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高效液相色谱-串联质谱法测定食用香精中高氯酸盐的含量
被引量:
9
1
作者
邓其馨
刘泽春
+6 位作者
黄朝章
黄华发
张廷贵
谢卫
蔡国华
柯艺萍
汪金珠
《理化检验(化学分册)》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期475-479,共5页
近来,奶粉、茶叶、饮用水中检出高氯酸盐的报道引发了社会的关注。高氯酸盐化学结构十分稳定,可在正常环境条件下存在数十年,被认为是一种持久的化学污染物。高氯酸盐应用于工业产品如军工、烟花爆竹、纺织物固定剂、电镀、橡胶制品、...
近来,奶粉、茶叶、饮用水中检出高氯酸盐的报道引发了社会的关注。高氯酸盐化学结构十分稳定,可在正常环境条件下存在数十年,被认为是一种持久的化学污染物。高氯酸盐应用于工业产品如军工、烟花爆竹、纺织物固定剂、电镀、橡胶制品、染料、涂料、冶炼和电池等产品的生产过程中。由于高氯酸盐易溶于水,在工业生产和废物处理的过程中,该物质容易进入环境体系中,
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关键词
高效液相色谱-串联质谱法
高氯酸钠
离子色谱柱
萃取效率
高氯酸盐
目标物
食用香精
下载PDF
职称材料
Sortase A介导的(S)-羰基还原酶Ⅱ寡聚体高效立体选择性转化(S)-苯基乙二醇
2
作者
李坤鹏
张荣珍
+10 位作者
李静
刘海燕
周丽仙
李利宏
李尧慧
辜杨
汪金珠
邵佳佳
全铭沁
仇子玉
徐岩
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期1853-1864,共12页
【目的】以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的sortase A为"分子订书机",用于(S)-羰基还原酶Ⅱ分子之间的连接,获得催化功能与稳定性增强的氧化还原酶寡聚体,高效催化2-羟基苯乙酮,合成(S)-苯基乙二醇。【方法】从S.aur...
【目的】以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的sortase A为"分子订书机",用于(S)-羰基还原酶Ⅱ分子之间的连接,获得催化功能与稳定性增强的氧化还原酶寡聚体,高效催化2-羟基苯乙酮,合成(S)-苯基乙二醇。【方法】从S.aureus基因组中克隆sortase A基因,在大肠杆菌中表达,通过镍柱和凝胶层析纯化重组酶,获得纯酶sortase A。通过基因工程手段在(S)-羰基还原酶Ⅱ的C末端添加GGGGSLPETGG序列,蛋白纯化获得(S)-羰基还原酶Ⅱ-GGGGSLPETGG,摸索了sortase A催化(S)-羰基还原酶Ⅱ-GGGGSLPETGG的分子连接,形成(S)-羰基还原酶Ⅱ寡聚体的最佳条件,并研究了寡聚体酶学性质及生物转化(S)-苯基乙二醇的效率。【结果】(S)-羰基还原酶Ⅱ寡聚体比酶活力为38.5 U/mg,比原始型(S)-羰基还原酶Ⅱ提高了6倍,最适反应温度为50°C,最适pH为6.0,在50°C放置1 h后酶活仍旧保持90%以上;蛋白质变性实验结果显示,(S)-羰基还原酶Ⅱ寡聚体的变性温度为60.1°C,比原始酶提高了10°C;生物转化结果显示(S)-羰基还原酶Ⅱ寡聚体在3 h内完全转化5 g/L 2-羟基苯乙酮,产生光学纯度为100%的(S)-苯基乙二醇,相比于重组大肠杆菌(S)-羰基还原酶Ⅱ全细胞催化时间缩短了16倍。【结论】本研究首次将sortase A应用于氧化还原酶的分子连接,显著提高了酶的催化效率和热稳定性,表明sortase在手性催化中有很大的潜在应用价值。
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关键词
SORTASE
A
分子连接
寡聚体
氧化还原酶
手性催化
原文传递
题名
高效液相色谱-串联质谱法测定食用香精中高氯酸盐的含量
被引量:
9
1
作者
邓其馨
刘泽春
黄朝章
黄华发
张廷贵
谢卫
蔡国华
柯艺萍
汪金珠
机构
福建中烟工业有限责任公司技术中心
出处
《理化检验(化学分册)》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期475-479,共5页
文摘
近来,奶粉、茶叶、饮用水中检出高氯酸盐的报道引发了社会的关注。高氯酸盐化学结构十分稳定,可在正常环境条件下存在数十年,被认为是一种持久的化学污染物。高氯酸盐应用于工业产品如军工、烟花爆竹、纺织物固定剂、电镀、橡胶制品、染料、涂料、冶炼和电池等产品的生产过程中。由于高氯酸盐易溶于水,在工业生产和废物处理的过程中,该物质容易进入环境体系中,
关键词
高效液相色谱-串联质谱法
高氯酸钠
离子色谱柱
萃取效率
高氯酸盐
目标物
食用香精
分类号
O657.63 [理学—分析化学]
下载PDF
职称材料
题名
Sortase A介导的(S)-羰基还原酶Ⅱ寡聚体高效立体选择性转化(S)-苯基乙二醇
2
作者
李坤鹏
张荣珍
李静
刘海燕
周丽仙
李利宏
李尧慧
辜杨
汪金珠
邵佳佳
全铭沁
仇子玉
徐岩
机构
江南大学生物工程学院教育部工业生物技术重点实验室
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期1853-1864,共12页
基金
国家自然科学基金(31370100
31670070)
+3 种基金
江苏省六大人才高峰高层次人才项目(2015-SWYY-010)
中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP51409B)
教育部新世纪优秀人才(NCET-13-0833)
高等学校学科创新引智计划(111-2-06)~~
文摘
【目的】以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的sortase A为"分子订书机",用于(S)-羰基还原酶Ⅱ分子之间的连接,获得催化功能与稳定性增强的氧化还原酶寡聚体,高效催化2-羟基苯乙酮,合成(S)-苯基乙二醇。【方法】从S.aureus基因组中克隆sortase A基因,在大肠杆菌中表达,通过镍柱和凝胶层析纯化重组酶,获得纯酶sortase A。通过基因工程手段在(S)-羰基还原酶Ⅱ的C末端添加GGGGSLPETGG序列,蛋白纯化获得(S)-羰基还原酶Ⅱ-GGGGSLPETGG,摸索了sortase A催化(S)-羰基还原酶Ⅱ-GGGGSLPETGG的分子连接,形成(S)-羰基还原酶Ⅱ寡聚体的最佳条件,并研究了寡聚体酶学性质及生物转化(S)-苯基乙二醇的效率。【结果】(S)-羰基还原酶Ⅱ寡聚体比酶活力为38.5 U/mg,比原始型(S)-羰基还原酶Ⅱ提高了6倍,最适反应温度为50°C,最适pH为6.0,在50°C放置1 h后酶活仍旧保持90%以上;蛋白质变性实验结果显示,(S)-羰基还原酶Ⅱ寡聚体的变性温度为60.1°C,比原始酶提高了10°C;生物转化结果显示(S)-羰基还原酶Ⅱ寡聚体在3 h内完全转化5 g/L 2-羟基苯乙酮,产生光学纯度为100%的(S)-苯基乙二醇,相比于重组大肠杆菌(S)-羰基还原酶Ⅱ全细胞催化时间缩短了16倍。【结论】本研究首次将sortase A应用于氧化还原酶的分子连接,显著提高了酶的催化效率和热稳定性,表明sortase在手性催化中有很大的潜在应用价值。
关键词
SORTASE
A
分子连接
寡聚体
氧化还原酶
手性催化
Keywords
Sortase A, molecular ligation, oligomer, oxidoreductase, chiral catalysis
分类号
Q936 [生物学—微生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高效液相色谱-串联质谱法测定食用香精中高氯酸盐的含量
邓其馨
刘泽春
黄朝章
黄华发
张廷贵
谢卫
蔡国华
柯艺萍
汪金珠
《理化检验(化学分册)》
CAS
CSCD
北大核心
2018
9
下载PDF
职称材料
2
Sortase A介导的(S)-羰基还原酶Ⅱ寡聚体高效立体选择性转化(S)-苯基乙二醇
李坤鹏
张荣珍
李静
刘海燕
周丽仙
李利宏
李尧慧
辜杨
汪金珠
邵佳佳
全铭沁
仇子玉
徐岩
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
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