流行性出血热沙鼠肾细胞灭活疫苗的现场评价

为比较沙鼠肾细胞灭活疫苗3个连续批号间和2个免疫程序间的免疫效果与安全性,作者于1992年3～6月在驻陕某军校学员与战士1186人中进行整群接种.其中550人分为5个抗体检测组(含1个安慰剂组).随机决定疫苗接种的批次和程序,仅91-32批按两个程序(0、7、28 d和0,30,60 d)各接种1个组,余均按0,7,28 d接种.另638人仅做反应观察.完成全程免疫的接种率为93.5％.接种反应率按人次计算为0.6％,反应轻,无异常反应,疫苗是安全的.用抗血凝素单克隆抗体ELISA与ELISA捕捉法检测了血清特异性HI与IgM抗体.3批疫苗(0,7,28d程序组)血清抗体阳转率[HI阳性和(或)IgM阳性]平均为49.5%(35.7％～53.8％),HI抗体的GMT分别为1:208,1:211与1:156,阳转率与GMT均无显著差异,表明疫苗生产工艺较稳定,91-32批2个免疫程序间免疫效果未示明显差别.而安慰剂组各种抗体阳转率均为0％,说明疫苗是有效的.

单纯疱疹病毒单克隆抗体的研究及其应用

本文简要报道本室近年来在抗单纯疱疹病毒单克隆抗体研究方面的结果。①应用淋巴细胞杂交瘤技术,建立了18株稳定分泌抗单纯疱疹病毒单克降抗体的杂交瘤细胞系。②探讨了不同株单克隆抗体介导体外中和作用和动物体内保护作用的机制。③建立了应用单克隆抗体检测病毒抗原的方法。④应用型特异性和型共同性单克隆抗体对临床病毒分离株进行了病毒分型和抗原性分析。⑤应用单克隆抗体纯化了病毒的结构蛋白并对其特性做了鉴定。

进一步提高研究生培养质量之我见

培养研究生必须将经常性的思想政治教育放在首位政治与业务这一对矛盾,二者之间的关系,不少研究生在理论上似乎是清楚的,但在实践中有时又是糊涂的。例如。

培养博士生要提倡严新高超

为了提高博士生的学术水平和独立科研工作能力,在博士生培养过程中,应采取有力措施,提倡“严、新、高、超”。严——要求博士生在集中学习的半年时间里,学好政治、外语(第一及第二外语)及专业基础课,并通过课程考试。同时,要求他们阅读本专业和学科某一研究方向领域内近年发表的10—20篇学术论文,要求弄清该领域的历史情况、课题的理论意义、应用前景、发展动态及存在的问题,最后写出“文献综述”报告。博士生在本科内进行的学术报告和答辩。

性传播疾病(十)——妇女生殖器疱疹病

单纯疱疹病毒(HSV)可引起皮肤、粘膜及多种器官感染的疾病。通过性接触感染发生生殖器疱疹病,属于“性传播疾病”。HSV还关系到宫颈癌病因及新生儿疱疹病的传染源问题,严重威胁着妇幼的生命健康。1.生殖器疱疹的症状生殖器疱疹病初次感染时80%没有症状。

肾综合征出血热患者外周血全淋巴细胞和异型淋巴细胞IFN—γ与其表型的研究

本文应用APAAP技术对肾综合征出血热(HFRS)患者PBMC及用Percoll纯化后的异型淋巴细胞的各种表型和IFN—γ表达进行了研究。并用ABC和APAAP双标技术研究了IFN—γ表达细胞在PBMC群及亚群中的分布和IFN—γ与HFRSV抗原间的关系。结果表明,(1)急性期PBMC中T细胞比例下降,B细胞比例增加;急性期各种活化抗原表达明显高于恢复期。(2)急性期IFN—γ表达细胞比例明显大于恢复期,rHuIFN—γ阻断试验及正常人PBMC替代实验表明IFN—γMcAb为特异性识别;IFN—γ表达细胞主要包括T_4、T_8和NK细胞。急性期和恢复期IFN—γ表达的细胞分布未见明显变化。IFN—γ表达是细胞受抗原活化所致,而非病毒感染所诱生。(3)异型淋巴细胞除T、B细胞外,还有NK细胞,且T_8大于T_4。异型淋巴细胞活化抗原表达明显高于PBMC。除去母细胞后的小细胞各种分化抗原表达基本接近正常人,但活化抗原高于正常人。(4)在病程中HLA—ABC、β2m未见明显变化。此结果对于阐明HFRS淋巴细胞群及亚群紊乱的本质及机理、异型淋巴细胞的本质和作用具有较重要的意义。

日本乙型脑炎病毒单克隆抗体的抗原结合位点及亲和力测定

用快速酶联免疫吸附试验双抗体夹心法(RDS-ELISA),测定了6株抗日本乙型脑炎病毒(JEV)单克隆抗体(nG2、2H4、2D2、mG9、2F2、mC3)的抗原结合位点及相对亲和力。通过ELISA相加试验证实,6株单克隆抗体识别5个不同的抗原位点.2H4和2F2识别的抗原位点相同或接近,而其余单克隆抗体则识别不同的或相距较远的抗原位点。从50％最大结合的单克隆抗体浓度分析可知,6株单克隆抗体的相对亲和力为nG2>2H4>2D2>mG9>2F2>mC3,浓度范围约为0.01～1.50ng。本研究为JEV单克隆抗体在诊断学及其疫苗研究中的应用提供了必要的资料。

肾综合征出血热病毒50K结构蛋白免疫学特性的初步研究

以McAb亲和层祈纯化的HFRS病毒50K结构蛋白免疫BALB/c小鼠,证明其具有较好的免疫原性,可刺激产生中和抗体。该抗体不仅可中和细胞培养中的病毒,对HFRS病毒感染裸鼠也有一定保护作用。

肾综合征出血热病毒50kD结构蛋白的抗原位点分析

采用23株抗HFRS病毒McAb,以放射免疫沉淀及ELISA等试验,证实HFRS病毒的50kD蛋白为该病毒的核蛋白(NP)。用抗NP的McAb对经亲和层析纯化的NP以ELISA阻断试验进行抗原位点分析,结果表明该蛋白与一般有囊膜病毒的NP相比,有两点明显的不同。一是HFRS病毒的NP上不仅有组特异性抗原位点,而且有型特异性抗原位点,两者都至少分布在2个区域,这些抗原位点及其分布区域之间有部分重叠或比较靠近。二是HFRS病毒的NP上可能存在中和抗原及血凝抗原位点。

一种高度敏感的改良的IL-1检测方法

采用CTLL-2检测IL-1诱导小鼠胸腺瘤细胞系EL_4产生IL-2活性,建立了一种间接检测IL-1的方法。通过对多种影响因素进行探讨,选择了较适的诱导血清浓度,细胞浓度,诱导时间和转移诱导上清稀释度,从而使检测IL-1的敏感性达10^(-3)～10^(-4)U/ml(2.5～25×10^(-4)Pg/ml,约为小鼠胸腺细胞检测方法的10~2～10~3倍),整个检测流程可在40小时内完成。若用CTLL-2和EL_4细胞同时培养的一步法检测,敏感性约为10^(-1)U/ml,但30小时内可完成检测。此法不受高浓度rHuTNF-α、rHuTNF-β、rHuIL-6干扰,IL-2、ConA、PHA、LPS和SEB对检测系统只有较弱的影响,但A23187可明显地干扰检测系统。因此,本方法可用于基础和临床研究过程中不同来源的IL-1生物学活性检测。

抗金葡菌肠毒素单克隆抗体的实验和应用研究

抗金葡菌肠毒素单克隆抗体的实验和应用研究＊董邦权李恩善雷祚荣１杨琨金伯泉汪美先（第四军医大学免疫学教研室，西安７１００３２）由金黄色葡萄球菌产生的肠毒素（ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌＥｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ，简称ＳＥ）是一组分子量为２４～３０ｋｄ的单肽...

单克隆抗体对肾综合征出血热病毒感染乳鼠保护作用的研究

HFRS病毒陈株100LD_(50)腹腔感染新生乳鼠后24小时,腹腔分别接种24株抗HFRS病毒McAb,观察McAb对感染新生乳鼠的保护作用。结果发现,有5株McAb保护率为100％,1株McAb保护率为17％,另有7株McAb可使感染乳鼠的发病死亡时间推迟。取有明显保护作用的5株McAb分别接种感染后不同时间的乳鼠,结果在48小时内接种保护率均达100％;但随接种时间推后,保护率逐渐下降,感染后10天接种几乎无保护作用。此5株McAb保护作用均优于多克隆的免疫血清。应用不同稀释的McAb 3D8进行保护试验,发现保护效果与接种剂量密切相关。采用固定抗体,稀释病毒方法测得McAb 3D8对HFRS病毒陈株感染乳鼠的保护指数为5.8。

放射免疫沉淀试验鉴定单纯疱疹病毒糖蛋白C

用放射免疫沉淀试验和单纯疱疹病毒1型、2型(HSV—1/HSV-2)型间重组株作物理谱图的方法.鉴定出抗HSV的单克隆抗体(McAb) 1A12、Mad-2、2D11、CM-D3、2A8和1C_4的靶抗原是一组分子量在105～130Ka之间的糖蛋白,其编码基因定位于长单一序列(UL)上,在0.536～0.682遗传单位之间,与gC的编码基因部分重叠。故认为这些McAbs的靶抗原为gC,其中,Mad-2和CM-D3分别为HSV-1和HSV-2型特异性,其靶抗原分别为gC-1和gC-2。ELISA阻断试验结果表明,4株型共同性McAbs 1A12、2D11、2A8和1C4.抗gC上4个独立的抗原位点。

邻苯二酚2,3-双加氧酶在大肠杆菌的表达与定域

本文在大肠杆菌/枮草芽孢杆菌间的穿梭质粒pTG 402的基础上构建了几个新的带有显色标志基闲xylE的表达质粒,摸索了该基因所编码的邻苯二酚2,3-双加氧酶(CatO_2ase)的表达条件,分析了该酶一级结构与二级结构的亲水性和疏水性,测定了它在大肠杆菌中的产量与分布。结果表明,CatO_2ase与各质粒的表达量不等,表达量高低与培养时间、宿主菌及诱导与否等影响因素有关;表达后有部分酶可在胞外测出,但大部分仍定域于膜内,亲、疏水性分析示该酶不具分泌性蛋白的显著特点。因该酶易于检测和定量,可作为一种选择性标记和监测指示系统在基因工程中推广应用,同时亦为用基因工程菌消除芳烃类化合物的污染提供了理论依据。

单克隆抗体治疗单纯疱疹性角膜炎的临床观察

应用抗HSV 糖蛋白gC 和gD 的单克隆抗体制成的滴眼液,滴眼治疗单纯疱疹病毒性角膜炎患者共43例46只眼,其中治愈39只眼(84.8%),基本治愈7只眼(15.2%),总有效率为100%.表明局部应用单克隆抗体制剂是治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的一条新途径。

家鼠型肾综合征出血热病毒单克隆抗体的制备与鉴定

以家鼠型HFRS病毒R22株免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0-Ag14融合,获得了23株能稳定分泌HFRS病毒特异性McAb的杂交瘤细胞系。以18株不同型别的HFRS病毒株进行分析,结果表明上述McAb中有些为HFRS病毒组特异性的,有些为家鼠型特异性的。有2株McAb对家鼠型HFRS病毒株具有较高的中和活性,对HFRS病毒R22株感染乳鼠也有明显的保护作用。

单克隆抗体对HFRS病毒两种粗制抗原相对亲和力的测定

采用ELISA测定32株抗HFRS病毒McAb对该病毒两种粗制抗原的相对亲和力,发现每一株McAb对两种病毒抗原的亲和力相同或基本相同,而各株McAb对同一病毒抗原的亲和力则有所不同,有些差别很大。按50％最大结合浓度分析,可分为3组。1组13株McAb为0.003～0.8μg/ml,Ⅱ组9株McAb为0.1～8μg/ml,Ⅲ组10株McAb为50～300μg/ml。这一结果为选择应用这些McAb提供了依据。

实验性小鼠柯萨奇B_3病毒心肌炎自然杀伤细胞活性和干扰素测定

测定了BALB/c鼠柯萨奇B_3病毒(Cox B_3)心肌炎病理过程中脾NK细胞活性及血清、心肌组织匀浆中干扰素水平。在感染后的第3天,NK细胞活性及血清、心肌组织匀浆中干扰素滴度达高峰,并以较高水平维持到第7天。小鼠受染后3～7d心肌组织中病毒滴度亦达峰值。随着病毒从心肌中消失,NK细胞活性及干扰素滴度急剧降至对照组水平。实验结果提示:鼠Cox B_3感染早期,体内NK细胞活性和干扰素滴度升高的主要作用是溶解病毒感染细胞、限制病毒复制。

胶体金免疫电镜技术鉴定一株抗HFRS病毒囊膜糖蛋白和核蛋白双特异性McAb

采用超薄切片和胶体金免疫电镜技术鉴定抗HFRS病毒McAb 3G1,结果发现其既对成熟病毒颗粒和囊膜颗粒标记阳性,又对颗粒状包涵体及丝状颗粒包含体标记阳性,从而提示该株McAb可能具有HFRS病毒囊膜糖蛋白和核蛋白双特异性。

细菌内毒素作用机理的研究进展

细菌内毒素对机体免疫系统的影响具有双重性，内毒素（ＬＰＳ）通过诱导机体内的单核巨噬细胞释放多种介质分子而发挥其生物学效应，其中细胞因子在感染性休克中起重要作用。内毒素结合蛋白（ＬＢＰ）有促进ＬＰＳ与单核巨噬细胞表面的相应受体发生结合的作用。而在ＬＰＳ诱导单核巨噬细胞产生细胞因子过程中，细胞表面ＬＢＰ受体（ＣＤ１４）的存在具有一定的意义。