维生素D及维生素D受体在慢性乙型肝炎患者体内表达水平及抗病毒相关机制的研究

目的研究维生素D(Vit D)、肝脏维生素D受体(VDR)在慢性乙型肝炎(CHB)患者体内表达水平及其与肝功能、乙型肝炎病毒(HBV)血清学指标相关性,并进一步探讨Vit D体外能否发挥抗病毒作用。方法检测81例初治CHB患者和40例健康体检者血清Vit D含量;采用免疫组化技术分析肝组织VDR表达情况;Vit D单独及联合IFN-α处理HepG2.2.15细胞,检测处理后细胞培养上清液HBsAg、HBeAg、HBV DNA含量,分析各组细胞VDR、IRF-9、MxA蛋白表达水平。结果 CHB组血清Vit D含量低于健康对照(HC)组(P<0.05);CHB组血清Vit D与白蛋白(ALB)呈正相关性(r=0.339,P=0.002),与HBV DNA载量呈负相关性(r=-0.274,P=0.013),与e抗原状态有关(P<0.05),与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(ALP)、r-谷氨酰基转移酶(GGT)、HBsAg、HBcAb等无相关性;Vit D、VDR表达与CHB严重程度相关,重度CHB患者血清Vit D、肝组织中VDR表达水平低于轻、中度CHB患者;Vit D+IFN-α联合组较空白组、单独处理组HepG2.2.15细胞VDR、JAK-STAT途径分子IRF-9及下游抗病毒蛋白MxA的表达增强,HBV相关抗原分泌下降。结论慢乙肝患者体内可能存在Vit D/VDR信号通路的功能下降,Vit D可能通过上调VDR表达进而增强IFN-JAK-STAT信号途径发挥协同IFN-α抗病毒效应。

SPINK1在肝细胞癌中的表达及临床价值研究

目的检测丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal1(SPINK1)在肝细胞癌(HCC)中的表达水平,分析SPINK1单独及联合甲胎蛋白(AFP)检测对HCC的诊断效能,探讨SPINK1在HCC短期预后评估中的价值。方法收集HCC组患者(87例)、慢性肝病组患者(73例)及健康对照组志愿者(45例)血清。采用Kruskal-Wallis H检验比较SPINK1在各组的表达水平,并分析其与HCC患者Child-Pugh分级的关系;绘制ROC曲线分析SPINK1、AFP及两者联合检测对HCC的诊断效能;采用Kaplan-Meier法和Cox回归模型分析HCC无病生存期(DFS)的危险因素。结果HCC组血清SPINK1及AFP水平高于慢性肝病组及健康对照组(χ^2=87.28、72.55,P<0.01),且SPINK1在慢性肝病组和健康对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。SPINK1诊断HCC的敏感度高于AFP,两者ROC曲线下面积(AUC)差异无统计学意义(P>0.05)。联合检测的特异度及AUC均高于单项检测(P<0.05)。SPINK1辅助诊断AFP阴性HCC的AUC为81.70%(95%CI:0.74~0.88),取cut-off值为1.75 ng/ml时,特异度为71.18%,敏感性为95%。不同Child-Pugh分级HCC患者血清SPINK1水平差异有统计学意义(χ2=10.17,P<0.05)。血清SPINK1高水平组HCC患者短期DFS低于低水平组(P<0.01),血清SPINK1(HR=9.92,95%CI,2.82~34.87,P<0.01)是HCC患者短期DFS的独立危险因素。结论血清SPINK1对HCC有较高的诊断价值,并且在AFP阴性HCC的诊断中具有重要补充诊断意义。高水平SPINK1对HCC的短期不良预后具有较高预测价值。