蛋白激酶B1去类泛素化修饰抑制肝癌的增殖和转移

目的 探讨沉默泛素载体蛋白9（Ubc9）基因表达诱导蛋白激酶B1（AKT1）去类泛素化修饰,及其对肝癌细胞增殖和转移的影响.方法 利用RNA干扰技术沉默HepG2肝癌细胞Ubc9基因表达,Western blot法检测Ubc9、小泛素相关修饰蛋白1（SUMO1）和蛋白激酶B1（AKT1）蛋白表达水平,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和流式细胞术检测HepG2细胞增殖活性,细胞划痕实验和Transwell方法检测细胞迁移能力.建立荷瘤鼠模型,测量肿瘤体积并绘制生长曲线,解剖肿瘤组织并称重比较.采用原位细胞凋亡实验检测肿瘤组织细胞凋亡情况,免疫组化法检测肿瘤组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和 MMP-9的表达情况.结果 siR-Ubc9基因转染可使HepG2细胞中Ubc9、共轭SUMO1、游离SUMO1和AKT1蛋白水平均明显下降（均P〈0.05）.对照组、siR-neg组和siR-Ubc9组的细胞增殖指数分别为53.19%、54.25%和39.17%,细胞迁移距离分别为（59.47±4.66）μm、（56.56±5.37）μm和（34.57±6.61）μm,发生迁移的细胞数量分别为（89.44±8.36）个/视野、（93.84±8.79）个/视野和（41.67±5.39）个/视野,siR-Ubc9组与对照组和siR-neg组差异均有统计学意义（均P〈0.05）.对照组、siR-neg组和siR-Ubc9组的皮下肿瘤重量分别为（3.78±0.69）g、（3.72± 0.72）g和（2.09±0.61）g,细胞凋亡率分别为（7.79±2.21）%、（6.45±2.48）%,和（33.59±5.44）%,siR-Ubc9组与对照组和siR-neg组差异均有统计学意义（均P〈0.05）.对照组和siR-neg组肿瘤组织中PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白均高表达,而siR-Ubc9组肿瘤组织中PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白表达均低表达,差异均有统计学意义（均P〈0.05）.结论 通过沉默肝癌细胞中Ubc9基因表达能够诱导AKT1去SUMO化修饰,进而抑制肝癌细胞的增殖和转移,为未来肝癌基因治疗提供了新的借鉴方法.

靶向抑制Hedgehog信号通路对肝细胞癌增殖、凋亡和转移的影响

目的观察靶向抑制Hedgehog信号通路对肝细胞癌增殖、转移的影响。方法构建SmoshRNA质粒，建立Smo稳定低表达的肝癌QGY-7701细胞系。采用流式细胞术、CCK8及Tran—swell实验检测Smo基因沉默前后QGY-7701细胞周期、凋亡、增殖及转移能力的变化；通过裸鼠皮下种植模型研究Smo基因沉默对肝癌细胞体内生长的抑制作用，电镜下观察肝癌细胞超微结构的变化。结果实时PCR（RT—PCR）和蛋白印迹（Westernblot）检测显示成功构建shR—Smo稳定基因转染的肝癌细胞系。流式细胞周期实验显示，与对照组比较，shR—Smo组G0／G1期细胞增加，S期细胞减少；凋亡、CCK8及Transwell实验显示Smo基因沉默能够显著增加肝细胞癌凋亡百分率到（5．46±1．46）％，增殖活性显著下降，迁移率减少到（7．82±2．14）％；裸鼠皮下种植模型显示Smo基因沉默能够明显抑制体内肝癌细胞的生长，电镜发现Smo基因沉默后肝癌细胞中溶酶体明显增多。结论阻断Hedgehog信号通路可降低肝细胞癌恶性程度，靶向抑制Hedgehog信号通路有望成为肝细胞癌基因治疗的新选择。

医疗机构中锐器伤的管理

医疗机构中的锐器伤很常见。在2004至2013年间，英国共报道了4830例与体液接触有关的职业暴露，其中71％为经皮损伤1。由于报告系统很可能只对有意义的职业暴露案例进行记录，锐器伤的实际发生例数可能更高。为了保护自己或帮助受伤的同事，医务人员需熟知锐器伤发生后的即刻处理。