类风湿关节炎基因治疗的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是累及多关节、多系统的慢性自身免疫性疾病,在自身免疫性结缔组织病中患病率居首位。疾病可发展为关节僵直、畸形、致残而严重影响劳动力。RA的传统药物治疗多起效慢,长期使用副作用大,近年来兴起的生物治疗广泛应用于临床,但生物制剂昂贵、副作用大、需要反复注射且无靶器官特异性,而基因治疗则避免了这些缺点,选择性高,可以从分子水平针对发病机制进行治疗,为RA的治疗开辟了新领域。

帕金森病患者血清胰岛素样生长因子-Ⅰ与一氧化氮水平的变化

目的探讨血清一氧化氮(NO)、生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)及胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在帕金森病(PD)患者中的改变特征。方法采用硝酸还原酶法和化学发光法分别检测80例PD患者和78例健康体检者血清NO、GH、IGF-Ⅰ和IGFBP-3水平,并对两组结果进行对比分析。结果 PD组血清NO水平低于对照组([3.3±0.4)(5.2±0.4)mol/L,<0.01];PD组的血清IGF-Ⅰ浓度高于对照组([166±43)(136±35)ng/mL,<0.01],但两组血清GH和IGFBP-3水平比较差异无统计学意义(>0.05)。结论 PD患者的血清NO水平降低,IGF-Ⅰ水平上升,这可能与PD时机体对潜在的病理紊乱产生的局部适应反应和保护机制有关。

CA242的参考范围和对恶性肿瘤的诊断价值

目的探讨本院实验室血清CA242测定值的参考范围和对一些常见恶性肿瘤的诊断价值。方法收集我院的3185例门诊及住院病人的血清,测定CA242值,排除重复测定及恶性肿瘤病人的结果;收集常见恶性肿瘤患者血清标本946例,测定血清CA242值。统计分析。结果男女CA242测定值比较有显著性差异(P<0.01);不同年龄组间CA242值均值无显著性差异(P=0.966)。本实验室非恶性肿瘤病人CA242测定值非正态分布(P<0.05)。不考虑男女、年龄因素,确定本院实验室CA242值的参考范围O～18.9U/ml。胰腺癌、结直肠癌全域准确率(AUC)值在0.7～0.9之间;胃癌、肝癌、食道癌、乳腺癌、肺癌、肾癌、膀胱癌AUC值在0.5～0.7之间。结论确定本院实验室CA242的参考范围<18.9U/ml。血清CA242测定,对胰腺癌、结直肠癌有一定的准确性;胃癌、肝癌、食道癌、乳腺癌、肺癌、肾癌、膀胱癌有较低的准确性。本资料证明CA242无器官特异性。

血清对氧磷酶活性的连续监测法测定

目的 建立和评价血清对氧磷酶(paraoxonase,PON_1)活性的自动化检测方法,调查正常人及肝病患者血清PON_1活性。方法 在日立7170全自动生化分析仪上建立PON_1活性测定参数,同时检验批内差异、批间差异、重复性及线性关系。结果 该方法测定PON_1的Km=0.487mmol/L,批内精密度和批间精密度分别为0.79％和1.4％,测定线性超过1300U/L。正常人血清PON_1活性参考范围大于352U/L,肝硬化患者PON_1活性为248±88U/L。结论 该方法测定PON_1活性所用标本量小,酶反应时间短,结果可靠,可应用于临床检测。

正常孕中期孕妇血清学产前筛查指标中位数数据库存的建立

目的研究杭州地区3年正常孕中期孕妇血清标志物AFP和游离β-人绒毛膜促性腺激素(freeβ-HCG)的中位数,分析人种、区域性、实验室误差对中位数差异的影响,探讨中位数建立的标准化流程,实现质量控制下的数据库建立。方法应用时间分辨免疫荧光法测定83375份标本的浓度值,Lifecycle3.0软件计算3年的中位数,运用SSPS 17.0统计软件的Mann-whitney U检验方法两两比较3年中位数之间的差异。采用杭州地区的中位数和软件内嵌高加索人中位数计算筛查风险率进行人种差异比较。结果 AFP的中位数2008年与2009年两组比2010年的偏高2.8%,差异有统计学意义(P<0.01);2008年与2009年之间差异无统计学意义(P=0.841)。freeβ-HCG的中位数2009年与2010年两组比2008年偏低3.5%,差异有统计学意义(P<0.01);2009年与2010年之间差异无统计学意义(P=0.852)。杭州地区AFP、freeβ-HCG的中位数比软件内嵌高加索人中位数分别偏高5.5%和10.4%。结论杭州地区AFP和freeβ-HCG的中位数与软件内嵌高加索人种的中位数比较提示有人种差异。运用地区中位数计算筛查率比运用内嵌中位数可降低假阳性率。需要建立有一定的区域代表性的产前筛查指标的中位数数据库。

探讨标记物分析前变异在产前筛查质量控制中的影响

目的探讨分析前变异在产前筛查中对测定结果的影响,建立标准的分析前质量管理程序。方法检测不同采血管的类型、处理温度和时间条件下血清甲胎蛋白(AFP)和游离β-人绒毛膜促性腺激素(freeβ-HCG)值,利用方差分析和t检验计算分析前变异。结果与真空促凝管相比,2～8℃条件下放置7 d的分离胶管样本,AFP的测定值差异有统计学意义(P<0.05),不同温度和延长水浴时间分离血清检测freeβ-HCG值差异有统计学意义(P<0.05)。结论分析前变异会影响AFP和freeβ-HCG的测定结果,采用分离胶管执行样本条码化测定可降低分析前处理的不合格率和差错率。

用EXCEL制作个性化Z分数室内质控图

目的:为了满足国内室内质控实际情况,用EXCEL制作实验室室内质控Z分数图,补充LIS系统。方法:应用EXCEL软件作图功能和自带函数,制作实验室单项多水平室内质控图。结果:用EXCEL软件制作的室内质控图,美观实用,符合日常室内质控要求。结论:用EXCEL软件制作的室内质控图不仅能补充LIS系统,而且很好满足没有LIS系统的实验室的单项单水平或多水平的室内质控作图、统计的要求;应用EXCEL软件的XY散点图功能,使质控图简洁,重点突出,便于实验室人员用Westgard多规则做出快速准确的判断;应用EXCEL软件自带函数,使室内质控作图、统计具有实时能力,同时使质控图没有多余的点。

连续监测法快速检测脂肪酶的价值

目的探讨连续监测法检测脂肪酶(LPS)在临床上诊断急性胰腺炎的价值。方法在日立7170自动生化分析仪上用连续监测法测定LPS。试剂针吸LPS试剂前用0.1 mol/L HCl 270μL冲洗,设置自动生化分析仪测定时间为5 min,用EDTA-K2或肝素抗凝的血浆测定。结果有效降低了自动生化分析仪试剂针的携带污染,批内变异系数(CV)<1.80%,总CV<2.45%;报告时间缩短至30 min内。结论在自动生化分析仪上用连续监测法测定LPS具有准确、快速、重复性好、干扰物少等优点,推动了LPS在临床上诊断急性胰腺炎的广泛应用。

心肌缺血再灌注过程中时点的NOS活性及NO产量

目的研究心肌缺血再灌注过程中不同时点的NOS活性和NO产量。方法结扎新西兰兔冠状动脉左前降支,继而开放制造心肌缺血再灌注模型。用再灌注后不同时间心肌组织匀浆测NO和NOS。结果心肌组织缺血后,NO含量、NOS活性明显降低,在恢复灌注的初期(30 min与60 min)心肌组织NO与缺血期无差别,NOS活性升高,仍低于基础水平。恢复灌注120 min,心肌组织NO含量、NOS活性才恢复到接近于正常心肌水平。结论实验有助于临床医师确定用药时间及用药量。

sTfR对慢性炎症患者并发缺铁性贫血的诊断价值

目的:探讨血清可溶性转铁蛋白受体(sTfR)水平对慢性炎症患者并发缺铁性贫血与慢性炎症患者并发非缺铁性贫血的鉴别诊断价值。方法:采用散射免疫比浊法定量测定非贫血对照组,单一原因造成的缺铁性贫血(IDA)、慢性炎症并发缺铁性贫血患者、慢性炎症并发非缺铁性贫血患者sTfR浓度。采用t检验和ROC曲线评价sTfR的诊断价值。结果:非贫血对照组与单一原因造成的IDA sTfR浓度有显著性差异(P<0.05),AUC=0.965,有较高的诊断准确度。慢性炎症并发缺铁性贫血患者与慢性炎症并发非缺铁性贫血患者sTfR浓度有显著性差异(P<0.05);AUC=0.834,有一定的准确度。结论:sTfR浓度对单一原因造成的IDA和慢性炎症并发缺铁性贫血患者有较高的诊断准确性;并且根据不同的临床资料选用不同的阈值用于诊断。

多重耐药大肠埃希菌质粒介导耐药性的研究

目的：了解临床收集的多重耐药大肠埃希菌克隆播散状况及质粒介导耐药性的特性。方法通过K- B纸片法明确细菌耐药谱，脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行耐药菌株的克隆分型，了解其克隆播散情况，通过质粒接合实验获得耐药性质粒的接合菌，用PCR方法筛选接合菌株的常见耐药基因，并利用S1酶切质粒再进行PFGE的方法判读分析质粒的分子大小，分析菌株间的质粒水平迁移状况。结果临床分离95株大肠埃希菌均为多重耐药菌，对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、四环素类等药物显示出广泛耐药性，PFGE分型显示克隆传播趋势不明显。耐药菌株常携带可接合性耐药质粒，质粒分子量大小分布在40-330kb，编码多种对青霉素类、头孢菌素类等药物耐药的耐药基因，包括CTX- M型、TEM型β-内酰胺酶基因，以及质粒介导喹诺酮耐药基因qnr等等。结论临床大肠埃希菌多重耐药性严重，耐药性的快速传播已非同源克隆细菌的简单播散，可接合质粒造成的耐药基因水平转移可能起到了相当重要的作用。

LADA老年患者治疗中胰岛素强化方法对胰岛β细胞功能和临床疗效的影响

目的 对比老年2型糖尿病（DM）患者及老年成人隐匿性自身免疫性糖尿病（LADA）患者进行胰岛素强化方法 治疗的胰岛β细胞功能和治疗效果.方法选取2011年2月至2015年6月就诊的共44例2型DM患者作为DM组.选取同期的46例LADA患者作为LADA组.采用胰岛素强化治疗,对比两组患者治疗前后胰岛β细胞功能,治疗前后空腹及餐后1h和2h的C肽、胰岛素、糖化血红蛋白（HbA1c）、血糖水平.结果 DM组患者治疗前后HOMA-IS显著高于LADA组患者,且差异均有统计学意义（P〈0.05）,两组患者治疗后HOMA-IS水平明显高于各组治疗前,且差异具有统计学意义（P〈0.05）.DM组患者治疗前后的空腹、餐后1h和餐后2hC肽和胰岛素水平均明显高于LADA组患者,且差异均有统计学意义（P〈0.05）,两组患者治疗后空腹、餐后1h和餐后2hC肽和胰岛素水平均明显高于治疗前,且差异均有统计学意义（P〈0.05）.两组患者治疗前后HbA1c、空腹血糖和2h血糖水平对比均无明显差异（P〉0.05）,两组患者治疗后HbA1c、空腹血糖和2h血糖水平均明显低于治疗前,且差异均有统计学意义（P〈0.05）.结论 应用胰岛素强化方法治疗老年LADA患者在临床疗效方面明显优于2型DM患者.

杭州市2016—2018年哮喘儿童2686例血清过敏原检测结果分析

目的了解杭州地区哮喘儿童血清过敏原分布特点,为临床防治提供依据。方法2016—2018年该院就诊的初诊哮喘患儿2686例,按年龄分为婴幼儿组894例,学龄前组1300例,学龄期组492例。采用化学发光免疫分析法检测血清总IgE,免疫印迹法检测过敏原特异性抗体IgE(sIgE)。结果2686例哮喘患儿中,总IgE阳性2590例(96.4%),sIgE阳性1614例(60.1%)。吸入性过敏原以户尘螨、屋尘、混合草、霉菌组合为主,食入性过敏原以牛奶、鸡蛋白、蟹、虾为主。结论杭州地区不同年龄组哮喘患儿的过敏原结构存在差异,明确过敏原是预防和治疗儿童过敏性哮喘的关键。