗粒细胞雌激素的合成能力。本研究为进一步探讨水牛卵泡发育类固醇激素分泌机制提供一定理论依据。