伪狂犬病病毒上海株gE基因克隆及其含GFP基因质粒载体的构建

根据已发表的伪狂犬病病毒 (PRV)gE基因序列设计 1对引物 ,用PCR法扩增了PRV上海株 (PRV SH)的 gE基因 ,并克隆入 pUC18中。利用gE基因中限制性酶切位点 ,把绿色荧光蛋白 (GFP)的基因表达盒插入 gE基因中 ,构建了含GFP的载体 pUCgE GFP。

生物异源物传感系统研究进展

生物异源物与人体的关系本质上是它们与基因组及其产物的相互作用 ,生物异源物通过特定靶点 (效应系统 )作用于人体 ,而人体则以生物转化酶和转运载体 (处置系统 )来消除影响以维持稳定。生物异源物传感系统介导了环境化学信息传递给基因组并诱导处置系统的表达和作为 ,调控CYP3A和MDR1诱导表达的核受体PXR(NR1I2 )是该系统的重要成员。PXR等核受体传感许多生物异源物的刺激并诱导多个基因的表达 ,它们的底物和靶基因有某些交叉性。研究PXR等的结构与功能 。

垂体瘤转化基因1研究进展

垂体瘤转化基因1(PTTG1),也被称为分离酶抑制蛋白基因,是近几年从大鼠垂体肿瘤中发现的癌基因。它不但可以与分离酶结合,使分离酶失活,从而抑制姐妹染色单体的分离,还具有转录激活活性。已有的染色质免疫共沉淀结合芯片数据显示,PTTG1不仅可以直接调控基因的转录,也可以与其他蛋白,如PTTG1结合因子(PBF)、p53、Sp1、上游刺激因子1(USF1)等相互作用来调控下游基因的转录。在NIH 3T3细胞中,PTTG1激活c-Myc的转录,增强NIH 3T3细胞在裸鼠体内的成瘤能力。PTTG1也能激活肿瘤细胞中成纤维细胞生长因子2(FGF2)的转录,从而促进肿瘤血管生成。PTTG1结合p53、抑制p21表达、激活周期蛋白D3的能力,提示它在凋亡、细胞周期和衰老方面也发挥作用。另外,PTTG1在肿瘤转移和肝癌的发生发展中也发挥着重要作用。我们简要综述了PTTG1的靶基因,及其在肝癌及肿瘤转移中的研究进展。

携带GFAP启动子的慢病毒载体介导外源基因在肝星状细胞的特异表达（英文）

目的旨在构建包含由GFAP启动子介导的荧光素酶的慢病毒载体,检测体内外靶向肝星状细胞的外源基因表达的特异性和效率。方法通过报告基因实验筛选介导效率较高的GFAP启动子,以CMV启动子作为阳性对照分别介导荧光素酶在小鼠肝星状细胞(JS1)、人肝星状细胞(LX-2)及人肝细胞(L-02)中的表达。通过尾静脉注射将包装的慢病毒注射到四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠体内,通过活体成像和Western blot检测慢病毒颗粒在小鼠体内的分布,并通过免疫双荧光染色检测肝星状细胞的特异表达。结果人GFAP启动子比小鼠GFAP启动子驱动基因表达的效率高,而且在LX-2和JS1细胞中,人GFAP启动子介导的荧光素酶的活性及表达显著高于L-02细胞。活体成像显示小鼠腹部有荧光素酶的表达。GFAP启动子介导的荧光素酶可以与肝星状细胞的特异性生物标记蛋白GFAP、Desmin和α-Sma共定位。结论成功构建包含由GFAP启动子介导的荧光素酶的慢病毒载体,在体外细胞系以及小鼠体内肝中均可以实现荧光素酶在肝星状细胞中特异性表达。