加味柴胡疏肝汤调控miR-204影响癫痫小鼠海马神经元调亡与ATG7、LC3Ⅱ的表达

目的观察加味柴胡疏肝汤对癫痫小鼠海马神经元自噬和凋亡的拮抗作用,探讨其发挥神经保护作用的机制。方法将60只小鼠随机分为6组:生理盐水组(20 mL·kg-1·d-1灌胃两周)、模型组(180mg·kg-1腹腔注射)、加味柴胡疏肝汤组(7 g·kg-1·d-1灌胃两周)、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 mimic组(2μL颅内注射)、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 inhibitor组(2μL颅内注射)、卡马西平组(混悬液30 mg·kg-1·d-1灌胃两周);采用匹罗卡品使小鼠致痫,抑制及过表达miRNA-204后,分别予加味柴胡疏肝汤灌胃,处死小鼠,取其海马组织,观察每组的指标情况:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测小鼠海马miRNA-204,以及自噬相关基因ATG7、LC3Ⅱ的表达情况,采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测小鼠海马C1区神经元凋亡情况。结果与生理盐水组相比,模型组小鼠海马miR-204表达明显降低(P<0.01),自噬相关基因ATG7、LC3Ⅱ的表达,神经元凋亡指数明显升高(P<0.01);与模型组相比,使用加味柴胡疏肝汤后,小鼠海马组织miR-204表达明显升高,自噬相关基因ATG7、LC3Ⅱ的表达,神经元凋亡指数明显降低(P<0.05);使miR-204过表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度增大(P<0.01);抑制miR-204表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度减少(P<0.05)。结论加味柴胡疏肝汤具有抗癫痫作用,可能是通过升高miRNA-204的表达,拮抗小鼠海马神经元过度自噬和凋亡。

基于基因芯片技术研究定痫丸对氯化锂-匹罗卡品致痫小鼠海马组织miRNA-187表达的影响

目的:研究定痫丸对氯化锂-匹罗卡品致痫小鼠海马组织miRNA-187表达的影响。方法:采用基因芯片技术筛选出氯化锂-匹罗卡品致痫小鼠海马组织差异表达基因,并运用q-PCR技术验证其差异性表达。予定痫丸悬混液灌胃,运用q-PCR技术检测定痫丸悬混液对癫痫小鼠海马组织差异基因的表达。结果:通过基因芯片筛选出癫痫小鼠海马组织中差异表达miRNA下调18个,上调10个。筛选出miRNA-187,运用q-PCR技术验证了其表达下调(P<0.05)。经定痫丸悬混液干预后,发现癫痫小鼠海马组织miRNA-187表达上调(P<0.05)。结论:定痫丸可能通过上调miRNA-187对癫痫起到治疗作用,初步揭示定痫丸治疗癫痫的分子机制。

基于基因芯片技术研究氯化锂-匹罗卡品致痫小鼠海马组织miRNA-187的表达及GO和KEGG分析

目的基于基因芯片技术研究氯化锂-匹罗卡品致痫小鼠海马组织miRNA-187的表达及GO和KEGG分析。方法选取氯化锂-匹罗卡品致痫小鼠海马组织,采用基因芯片技术挖掘差异基因,并运用q-PCR对芯片结果进行验证,利用Target Scan、miRBase、rna22预测靶基因、DAVID综合分析工具进行GO功能富集分析及KEGG信号通路分析。结果挖掘到与癫痫相关差异基因miRNA-187,利用Target Scan、miRBase、rna22 3种软件预测miRNA-187的靶基因,取交集得到107个共同的靶基因,并进行富集分析得到19个基因功能(P<0.05)和7个信号通路(P<0.05)。结论通过生物信息学方法,初步分析了miRNA-187在癫痫中可能参与调控的靶基因和信号通路,为下一步实验验证miRNA-187在癫痫的调控机制奠定基础。

醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫的系统评价

目的系统评价醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫。方法检索PubMed、Embase以及中国知网数据库、万方数据库、维普数据库中关于醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫的临床随机对照试验,按照Cochrane协作网的系统评价要求,制定纳入及排除标准,按照改良的Jadad量表对文献进行质量评价,绘制基本信息表,提取数据,使用RevMan5.3软件进行Meta分析,绘制偏倚风险图、森林图及漏斗图。结果共有20项研究被纳入,总病例数1714例。Meta分析结果提示醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫在提高总有效率、减少脑电图痫样放电数、痫样放电累及的导联数以及改善相关生活质量方面均优于单纯服用抗癫痫药物治疗的对照组患者。不良反应方面,观察组癫痫患者的神经系统和消化系统不良反应均明显低于对照组患者,而两组的皮肤不良反应无明显差异。结论醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫安全有效,但因研究方法质量学的限制,有待于高质量、大样本的临床随机试验提供循证依据。

癫痫中西医治疗研究概况

癫痫,人类第二大神经系统疾病,严重影响着人们的工作、学习、生活质量。临床上治疗癫痫的方法很多,并都取得了一定的疗效。西医治疗癫痫的措施包含病因治疗、抗癫痫药物治疗以及非药物治疗;中医主要包括方药、针灸、针药联合和穴位埋线等综合疗法。现分析、概括、总结我国中西医治疗癫痫的方法,为临床医师治疗癫痫提供一些借鉴。

醒脑静注射液治疗癫痫的研究进展

醒脑静注射液具有开窍醒神、清热泻火解毒、凉血活血的功效,常被用于治疗脑梗死、脑出血、昏迷、中毒、颅内感染、痴呆、高血压、冠心病、癫痫等病症,疗效肯定。其适用于多种类型的癫痫,如脑卒中后癫痫、癫痫持续状态、小热高热惊厥、外伤性癫痫、酒精性癫痫等。本文从醒脑静注射液的药效机理及其在各类癫痫中的临床应用进行综述。

柴胡疏肝汤加减联合抗癫痫药治疗癫痫的疗效及安全性Meta分析

目的系统评价柴胡疏肝汤加减联合抗癫痫药治疗癫痫的有效性及其安全性。方法制定检索策略,由两名人员独立检索中国知网、维普、万方、CBM、Pub Med数据库,筛选出柴胡疏肝汤加减联合抗癫痫药治疗癫痫的临床随机对照试验(RCT),运用Review Manager 5.2软件进行Meta分析。结果本研究共有11个RCT入选,包含861例患者。综合分析结果提示,与常规抗癫痫西药组比,柴胡疏肝汤加减联合抗癫痫西药组的总有效率(RR=1.31,95%CI=[1.20,1.43],Z=6.10,P<0.00001)、脑电图改善率(RR=1.45,95%CI=[1.21,1.75],Z=3.94,P<0.0001)均优于抗癫痫药组,不良反应率(RR=0.56,95%CI=[0.35,0.88],Z=2.50,P=0.01)低于抗癫痫西药对照组。结论柴胡疏肝汤加减联合抗癫痫药治疗癫痫的疗效及安全性优于单纯抗癫痫西药,因纳入高质量的文献较少,需要更多的高质量文献进一步证明结果的科学性。

柴胡疏肝散辅助治疗重度抑郁症的网络药理学研究

目的:研究柴胡疏肝散辅助治疗重度抑郁症(MDD)的潜在分子机制。方法:采用网络药理学方法。利用基因表达综合数据库(GEO)下载MDD患者基因芯片数据集GSE76826,再利用R语言软件中的limma包筛选出MDD患者样本中的差异基因。利用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)筛选柴胡疏肝散的活性成分及其对应的靶标。通过在线软件venny 2.1.0对MDD的差异基因和柴胡疏肝散的靶标取交集,获取柴胡疏肝散治疗MDD的共同靶标基因,然后将共同靶标基因导入Cytoscape3.6.1软件构建"柴胡疏肝散活性成分-MDD靶标基因"关系网络。利用BisoGenet插件构建蛋白互作(PPI)网络,并对其进行拓扑结构分析,筛选核心靶标基因,进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。结果:柴胡疏肝散治疗MDD的活性成分有139种,包括槲皮素、山柰酚、木犀草素、豆甾醇等;其作用的核心靶点基因共有8个,包括NR3C2、DPP4、ALOX5、GSTM1、CCND1、IGFBP3等;其主要通过调节细胞受体、嘌呤代谢、类固醇生物合成、氨酰生物合成等信号通路发挥治疗MDD的作用。结论:柴胡疏肝散可通过多个靶标、多个途径发挥辅助治疗MDD的作用,可为后续研究其作用机制提供理论基础。

半夏治疗癫痫的网络药理学机制研究

目的基于网络药理学预测半夏治疗癫痫的潜在有效成分及作用机制。方法通过中药系统药理学技术平台(TCMSP)检索半夏的有效成分,利用中药系统药理学分析平台数据库(TCMSP)筛选半夏的有效成分,并收集其对应的作用靶标;通过GeneCards、OMIM等数据库筛选出癫痫的靶标。运用Cytoscape软件构建半夏治疗癫痫的"药物-活性成分-疾病-靶标"网络,通过STRING数据库构建靶标蛋白相关作用网络并进行关键靶标的生物功能注释及通路分析。结果半夏8个有效成分通过干预23个靶标、81条通路发挥治疗癫痫的作用。网络分析显示半夏中24-乙基胆甾醇-4-烯-3-酮、胍、黄芩素、黄芩苷、β-谷甾醇、豆甾醇等8个活性成分通过CASP3、CASP8、CASP9、VEGFA、ESR1、HIF1A和BCL2等20个共有靶点和人类免疫缺陷病毒1感染通路、弓形虫病通路、细胞凋亡通路、p53信号通路、HIF-1信号通路等81条通路发挥对癫痫的作用。结论半夏对治疗癫痫不仅具有通过多成分作用于多靶标的特点,而且会通过潜在作用靶标之间的相互影响发挥复杂的网络调节作用。

从肝论治癫痫治疗进展

癫痫是临床常见而多发的神经系统疾病之一,长期、反复发作严重影响人类身心健康。目前癫痫治疗及预防主要依靠西医抗癫痫药物干预为主,但由于西药的副作用多、靶点局限、应用范围小等缺陷,中医药辨证施治渐成为研究的新方向,且临床发现从肝论治癫痫的疗效颇优。文章就近年在从肝论治癫痫的中医药相关治疗研究进行简要阐述,以期临床施治提供参考。

疏肝论治癫痫的研究进展

癫痫是脑部神经元异常放电引起的神经功能异常的常见神经系统疾病,具有发作频率高、反复发作、治疗难度大等特点。中医学认为癫痫发作、加重及复发均与情志失调有关,从疏肝论治癫痫有一定效果。本文针对疏肝论治癫痫的机制、实验研究及临床研究进展进行综述。

中药有效成分多靶点治疗癫痫的研究进展

癫痫是由多种原因引起大脑神经元突发性异常放电,导致短暂性大脑功能障碍的一种慢性疾病,中药及有效成分治疗癫痫疗效确切,具有多靶点、多途径的优势,发挥保护神经元的作用,有效减少癫痫发作复发率。现综述中药有效成分在调控海马区域相关蛋白及因子、清除氧自由基、调节氨基酸及炎性因子等多靶点及机制治疗癫痫的研究进展,为癫痫的治疗及中医药的临床应用提供依据。

中西医结合治疗癫痫伴抑郁Meta分析

目的:系统评价中西医结合治疗癫痫伴抑郁患者的临床疗效。方法:计算机检索中国知网、万方数据库、中国医学生物文献数据库、维普资讯、PubMed及Web of Science等中英文数据库,筛选出自各数据库建库以来至2018年7月关于中西医结合治疗癫痫伴抑郁的临床随机对照试验(randomized controlled trial,RCT)研究,根据系统评价标准依次进行文献质量评价和Meta分析。结果:纳入14个研究,共1183例患者。Meta分析结果显示:中西医结合治疗癫痫伴抑郁在降低HAMD评分、提高QLOIE-31评分方面优于单纯西药治疗。癫痫发作频次改善率效应值合并量OR=3.53,95%CI(1.73,7.17),Z=3.48(P=0.0005),差异有统计学意义(P<0.05)。临床安全性效应值合并量OR=0.59,95%CI(0.35,0.98),Z=2.03(P=0.04),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:中西医结合足疗程治疗癫痫伴抑郁临床疗效优于单纯西药治疗,且临床安全性良好,但因纳入研究数量和质量有限,上述结论尚待高质量的RCT研究验证。

宜宾市修建人才市场大楼

"万里长江第一城"宜宾市,重视人才的开发和利用,他们把振兴本地经济和社会各项事业的希望寄于人才.市委、市政府拨款110万元。

加味柴胡疏肝汤调控miRNA-204对癫痫小鼠海马自噬的影响

目的:观察加味柴胡疏肝汤对癫痫小鼠海马微小非编码RNA 204(miRNA-204)的表达影响,探讨其发挥神经保护作用的机制。方法:将60只小鼠随机分为6组:正常组,模型组(盐酸匹罗卡品180 mg·kg-1),加味柴胡疏肝汤组(7 g·kg-1·d-1),加味柴胡疏肝汤+miRNA-204模拟物组(7 g·kg-1·d-1+2μL),加味柴胡疏肝汤+miRNA-204抑制物组(7 g·kg-1·d-1+2μL),卡马西平组(30 mg·kg-1·d-1),各灌胃2周;采用匹罗卡品使小鼠致痫,6组分别灌胃给药、抑制及过表达miRNA-204后,处死小鼠,取其海马组织,观察每组的指标情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠海马miRNA-204的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3),自噬相关标志性蛋白7(ATG7)的表达情况,苏木素-伊红(HE)染色观察每组小鼠海马病理学变化;透射电镜观察各组小鼠海马组织自噬情况。结果:与正常组比较,模型组小鼠miRNA-204表达显著降低(P<0.01),海马C1区病理改变最明显,ATG7,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达显著升高(P<0.01),自噬小体数量最多;与模型组比较,加味柴胡疏肝组小鼠海马组织miRNA-204表达明显升高(P<0.05),海马C1区病理改变减轻,ATG7,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达明显降低(P<0.05),自噬小体数量减少;加味柴胡疏肝汤+miRNA-204模拟物组小鼠海马组织miRNA-204表达显著升高(P<0.01),海马C1区病理改变最轻,ATG7,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达显著降低(P<0.01),自噬小体数量最少;与加味柴胡疏肝汤比较,加味柴胡疏肝汤+miRNA-204抑制物组上述指标变化趋势相同,变化幅度明显减少(P<0.05)。结论:加味柴胡疏肝汤可以改善癫痫小鼠海马组织病理改变,其作用机制可能是通过升高癫痫小鼠海马miRNA-204的表达,抑制神经元过度自噬,减少细胞凋亡。

加味柴胡疏肝汤调控miR-204对急性癫痫小鼠海马AKT/mTOR/P70S6K通路和脑电图的影响

目的探讨加味柴胡疏肝汤是否通过调节miR-204影响急性癫痫小鼠AKT/mTOR/P70S6K信号通路以及脑电图。方法将60只小鼠随机分为6组:生理盐水组、模型组、加味柴胡疏肝汤组、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 mimic组、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 inhibitor组、卡马西平组。采用匹罗卡品使小鼠致痫,分别予加味柴胡疏肝汤灌胃、抑制及过表达miR-204后观察每组的指标情况;采用脑电图仪检测每组小鼠脑电波;RT-PCR检测每组小鼠海马组织miR-204的表达;Western Blot检测每组小鼠通路蛋白p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达情况。结果与生理盐水组相比,模型组小鼠脑电图痫性波明显增多,miR-204表达明显降低,通路相关蛋白p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达明显下降;与模型组相比,使用加味柴胡疏肝汤后,小鼠脑电图痫性波减少,小鼠海马组织miR-204表达明显升高,通路相关蛋白p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达升高;使miR-204过表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度增大;抑制miR-204表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度减少。结论加味柴胡疏肝汤通过升高miR-204的表达,激活AKT/mTOR/P70S6K通路,使其通路蛋白磷酸化,发挥神经保护的作用,减少痫性波,达到治疗癫痫的目的。

小柴胡汤治疗癫痫的网络药理学研究

目的:通过中药网络药理学技术研究小柴胡汤治疗癫痫的活性成分、作用靶标、靶标的相互作用关系、靶标的生物学功能及其作用的通路,探讨其可能的作用机制。方法:在中药系统药理学数据库和分析平台上筛选出小柴胡汤的活性成分,并根据活性成分检索其成分作用的靶标。利用在线文本挖掘服务器(GeneCards)和人类孟德尔遗传数据库(OMIM)查询与癫痫相关的靶标,并使用在线软件venny 2.1对癫痫相关的靶标与小柴胡汤作用的靶标取交集,得到小柴胡汤治疗癫痫的潜在靶标156个。将潜在靶标导入Cytoscape软件,初步获得"成分-靶标"关系网络;同时基于clusterProfiler包对潜在靶标进行基因本体(GO)功能富集分析、基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。并根据KEGG富集分析结果,构建"潜在靶标-KEGG通路"关系网络。此外,为了解靶标之间的相互作用关系,把潜在靶标导入STRING在线数据库,构建蛋白-蛋白相互作用网络(PPI网络),将关系网络编排导入Cytoscape软件进行拓扑结构分析获得核心子网络。结果:小柴胡汤的活性成分有162种,主要包括:槲皮素、汉黄芩素、黄芩苷、山柰酚、人参皂苷Rh2、异鼠李素、柚皮素、木蝴蝶素等;作用的靶标有156个。其主要作用的途径有:IL-17信号通路、细胞凋亡、C型凝集素受体信号通路、内分泌的阻力等。结论:小柴胡汤治疗癫痫体现了中药复方多成分、多靶标、多通路共同作用的特点。本研究进一步拓宽了小柴胡汤在神经系统疾病方面的应用,为进一步的实验研究提供了理论基础。