二甲双胍对糖尿病大鼠骨密度及Toll样受体4／核因子kappaB基因表达的影响

目的观察二甲双胍对糖尿病大鼠的骨密度以及骨组织中骨形成蛋白2（BMP-2）和Toll样受体4／核因子KappaB（TLR-4／NF-kB）因子表达的影响。方法将60只5-6周龄健康雄性SD大鼠，分为正常对照组（15只）、实验组（45只）。实验组大鼠给予高糖高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型，采用随机数字表法将其分为糖尿病组（16只）和二甲双胍组（15只）。二甲双胍组给予二甲双胍[900mg／（kg·d）]灌胃，正常对照组和糖尿病组大鼠给予等量生理盐水灌胃。16周后用双能X线法检测各组大鼠各部位骨密度及体成分，ELISA法检测各组大鼠血清骨钙素的表达，AMP缓冲液法检测血清碱性磷酸酶（ALP）的表达，Westernblotting法检测各组大鼠BMP-2、TLR-4和NF—KB蛋白的表达，RT-PCR法检测TLR-4和NF-KBmRNA的表达。组间比较采用完全随机设计的单因素方差分析。结果（1）与正常对照组比较，糖尿病组大鼠上肢、大腿和全身骨密度降低[（0．16±0．01）比（0．14±0．02）g／cm2，（0．18±0．02）比（0．14±0．01）g／cm2，（0．19±0．01）比（0．15±0．00）g／cm2；F3．348、12．286、10．616，均P〈0．05[，同时，ALP、骨钙素的表达显著降低[ALP：（130±39）比（62±14）u／L；骨钙素：（2．84±0．52）比（1．94±0．13）μg／g，t=3．273、3．367，均P〈0．05]。TLR．4和NF-kBmRNA及蛋白的表达显著升高，BMP-2表达显著减少（均P〈0．05）。（2）与糖尿病组相比，二甲双胍组大鼠各部位骨密度的变化、骨钙素及ALP表达的升高无统计学意义（均P〉0．05），但TLR-4和NF-kB蛋白及mRNA的表达显著降低（均P〈0．05），BMP-2表达显著增加（0．23±0．05比0．35±0．08，t=4．098，P〈0．05）。结论二甲双胍可抑制TLR-4／NF-kB的表达，促进BMP-2的表达，但在干预时间内（16周）对糖尿病大鼠主要部位如上肢、大腿、全身骨密度无明显影响。