改良皮内缝合法在面部色素痣切除术中的应用

目的观察改良皮内缝合法与单纯间断缝合法在面部色素痣切除术中的应用效果。方法54例行面部色素痣切除术的患者分为单纯间断缝合组(对照组,28例)和改良皮内缝合组(观察组,26例)。两组患者均采用改良真皮内缝合法闭合切口后,分别采用单纯间断缝合法或改良皮内缝合法对皮肤外层进行精确对合。观察两组术后切口愈合情况,比较两组患者术后6个月温哥华瘢痕量表(VSS)评分及术后满意度情况。结果两组患者手术切口均为甲级愈合。观察组术后6个月VSS评分优于对照组(P<0.05);观察组患者术后总满意度高于对照组(P<0.05)。结论相比常规单纯间断缝合法,采用改良皮内缝合法可明显减轻患者面部色素痣切除术后瘢痕,提高愈合美观度及患者满意度。

苦柯胺B对脓毒症小鼠肺脏炎症反应的抑制作用

目的 探讨苦柯胺B（KB）对脓毒症小鼠肺部炎症反应的抑制作用及分子机制.方法 将28只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为对照组（8只）、脂多糖（LPS）组（10只）、LPS ＋KB组（10只）.腹腔注射LPS 20 mg/kg制备脓毒症模型（LPS组）;对照组给予等体积生理盐水;LPS ＋KB组于LPS刺激4h后经尾静脉注射KB 20 μg/kg.于LPS刺激后8h检测动物血浆LPS浓度及肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆、肺泡灌洗液及肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的含量;用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肺组织核转录因子-κB（NF-κB）活性和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达;用苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理学改变;免疫组化法观察肺组织中细胞间黏附分子-1 （ICAM-1）蛋白表达.结果 与对照组比较,LPS组血浆LPS浓度（kEU/L：1 155.650±147.149比31.390±18.859）、MPO活性（U/g：1.177 ±0.093比0.775±0.166）、NF-κB活性（灰度值：1.557±0.105比0.824±0.032）、iNOS蛋白表达（灰度值：0.650±0.129比0.392±0.097）均显著升高（均P＜0.05）;KB干预后LPS浓度（624.461±149.012）、MPO活性（0.919±0.023）、NF-κB活性（1.127±0.074）、iNOS蛋白表达（0.425±0.066）均被明显抑制（均P＜0.05）.与对照组比较,LPS组血浆、肺泡灌洗液、肺组织匀浆中TNF-α（ng/L：47.325±13.864比6.534±0.544,13.382±2.231比3.748±0.692,31.127±7.399比14.948±4.673）、IL-1β（ng/L：74.329±11.890比29.921±6.487,9.422±2.674比1.105±0.364,528.509±32.073比109.945±13.561）浓度均显著增加（均P＜0.05）;而应用KB干预后TNF-α（20.331±7.789、7.145±1.202、15.966±2.946）、IL-1β（57.707±8.098、2.212±0.878、426.154±11.270）浓度均明显降低（血浆TNF-α：F=16.052、P=0.002,IL-1β：F=20.649、P=0.000;肺泡灌洗液TNF-α：F=31.134、P=0.001,IL-1β：F=22.792、P=0.002;肺组织匀浆TNF-α：F=10.013、P=0.009,IL-1β：F=319.857、P=0.000）.光镜下观察显示,与LPS组比较,KB干预后肺组织病理改变明显减轻,ICAM-1表达明显减少.结论 KB作为新型的LPS中和剂,能够拮抗LPS对脓毒症小鼠的炎症刺激作用,减轻肺部炎症反应,保护脓毒症小鼠的肺脏功能.

外源性一氧化碳对脓毒症时肝、肺组织中性粒细胞过度浸润的抑制作用及其机制

目的 探讨外源性一氧化碳对脓毒症时肝、肺组织中性粒细胞过度浸润的抑制作用及其机制.方法 （1） 32只雄性小鼠按随机数字表法分为假手术组、盲肠结扎穿孔组（CLP组）、CLP＋外源性一氧化碳释放分子2（CORM-2）（8 mg/kg）干预组（CORM-2干预组）、CLP＋无活性CORM-2（iCORM-2）（8 mg/kg）干预组（iCORM-2干预组）,每组8只.术后24 h分别取肝、肺组织,检测病理改变、髓过氧化物酶（MPO）活性及丙二醛（MDA）含量.（2）另取60只小鼠分组同（1）,每组15只;术后连续观察72 h,进行存活率分析.（3）分离小鼠骨髓中性粒细胞,分为正常对照组、脂多糖（LPS,1μg/ml,浓度下同）刺激组（LPS组）、LPS＋低浓度CORM-2（10 μmol/L）刺激组（低浓度组）、LPS＋高浓度CORM-2（50 μmol/L）刺激组（高浓度组）、LPS＋iCORM-2（50 μmol/L）刺激组（iCORM-2组）,1h后进行琼脂糖凝胶平板趋化实验,定量PCR、免疫荧光检测趋化因子甲酰肽受体1（FPR1）含量.结果 与假手术组比较,CLP组MPO活性明显增强[肝（9.1±1.1）U/g、肺（16.3±2.8）U/g] （P ＜0.05）,MDA含量明显上升[肝（76.5±11.3） nmol/mg、肺（32.4 ±10.3） nmol/mg] （P ＜0.05）,72 h存活率仅为20％（P＜0.05）;CORM-2干预组能显著抑制MPO活性[肝（5.2±0.8）U/g、肺（7.5±2.4）U/g]（P＜0.05）及MDA含量的增高[肝（46.7 ±6.1）nmol/mg、肺（23.8 ±7.3） nmol/mg] （P ＜0.05）,72 h存活率为67％ （P ＜0.05）.与正常对照组比较,LPS组中性粒细胞[（61.3±7.1）个]趋化能力增强（P＜0.05）,FPR1表达增多且富集于细胞膜;低浓度组、高浓度组可有效抑制上述变化,且呈剂量依赖性[低浓度组（43.3±6.1）个、高浓度组（23.3±5.9）个]（P＜0.05）.结论 外源性一氧化碳通过下调脓毒症时FPR1表达、减少细胞膜FPR1含量及有效抑制脓毒症时中性粒细胞趋化能力抑制肝、肺组织中性粒细胞过度浸润,减轻肝、肺组织氧化应激及病理改变,提高脓毒症小鼠的存活率.

苦柯胺B对脂多糖诱导的脓毒症小鼠小肠炎症反应的抑制作用及分子机制

目的 探讨苦柯胺B（KB）对脓毒症小鼠小肠炎症反应的抑制作用及其分子机制。方法 按照随机数字表法将24只雄性ICR小鼠分为对照组、模型组、KB干预组，每组8只。腹腔注射脂多糖（I^PS）20mg／kg制备脓毒症动物模型，对照组注射等量生理盐水；KB干预组于制模后4h经尾静脉注射KB20雌mg进行干预。各组于注射LPS后8h取心脏血和空肠、回肠组织，检测血浆LPS含量；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆及小肠组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α,）和白细胞介素-1β（IL-1β）水平；光镜下观察小肠组织病理学改变；比色法检测小肠组织髓过氧化物酶（MPO）活性；免疫组化法观察小肠组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达；反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测小肠组织诱导型-氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达；蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测小肠组织核转录因子-kB（NF—kB）蛋白表达。结果 模型小鼠表现为肠组织微血管通透性增加，间质水肿，白细胞浸润；血浆LPS、TNF-α、IL—1β水平及小肠TNF-α、IL-1β、MPO活性、ICAM-1阳性表达、iNOS mRNA、NF—kB蛋白表达均明显升高；而经KB干预后，小肠组织微血管通透性降低，水肿程度减轻，白细胞浸润显著减少，血浆LPS、TNF-α、IL-1β及小肠TNF-α、IL-1β、MPO活性、ICAM-1阳性表达、iNOSmRNA和NF—kB蛋白表达均较模型组均明显下降[血浆LPS（kEU／L）：654．09±28．13比1155．65±47．15，TNF—α（ng／L）：12．75±0．47比30．61±0．71，IL-1β（ng／L）：53．06±5．32比64．47±2．61；空肠TNF-α（ng／L）：43．27±1．20比64．82±2．09，IL-1β（ng／L）：326．38±14．47比535．22±13．48．MPO（U，g）：0．14±0．01比0．32±0．02，iNOSmRNA（2^-△△Ct）：2．39±0．13比10．80±0．22，NF—kB蛋白（灰度值）：0．687±0．062比1．404±0．046；回肠TNF-α（ng／L）：62．75±3．92比104．24±2．82，IL-1B（ng／L）：408．06±1．70比521．97±1．16，MPO（U／g）：0．36±0．08比0．66±0．05，iNOSmRNA（2--△△Ct）：1．65±0．11比3．59±0．29，NF—kB蛋白（灰度值）：0．830±0．114比1．609±0．051，均P〈0．05]。结论 KB可以通过结合LPS，抑制LPS／Toll样受体4（TLR4）信号通路活化，从而显著抑制LPS诱导的脓毒症小鼠小肠炎症反应，保护小肠功能。