C5补体抑制剂OmCI的重组表达、纯化和活性研究

OmCI(Ornithodoros moubata complement inhibitor,1)是靶向补体C5的药物,用于治疗补体介导的疾病。该研究建立了1的重组、表达、分离、纯化方法,并对其进行活性验证。采用重组大肠埃希菌高密度发酵技术,以胞外可溶形式表达1,融合蛋白的发酵表达产量为317 mg/L。发酵上清经调酸预处理、酶切去除标签蛋白,阴离子交换色谱、反相色谱纯化后得到纯度为98.2%的目的蛋白,总收率为62.8%。目的蛋白经质谱验证,相对分子质量正确;采用体外补体经典途径的抑制试验测得IC50值为8.59 nmol/L,与补体C5的结合常数(KD)为4.74 nmol/L,证明其在大肠埃希菌中成功表达,且具有C5抑制活性。该研究为C5补体抑制剂类药物的高效制备提供了参考。