CD4^+CD25^+调节性T细胞对HCV感染者疾病进程影响的研究

目的:探讨HCV感染者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的表达状况以及与疾病进程的相关性。方法:选取HCV感染者69例及健康对照23例,应用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的表达。结果:HCV感染组外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞比例明显高于对照组(P<0.01);慢性感染组外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例高于HCV无症状携带组(P<0.05);肝硬化组外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例高于慢性感染组(P<0.05)。结论:HCV感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平与疾病进程具有相关性。

HCV感染者外周血CD4^+ T细胞计数与病毒载量的相关性分析

目的:通过分析HCV感染者CD4+ T细胞计数与病毒裁量(HCVVL)的相关性,探讨HCV感染时病毒水平对机体免疫状况的影响。方法:采用流式细胞技术和荧光定量PCR技术,对64例HCV感染者外周血CD4+ T细胞计数与HCV-RNA进行检测。结果:HCV-RNA阳性组与HCV-RNA阴性组间CD4+ T细胞计数差异无显著性(P>0.05);HCV-RNA阳性组CD4+ T细胞计数与病毒载量间无相关关系(r=-0.141,P=0.406)。结论:HCV感染是否影响患者的免疫功能有待进一步研究。

幽门螺杆菌通过NF-κB信号通路调控胃上皮细胞自噬及凋亡的机制研究

目的研究幽门螺杆菌通过NF-κB信号通路调控胃上皮细胞自噬及凋亡的机制。方法体外培养幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)及人胃上皮AGS细胞株,收集Hp处理0 h、3 h、6 h、9 h及对照组、18μmol·L-1NF-κB特异性抑制剂SN50处理6 h、18μmol·L-1SN50+Hp处理6 h的AGS细胞,利用流式细胞仪分别检测各组细胞的自噬率及凋亡率;收集Hp梯度时间处理后的AGS细胞,提取各组总蛋白,蛋白质印迹法(Western Blot)检测自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白1轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ),凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及NF-κB通路相关蛋白p65、p-p65的表达。结果 AGS细胞的自噬率与凋亡率均随着Hp作用时间的延长逐渐升高,各时间点与0 h相比均差异有统计学意义(P<0.01)。自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ、凋亡相关蛋白Bax及NF-κB通路相关蛋白p-p65的表达随着Hp作用时间的延长逐渐增高,自噬相关蛋白LC3Ⅰ及凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达随着Hp作用时间的延长逐渐降低,与0 h相比,各检测时间点蛋白表达差异有统计学意义(P<0.01)。NF-κB通路相关蛋白p65的表达未出现显著性变化(P>0.05)。与对照组相比[(6.56±1.40)%、(11.76±1.70)%],Hp处理后,AGS细胞自噬率(9.86±1.78)%与凋亡率(13.25±1.56)%显著增强(t1=11.054,P1=0.000;t2=10.456,P2=0.000);SN50处理后,AGS细胞自噬率(19.65±2.14)%与凋亡率(28.65±2.14)%显著减弱(t1=3.403,P1=0.009;t2=2.799,P2=0.023);Hp与SN50联合处理后,AGS细胞自噬率(20.65±2.14)%与凋亡率(29.65±2.14)%显著高于对照组,但低于Hp单独处理组,差异有统计学意义(t1=5.164,P1=0.001;t2=5.890,P2=0.000;t3=4.718,P3=0.002;t4=5.738,P4=0.000)。结论 Hp刺激显著促进AGS细胞的自噬与凋亡,作用机制可能与NF-κB通路的活化有关。

ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的临床检验作用分析

目的分析ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的临床检验效果。方法 80例疑似梅毒螺旋体感染患者,所有患者均分别进行酶联免疫吸附法(ELISA)以及甲基胺红不加热血清试验(TRUST)检测,比较两种检测方法阳性诊断正确率。结果 80例疑似患者经TRUST法检测后,敏感性为84.91%(45/53),特异性为44.44%(12/27),阳性诊断正确率为75.00%(45/60);80例疑似患者经ELISA法检测后,敏感性为96.67%(58/60),特异性为60.00%(12/20),阳性诊断正确率为96.67%(58/60),两种检测方法阳性诊断正确率比较差异具有统计学意义(χ~2=11.5820,P<0.05)。结论梅毒螺旋体感染患者在临床中选择ELISA方法进行诊断,效果显著,可为临床检验提供科学依据。

乙型病毒性肝炎患者的两对半检验结果探讨

目的探析乙型病毒性肝炎患者的两对半检验结果 ,为临床治疗奠定基础。方法 100例乙型病毒性肝炎患者,均检测乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸(HBV-DNA)及两对半,分析检验结果。结果 100例患者中,41例为大三阳,所占比例为41%,24例为小三阳,所占比例为24%;4例患者(4%)HBc Ab、HBs Ag呈现为阳性;9例患者(9%)HBc Ab、HBs Ab检验结果均呈阳性;6例患者(6%)HBc Ab、HBe Ab检验结果呈阳性;17例患者(17%)HBs Ab、HBc Ab、HBe Ab检验结果均呈阳性。65例HBVDNA检验结果呈阳性,阳性检出率为65%。结论在乙型病毒性肝炎诊断中两对半检验结果具有一定的诊断价值,可发挥预防作用,实现早期治疗,值得临床应用。

幽门螺杆菌粪便抗原检测对儿童患者的诊断价值

目的分析幽门螺杆菌（Hp）粪便抗原（HpSA）检测在儿童患者治疗中的诊断价值。方法回顾性分析64例由于消化道症状入院就诊患儿的临床资料，对其进行病理组织学检测、快速尿素酶试验（RUT）及粪便抗原检测，确定是否感染Hp，比较HpSA检测的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值及阴性预测值。结果以内镜组织切片染色直接找菌联合胃黏膜快速尿素酶试验为诊断是否感染Hp为“金标准”，HpSA检测敏感性为88．24％，特异性为93．33％，准确性为90．63％，阳性预测值为93．75％，阴性预测值为85．71％，与“金标准”诊断结果相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HpSA具有操作简单、省时无创、准确性高的优势，适用于儿童患者的诊断检测。

HIV-1原发感染者病毒辅助受体特征分析

目的观察HIV-1感染者在原发感染早期的不同阶段，体内病毒对CCR5和CXCR4辅助受体利用特点及演变情况。方法以高危人群前瞻性队列研究的方式随访发现12例HIV-1原发感染者，分别收集感染最早期和病毒载量稳定期（病毒调定点）的血浆，提取病毒RNA，反转录（RT）．PCR，套式PCR扩增envgp160基因，连接到TA克隆载体，测序分析，以Gen02pheno、PSSMx4r5、PSSMsisi、SVM、ChargeRule5种在线生物信息学工具预测病毒株CCR5和CXCRd辅助受体利用情况。结果12例原发感染者感染早期病毒利用CCR5嗜性者有11例，利用CXCR4辅助受体1例；1例在随访10个月时检出辅助受体的转换；不同基因型预测方法的结果一致性88．3％。结论HIV-1原发感染者早期病毒主要利用CCR5受体，也有利用CXCR4受体，原发感染者在感染1年内可能发生辅助受体的转换；以基因型预测CCR5或CXCR4辅助受体宜选用多种不同的分析方法。

蛋白质结构限制性对HIV-1耐药相关基因分子进化规律的影响研究

目的：通过对65名HIV治疗队列中发生耐药的感染者进行较系统的前瞻性队列研究,阐明我国抗病毒治疗过程中,HIV RT蛋白耐药进化的结构限制性以及HIV耐药的发生规律。方法从2003年开始,每半年1次,连续4年对队列感染者进行随访采集静脉血样,提取病毒RNA后对RT基因进行RT-PCR扩增和测序。将所获得的序列进行系统进化、耐药位点变异和蛋白质结构分析。结果 RT酶中大部分的氨基酸位点都是保守的,而序列的变异仅发生在12.44%的位点之上。非核苷类逆转录酶抑制剂（ NNRTI）高水平耐药位点多位于RT蛋白的内部,而中等水平耐药位点多位于蛋白质的表面。核苷类逆转录酶抑制剂（ NRTI）高水平耐药位点均位于RT蛋白的表面,而低水平耐药位点均位于RT蛋白的内部。结论 NNRTI和NRTI类耐药突变位点在RT蛋白中截然相反的分布特征,可以为针对RT靶点的抗病毒药物的设计和开发起到一定的指导作用。