人His6-TNF-β融合表达质粒的构建及其产物一步纯化法研究

人β-肿瘤坏死因子（tumor mecrosis factor beta,TNF-β）又称淋巴毒素（lymphotoxin,LT）、是最早发现的细胞因子之一.研究表明,它不仅对多种肿瘤细胞具有细胞毒作用,而且参与免疫和炎症反应的调节,并能诱导多种分化细胞抗原的表达.成熟的人TNF-β由171个aa组成,其N端为非功能区,研究发现若N端缺失25个aa,仍可保持其细胞毒活性;若缺失24个aa,则该缺失体的细胞毒作用可提高2～6倍,而对小鼠致死率却降低5倍.TNF-βC端结构的完整性对保持细胞毒活性是必需的,因此可通过构建N端的不同缺失体来重组高抗癌效应和低毒副作用的生物制剂.本文选用融台表达载体来组建人N端缺失体的表达质粒,并且借T（?）-lac启动子、His6-tag等元件,以期获得高效表达和利用Ni2+螯合树脂柱来亲和纯化,为进一步研究TNF-β缺失体的生物学活性和TNF-β的开发利用打下基础.

人食管鳞状细胞癌中p53基因突变在浙江与河南两地的差异

目的更深入了解人食管鳞状细胞癌中p53基因突变的地域差异及临床特征之间的差异。方法从中国食管鳞癌的高发区河南林县以及浙江省收集共92例人食管鳞状细胞癌(ESCC)标本,使用免疫组化、PCR-SSCP分析和DNA测序的方法分析p53肿瘤抑制基因。结果p53基因的突变或过表达分别为30.4%和51.1%(P<0.05)。p53的过表达与肿瘤的转移和患者存活期相关,两个不同地域收集的肿瘤标本中发现了不同的突变模式。结论p53的突变或过表达在食管鳞癌的发展中可能起到了重要的作用。致癌因子的各种不同组合,可能是两个地区人群中基因组的不稳定性所致。这种不稳定性在某种水平上决定了不同地区不同的发病率。