青蒿琥酯通过介导铁死亡逆转结肠癌细胞5-氟尿嘧啶耐药的作用研究

目的探讨青蒿琥酯(ART)通过介导铁死亡逆转结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的作用。方法以人结肠癌HT-29/5-FU耐药细胞株为研究对象,采用MTS法检测5-FU、ART以及5-FU+ART对HT-29/5-FU细胞的抑制作用,并计算其逆转耐药倍数;克隆形成实验检测HT-29/5-FU细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平;试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)水平;Western blotting检测细胞内Nrf2和GPX4蛋白表达水平。结果40μmol·L^(-1)ART可逆转HT-29/5-FU细胞对5-FU的耐药,逆转倍数为2.9倍;5-FU联合ART可抑制HT-29/5-FU细胞的克隆形成能力,升高细胞内ROS和MDA水平,并降低Nrf2及GPX4蛋白表达水平,且这些效应能够被铁死亡抑制剂Ferrostatin-1所逆转。结论ART能够通过抑制Nrf2、GPX4表达诱导铁死亡,从而逆转HT-29/5-FU细胞对5-FU的耐药。

混合营养与肠外营养对食管癌术后患者临床疗效比较的Meta分析

目的:系统评价混合营养(MN)与肠外营养(PN)支持对食管癌术后患者的临床疗效。方法:计算机检索英文数据库PubMed、EMbase、The Cochrane Library;中文数据库中国知网、维普、万方等,查找关于MN对比PN支持的食管癌术后患者的随机对照试验(RCT),检索时限截至2018年5月。由2位研究者按标准独立筛选文献、提取资料并评价偏倚风险后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:最终纳入15个RCT,共1 514例患者。Meta分析结果显示:与PN相比,MN能提高食管癌患者术后白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白水平,缩短术后肛门恢复排气时间、住院时间,降低肺部感染和切口感染的发生率;但吻合口瘘的发生率、消化道症状发生率,两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:与PN相比,MN能提高食管癌术后患者的营养状况,降低并发症的发生率。

二甲双胍联合索拉非尼对HepG2干细胞样细胞增殖的影响

目的探讨二甲双胍联合索拉非尼对HepG2干细胞样细胞增殖的影响。方法采用无血清干细胞富集培养基对人肝癌细胞系HepG2细胞进行富集培养,获得干细胞样细胞悬浮球,观察记录悬浮球生长过程中的形态变化,测量直径并计算数目。将HepG2干细胞样细胞和HepG2细胞接种于软琼脂胶中,比较两组细胞的克隆形成能力。分别采用不同浓度的索拉非尼处理HepG2干细胞样细胞及HepG2细胞24、48、72 h,选择最佳药物作用时间。分别将浓度为1、3、5 mM的二甲双胍+5μM索拉非尼联合作用于HepG2干细胞样细胞,CCK8法检测细胞增殖活性,比较联合用药组与索拉非尼单独用药组HepG2干细胞样细胞增殖抑制率和细胞悬浮球直径。结果二甲双胍联合索拉非尼对HepG2干细胞样细胞作用的最佳时间为48 h。不同浓度联合用药与单独用药48 h后细胞增殖抑制率和悬浮球直径的差异均具有统计学意义(P<0.05)。浓度分别为3 mM和5 mM联合用药组作用48 h后细胞增殖抑制率更高(P<0.05),细胞悬浮球直径更小(P<0.05)。结论二甲双胍联合索拉非尼能够抑制HepG2干细胞样细胞的增殖,提高其对索拉非尼的敏感性,为临床上二甲双胍联合索拉非尼治疗肝癌提供科学理论依据。

“柏拉图”分析法在静脉药物配置中心内差件数中的应用

目的探讨"柏拉图"分析法在静脉药物配置中心内差件数中的应用。方法将"柏拉图"分析法应用到降低静脉药物配置中心内差中,分析找出造成内差的原因,制定相应的对策并实施,同时评估效果。结果内差由原来的平均每周27.5件降至16.25件,方法收到良好效果。结论柏拉图分析法便于药学工作者从错综复杂的工作中一针见血地的找到问题的关键,对提高药学服务质量、开展持续优质服务提供了改进的可靠依据。

沙利度胺调控PD-L1抑制HT-29结肠癌细胞的作用及机制研究

目的:探讨沙利度胺对HT-29结肠癌细胞的抑制作用及其机制。方法:CCK-8检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞增殖的作用;流式细胞术检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞凋亡的作用和对HT-29结肠癌细胞PD-L1表达的作用;Western Blot检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞c-Myc、STAT3、HIF-1蛋白表达的影响。结果:沙利度胺各浓度(40、80、160、320μmol·L-1)明显抑制HT-29结肠癌细胞的增殖;沙利度胺各浓度(20、40、80μmol·L-1)明显促进HT-29结肠癌细胞的凋亡,明显减少HT-29结肠癌细胞表面PD-L1的表达,明显减少HT-29结肠癌细胞c-Myc、STAT3、HIF-1蛋白的表达。结论:沙利度胺对HT-29结肠癌细胞具有抑制作用,其机制可能与减少PD-L1表达及抑制癌细胞上游c-Myc、STAT3、HIF-1信号分子表达有关。

鸦胆子油乳注射液正交试验优化调配技术及其在不同溶媒中稳定性考察

目的:优化鸦胆子油乳注射液调配工艺,考察其与0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液及葡萄糖氯化钠注射液配伍的稳定性。方法:通过正交试验优化鸦胆子油乳注射液调配工艺,测定成品输液的pH、不溶性微粒及主要成分油酸、亚油酸的含量变化,考察鸦胆子油乳注射液在不同溶媒中配伍的稳定性。结果:鸦胆子油乳注射液用250 ml0.9%氯化钠注射液稀释效果最佳。4种溶媒配制的成品输液在存放12 h内pH以及不溶性微粒较稳定。油酸、亚油酸的含量在不同溶媒中随着时间的增加均逐渐减少,0~2 h含量减少幅度最小,9~12 h含量减少幅度最大,其中10%葡萄糖注射液中油酸、亚油酸含量均出现10%以上的降解。结论:鸦胆子油乳注射液最佳调配工艺为0.9%氯化钠注射液250 ml作为溶媒稀释10 ml药品溶液;0.9%氯化钠注射液、葡萄糖氯化钠注射液及5%葡萄糖注射液调配的成品输液12 h内稳定,10%葡萄糖注射液调配的成品输液建议现用现配。

双硫仑对结肠癌细胞SW480生长和侵袭的作用及机制研究

目的:探讨双硫仑(disulfiram)对SW480结肠癌细胞体外增殖、迁移和体内生长的作用及机制。方法:MTS法检测不同浓度双硫仑对结肠癌细胞SW480增殖的作用;划痕实验双硫仑对SW480细胞迁移的影响;Transwell实验双硫仑对SW480细胞侵袭的影响;裸鼠移植瘤模型研究双硫仑对SW480细胞体内增殖的抑制作用;免疫组化检测双硫仑对裸鼠移植瘤组织中低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)和葡萄糖转运蛋白1(Glucose transporter 1,GLUT1)蛋白表达的影响。结果:双硫仑对SW480细胞增殖有抑制作用,且呈现剂量依赖性;双硫仑4μmol·L^(-1)和8μmol·L^(-1)浓度组均能够抑制SW480细胞迁移和侵袭能力,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05);双硫仑20 mg·kg^(-1)和40 mg·kg^(-1)剂量组均能够抑制SW480细胞裸鼠移植瘤的生长(P<0.01),且抑制移植瘤中HIF-1α和GLUT1蛋白的表达。结论:双硫仑可抑制SW480结肠癌细胞的增殖和转移,其机制可能与抑制HIF-1α和GLUT1蛋白的表达有关。

β-榄香烯抗DDP耐药卵巢癌细胞SKOV3/DDP作用及机制研究

目的:研究β-榄香烯对DDP耐药卵巢癌细胞SKOV3/DDP增殖生长、逆转耐药的作用,以及对耐药细胞中耐药相关蛋白表达的影响。方法:CCK-8法研究β-榄香烯对SKOV3/DDP细胞增殖的抑制作用;克隆形成实验研究β-榄香烯对SKOV3/DDP细胞克隆形成的影响;流式细胞术研究β-榄香烯对SKOV3/DDP细胞凋亡的影响;CCK-8法研究β-榄香烯对SKOV3/DDP细胞产生顺铂(DDP)耐药的逆转指数;Western Blot法研究β-榄香烯对SKOV3/DDP细胞中耐药相关蛋白ABCB1、LRP和P-gp表达水平的影响。结果:β-榄香烯在20、40、80μmol·L^(-1)时能够抑制SKOV3/DDP细胞的增殖、克隆形成并促进细胞凋亡;β-榄香烯在不具有直接杀伤细胞作用的10μmol·L^(-1)时即可以逆转SKOV3/DDP细胞对DDP的耐药,其逆转耐药指数为2.58倍;β-榄香烯在20、40、80μmol·L^(-1)时能够减少耐药相关蛋白ABCB1、LRP和P-gp表达。结论:β-榄香烯能够直接抑制SKOV3/DDP细胞增殖、促进其凋亡并逆转细胞DDP耐药,其作用机制可能与减少耐药相关蛋白ABCB1、LRP和P-gp表达有关。

苦参碱对HCCLM3人高转移性肝癌细胞体外转移的作用及机制研究

目的:探讨苦参碱对HCCLM3人高转移肝癌细胞体外转移的作用及其机制。方法:CCK-8检测不同浓度的苦参碱对HCCLM3癌细胞的增殖作用,选取不具有直接抑制细胞增殖效应的药物浓度进行细胞划痕实验,研究苦参碱对HCCLM3癌细胞迁移的影响;Transwell实验研究苦参碱对HCCLM3癌细胞侵袭的抑制影响;实时定量PCR(RT-PCR)和WesternBlot实验研究苦参碱对HCCLM3癌细胞E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(Matrix Metalloprotinase,MMP)-2和MMP-9因子mRNA和蛋白的表达。结果:苦参碱4、8、16 mg·mL-1剂量对HCCLM3癌细胞不产生直接抑制作用(P>0.05);苦参碱4、8、16 mg·mL-1剂量能够抑制HCCLM3癌细胞的迁移和侵袭,且与苦参碱0 mg·mL-1组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);苦参碱4、8、16 mg·mL-1剂量能够减少HCCLM3癌细胞的N-cadherin、Vimentin、MMP-2和MMP-9因子mRNA和蛋白的表达,并增加E-cadherin mRNA和蛋白的表达。结论:苦参碱能够抑制HCCLM3癌细胞的转移和侵袭,其机制可能与抑制细胞上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白以及MMP-2和MMP-9有关。

川芎嗪逆转脂肪细胞介导的卵巢癌奥沙利铂耐药的作用及机制研究

目的:研究川芎嗪(Ligustrazine)逆转脂肪细胞介导的卵巢癌奥沙利铂耐药的作用,以及对肿瘤细胞中耐药相关蛋白ABCB1、ABCC1和ABCG2表达的影响。方法:MTS法研究川芎嗪逆转脂肪细胞介导的卵巢癌奥沙利铂耐药的IC50值和逆转耐药系数;流式细胞实验研究川芎嗪对脂肪细胞介导的耐药卵巢癌细胞的凋亡水平的影响;划痕实验研究川芎嗪对脂肪细胞介导的耐药卵巢癌细胞的迁移能力的影响;Western Blot研究川芎嗪对肿瘤细胞中耐药相关蛋白ABCG1、ABCC1和ABCG2表达水平。结果:川芎嗪能够逆转脂肪细胞介导的卵巢癌奥沙利铂耐药,其逆转耐药系数为2.8;川芎嗪能够增加脂肪细胞和肿瘤细胞共培养体系下肿瘤细胞的凋亡;川芎嗪能够抑制脂肪细胞和肿瘤细胞共培养体系下肿瘤细胞的迁移;川芎嗪能够减少肿瘤细胞中耐药相关蛋白ABCB1、ABCC1和ABCG2的表达。结论:川芎嗪能够逆转脂肪细胞介导的卵巢癌奥沙利铂耐药的作用且其机制与减少耐药相关蛋白ABCB1、ABCC1和ABCG2的表达有关。

单胺氧化酶抑制剂氯吉灵抑制结肠癌的作用及机制研究

目的:研究单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAO-A)抑制剂氯吉灵(Clorgyline)对结肠癌细胞增殖、转移的作用,以及其对MAO-A的酶活、MAO-A、MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响。方法:MTS法检测不同浓度Clorgyline对结肠癌细胞SW480增殖的作用;划痕实验研究Clorgyline对SW480细胞迁移的影响;Transwell实验研究Clorgyline对SW480细胞侵袭的影响;裸鼠移植瘤模型研究Clorgyline对SW480细胞体内增殖的抑制作用;酶活试剂盒检测Clorgyline对裸鼠移植瘤组织中MAO-A的作用;Western blot检测Clorgyline对裸鼠移植瘤组织中的MAO-A、MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响。结果:Clorgyline对SW480细胞增殖有抑制作用,且呈现剂量依赖性;Clorgyline 10μmol·L^(-1)和20μmol·L^(-1)浓度均能够抑制SW480细胞迁移和侵袭能力,与对照组相比具有显著性差异(P<0.01); Clorgyline 20和40 mg·kg^(-1)均能够抑制SW480细胞裸鼠移植瘤的生长(P<0.01),抑制裸鼠移植瘤组织中MAO-A的酶活(P<0.05),抑制MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平,而对MAO-A蛋白的表达水平没有影响。结论:Clorgyline抑制SW480结肠癌细胞的增殖和转移,其机制可能与抑制MAO-A酶活和转移相关蛋白MMP-2、MMP-9的表达有关。