补肾方防治地塞米松致雄性大鼠骨质疏松及其生化机制探讨

目的 :研究补肾方预防和治疗地塞米松致雄性大鼠骨质疏松的疗效 ,并探讨其生化机制。方法 :采用 1 2月龄SD雄性大鼠 46只 ,随机分组给药 ,1 8周后分别测定全身骨密度、股骨抗弯强度以及血清中骨钙素、甲状旁腺素、睾酮、雌二醇的水平。结果 :全身骨密度、股骨抗弯强度预防组显著高于地塞米松组 (P <0 0 1 ) ,与空白对照组比较未见明显差异 ;治疗组高于地塞米松组 (P <0 0 5 ) ,但低于空白对照组 (P <0 0 5 ) ;预防组、治疗组的血清睾酮水平高于地塞米松组 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ,血清甲状旁腺素水平低于地塞米松组 (P <0 0 5 ) ,血清雌二醇以及骨钙素的水平略高于地塞米松组 ,但无统计学意义。结论 :应用补肾方可以有效地预防和治疗地塞米松诱导的雄性大鼠骨质疏松。

比较密骨胶囊与维生素D_3对糖皮质激素性骨质疏松模型骨量、骨强度影响的研究

目的：比较性地研究密骨胶囊与维生素Ｄ３对糖皮质激素性骨质疏松模型骨量、骨强度的影响。方法；采用１２月龄ＳＤ雄性大鼠４６只，随机分为空白对照组１４只、地塞米松组１６只、密骨胶囊组８只、维生素Ｄ３组８只。地塞米松的剂量是０．２５ｍｇ／１００ｇ体重／次（每周两次）；密骨胶囊浸膏的剂量是０．１６６ｇ／１００ｇ体重／次（每天一次）；维生素Ｄ３的剂量是０．２５Ｕ／１００ｇ体重／次（第一周每天一次，一周以后每周三次）。各组施行相应处理，１８周以后分别测定各组大鼠全身骨密度、股骨抗弯强度。结果：密骨胶囊既能部分地恢复模型大鼠已经丢失的骨量（高于地塞米松组ｐ＜０．０５，低于空白对照组ｐ＜０．０５），又能部分地回升模型大鼠已经降低的骨强度（高于地塞米松组ｐ＜０．０５，低于空白对照组ｐ＜０．０５）；维生素Ｄ３也能部分地恢复模型大鼠已经丢失的骨量（高于地塞米松组ｐ＜０．０５，低于空白对照组ｐ＜０．０５），亦能部分地回升模型大鼠已经降低的骨强度（高于地塞米松组ｐ＜０．０５，低于空白对照组ｐ＜０．０５），但回升能力比较密骨胶囊有下降趋势。结论：密骨胶囊是一种具有开发潜力的抗糖皮质激素性骨质疏松的中药复方．

动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型的动态观察

目的 :动态观察大鼠颈部动静力失去平衡后颈椎间盘退变的过程与程度。方法 :选择 8月龄清洁级SD大鼠 60只 ,随机分为 3月、5月、7月 3个对照组 ,3月、5月、7月 3个模型组 ,每组 10只。在建立动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型的基础上 (对照组为不作手术的正常大鼠 ) ,组织形态学评判颈椎间盘退变的程度 ;并检测前列腺素E2 (PGE2 )、6 酮 前列腺素F1α( 6 keto PGF1α)含量和胶原酶 (MMP 1)活性。结果 :( 1) 3月模型组可见颈椎间盘纤维环出现裂隙 ,排列轻度不规则 ,髓核出现皱缩或变小 ,少数椎间盘可见髓核轻度突出 ;5月模型组大鼠椎间盘髓核完全纤维化 ,7月模型组椎间盘突出或骨赘形成。 ( 2 )与同期对照组比较 ,5月和 7月模型组大鼠MMP 1活性明显升高 (P <0 0 5) ;PGE2 和 6 keto PGF1α含量均明显升高 (P<0 0 5或P <0 0 1)。 ( 3)模型组组间比较 ,5月和 7月组大鼠MMP 1活性比 3月组升高 (P <0 0 5) ;5月组 6 keto PGF1α较 3月组升高 (P <0 0 5)。结论 :颈椎间盘退变是一渐进性的过程 ,通过破坏大鼠颈部动静力平衡系统 ,可以加快颈椎间盘退变进程 ,从而进一步阐述了“动力失衡为先 ,静力失衡为主”

补肾中药防治原发性骨质疏松症的细胞学研究

为了比较补肾复方对成骨细胞(OB)、破骨细胞(OC)的药效异同,用MTT法测定OB增殖能力,骨陷窝计数定量评定OC骨吸收活性。结果,金匮肾气丸、补肾益精方、知柏地黄丸、西药倍美力对OB增殖的平均影响率分别为159.2％、121.5％、21.6％、75.7％;对骨陷窝数的平均影响率分别为50.2％、21.0％、19.8％、38.1％。表明平补阴阳药既促进OB增殖又抑制OC活性,加重温阳药促OB增殖作用加强,加重养阴药的作用则相反,养阴并加入泻火药则对OC活性和OB增殖均表现为抑制。

大鼠颈椎病实验模型的设计与建立

目的：建立一种理想的颈椎病实验模型。方法：３０只大鼠随机分为实验模型组与对照组，每组１５只。实验模型组借助手术方法直接切除大鼠颈背部伸肌群，对照组行伪手术。造模术后２月、４月、６月选择实验模型组、对照组大鼠各５只，取其颈椎（Ｃ３～７）作组织形态学观察，并相互比较。结果：实验模型组大鼠颈椎间盘退变较对照组明显加快、加重，出现与人类颈椎病相类似的病理改变。结论：颈部肌肉软组织即动力平衡因素在颈椎病发病机理中意义重大。

风湿寒性关节痛实验模型及病理学研究

风湿寒性关节痛是人体感受风寒湿邪后引起以肌肉、关节疼痛为主的疾病,在我国不同地区其发病率在13.19～77.90%之间。在80年代初被认为是风湿类疾病。

软骨终板钙化在椎间盘退变过程中的作用机理

目的 :研究椎体软骨终板钙化在椎间盘退变过程中的作用。方法 :2 0只新西兰兔随机分为造模与对照组 2组 ,每组再分 3个月和 8个月 2个观察亚组。切除造模组动物颈棘上、棘间韧带及分离颈椎后旁两侧肌肉 ,造成颈椎力学上的失衡而诱导兔颈椎间盘退行性改变。在术后 3个月和 8个月时分别处死动物 ,取颈椎间盘组织 ,行病理学检查在形态学上评定颈椎间盘退变程度 ,测定不同退变程度椎间盘软骨终板钙化层厚度。结果 :退变程度较轻或基本正常的颈椎间盘 ,软骨终板结构良好 ,潮标清晰 ;退变程度较重的颈椎间盘 ,软骨终板发生明显纤维化 ,潮标前移 ,钙化软骨和软骨下骨板增厚。软骨终板钙化层厚度与椎间盘退变程度呈非常明显的相关性。结论 :颈椎软骨终板的不断钙化和骨化导致颈椎间盘营养发生障碍可能是启动颈椎间盘退变的关键因素。

中药对膝骨关节炎黑鼠血清SOD、HA、NO水平的影响

为比较益肾、健脾和柔肝方药对膝骨关节炎血清ＳＯＤ、ＨＡ、ＮＯ水平的影响，以运动负荷方法造成Ｃ５７黑鼠早、中、晚三期膝骨关节炎模型，分别测定各期、各组黑鼠血清ＳＯＤ、ＨＡ和ＮＯ的含量。结果示骨关节炎早期和晚期，各指标组间相比均无显著性差异。中期，血清ＳＯＤ水平模型组与空白组无差异；与模型组比较，益肾组、柔肝组水平升高，健脾组无差异。血清ＨＡ水平模型组、健脾组、芬必得组明显高于空白组；益肾组和柔肝组明显低于模型组；血清ＮＯ水平各组个体差异较大。认为ＧＡＧ的降解加速及滑液ＨＡ水平下降是Ｃ５７黑鼠随鼠龄增长及关节软骨退变所出现的重要病理表现。益肾方和柔肝方可增强ＳＯＤ的活性。

防己黄芪汤提取物治疗活动期类风湿性关节炎的临床药效评估

治疗类风湿性关节炎(RA)目前尚无特异的有效方法。非甾体类抗炎药是当前应用最广的药物,但不能阻止其病情发展,长期应用可导致严重胃肠道副作用;皮质激素在控制 RA 症状上尚无药可媲美,但因最终不能阻止 RA 的破坏性病变及长期使用副作用超过其治疗作用而未能普遍使用。为了取得 RA 标本兼治且副作用小的治疗药物。

补肾益精方水提物和醇提物化学指标及药效的比较研究

目的 :评价中药补肾益精方水提物和醇提物对化学成分指标含量以及对绝经后骨质疏松症大鼠模型骨矿密度的影响 ,考察化学成分指标与药效的相关性 ,探讨复方有效组分。方法 :分别采用水提和醇提工艺制备补肾益精方的提取物 ,用HPLC法测定淫羊藿苷和柚皮苷含量 ,并观察两种提取物预防性给药对切除卵巢诱导的绝经后骨质疏松症大鼠模型的作用。结果 :水提物和醇提物均具有抗骨质疏松作用 ,且水提物的作用略强于醇提物 ,而水提物中的淫羊藿苷和柚皮苷的含量低于醇提物 ,淫羊藿苷和柚皮苷的含量与复方抗骨质疏松作用非正性相关。结论 :补肾益精方以水提为佳 ,复方中水溶性成分和醇溶性成分都具有抗骨质疏松的作用 ,复方的提取工艺筛选以药效为指标较妥。

软骨Ⅱ号对骨关节炎兔不同部位PGE_2选择性抑制作用的实验研究

目的 观察以中医学柔肝为治法的中药软骨方及非甾体类抗炎药扶他林对实验性骨关节炎家兔正常效应部位 (胃粘膜、肾皮质 )PGE2 和发病部位 (关节滑液 )PGE2 的影响。方法 按Hulth法建立家兔关节炎模型 ,并随机分为正常组、模型组、西药组 (扶他林 )、中药组 (软骨Ⅱ号方 )。抽取家兔患膝关节滑液并对相应的胃粘膜及肾皮质组织匀浆 ,采用放射免疫法测定滑液及匀浆液内PGE2 含量。结果 扶他林对实验性骨关节炎家兔肾皮质部PGE2 无明显影响 (P >0 0 5 ) ,对胃粘膜和关节滑液中的PGE2 有明显抑制作用 (P <0 0 5 ) ,软骨Ⅱ号方只对关节滑液中的PGE2 有一定抑制作用 ,但其作用强度不及扶他林 (P <0 0 5 ) ,而对正常效应部位 (胃粘膜、肾皮质 )的PGE2 不抑制。结论 在骨关节炎的治疗中 ,软骨Ⅱ号方只抑制发病部位关节滑液的PGE2 。

补肾中药对骨质疏松大鼠骨骼的影响

本实验以股骨密度、抗弯强度和股骨骨小梁体积为指标，观察补肾中药对骨质疏松大鼠骨骼的影响。用卵巢切除的方法建立大鼠骨质疏松模型，然后对模型分别给乙烯雌酚或中药治疗3个月后发现，乙烯雌酚或中药治疗可以阻止股骨密度，抗弯强度和胫骨骨小梁体积的下降，但两种药物均不能使已经下降的股骨密度、抗弯强度和胫骨骨小梁体积升高。这一结果提示：补肾中药对骨质疏松大鼠有防治作用。

腰神经根损伤后神经肌肉接头施旺细胞的作用和表现

目的 研究腰神经根损伤后神经肌肉接头部施旺细胞在神经再支配过程中的作用及与神经元纤维的关系。方法 采用免疫萤光双标记和激光共聚焦扫描技术 ,使用S 10 0多克隆抗体标记施旺细胞 ,抗神经元纤维蛋白 (NF)单克隆抗体标记神经轴突 ,观察了大鼠L5神经根受压后 10、2 0、30和 6 0天比目鱼肌神经肌肉接头的变性及再生修复过程。运用α bungarotoxin(α BTX)萤光结合剂显示运动终板。 结果 肌肉中的神经元纤维蛋白因失神经支配导致大幅度消失 ,随着神经再支配的进行又重新呈现。而位于运动终板及其周围的施旺细胞 ,在失神经支配期间先发出突起并形成一个精细的制作过程覆盖在神经肌内接头。再生期间 ,再生的神经轴突沿施旺细胞搭建的通道生长 ,此过程表现为再生轴突生长始终伴随并落后于施旺细胞的生长。随着神经再支配的逐渐完善 ,这个过程则逐渐消退。

益气化瘀方对大鼠颈椎间盘软骨终板内血管的影响

目的 :探讨益气化瘀方对椎间盘软骨终板内血管状态的影响 ,了解椎间盘营养供应的情况。方法 :选择 8月龄清洁级 SD雄性大鼠 5 0只。选择 5月对照组、5月模型组为本实验观察时段。大鼠随机分为对照组、模型组 ,益气化瘀方、活血通络方、芬必得组 ,每组 1 0只 ,雌雄各半。体视学分析、Dissector自动计数分析软骨终板内血管芽的数量、面积 ;免疫组化检测血管内皮生长因子 ( VEGF)在软骨终板的表达情况 ,进行VEGF与血管芽之间的相关性分析。结果 :益气化瘀方可以增加血管芽的数量和面积 ,与活血通络方作用相似 ,优于芬必得 ;模型组软骨终板内 VEGF表达明显 ,但表达率减少 ;益气化瘀方 VEGF表达量降低 ,但表达率增加明显。VEGF的表达与血管芽密度有正相关。结论 :益气化瘀方可以增加血管芽数量和 VEGF的表达 ,促进血管修复、再生和增加椎间盘营养供应的作用。

用含药血清方法观察补肾益精方对破骨细胞功能的影响

目的 探讨补肾益精方含药血清的制备条件及其对体外培养破骨细胞骨吸收功能的影响。方法 取体重 2 70± 2 0g的SD大鼠 ,雌雄各半 ,每组 10只 ,同等条件下制备补肾益精方含药血清和对照血清 ,分别观察不同采血时间、不同喂药时间、不同灌胃剂量和血清添加量对骨吸收陷窝数量的影响。结果 末次灌胃后 1h采血组的骨吸收陷窝数明显少于其他各组 (P <0 0 5 ) ;灌胃 1d和 3d、7d组比较其含药血清的药效无差异 ,而与对照血清差异显著 ;随着灌胃剂量和含药血清添加量的提高 ,其骨吸收陷窝数明显减少。结论 补肾益精方含药血清对破骨细胞骨吸收功能具有明显的抑制作用 ;补肾益精方用于破骨细胞药效观察的大鼠含药血清制备条件为等效剂量连续两次 (间隔 2h)灌胃 ,末次灌胃后1h采血 ,其血清添加浓度为 30 %。

芪麝颈康方对兔退变颈椎骨赘形成部位碱性磷酸酶活性的影响

目的：观察芪麝颈康方对退变颈椎骨赘形成部位碱性磷酸酶活性的影响。方法：选用１０月龄新西兰兔，通过切除动物Ｃ２～Ｃ７棘上韧带、棘间韧带和分离椎旁两侧肌肉，建立颈椎退行性改变的动物模型。组织学观察颈椎椎体骨赘形成的部位，采用生物化学法分别检测颈椎间盘中软骨终板、髓核和纤维环中碱性磷酸酶的活性。结果：证实骨赘来源于软骨终板，中药组退变椎间盘软骨终板中碱性磷酸酶的活性明显低于模型组（Ｐ＜０．０１）。结论：芪麝颈康方可降低骨赘生长部位的碱性磷酸酶活性，推测芪麝颈康方有抑制骨赘形成的作用。

四组中药防治实验性骨质疏松症的对比研究

在临床观察能改善症状的基础上，用糖皮质激素性骨质疏松模型对四组补肾，或脾肾双补中药制剂治疗骨质疏松症作实验研究，其中两组还设立了预防用药组。结果显示这些中药都能使模型动物增加骨量，改善骨的微细结构和增加骨强度，组方中鹿茸、紫河车的作用最为明显，且在预防用药时尤为突出。血中雌激素水平均高于模型组，也高于正常对照组，睾酮水平高于模型组而低于正常对照组，预防用药组则与正常对照组类同或升高，骨钙素与模型组无差异，甲状旁腺素降低而降钙素升高。作者认为中药防治骨质疏松有较为满意的疗效，但有许多急待解决的问题，包括组方、制剂，建立有可重复性的研究方法。

伤科接骨片对实验型骨折愈合过程中TGF-β_1的影响

目的 观察应用伤科接骨片后骨折愈合过程中TGF β1(转化生长因子 β1)的变化 ,以进一步探讨其促进骨折愈合的机理。方法 72只日本大耳白兔随机分为实验组和对照组 ,每组各 36只。在兔桡骨处用手术方法制备骨折模型 ,术后即日起试验组给与伤科接骨片 ,15 0mg/kg/d。于术后 3天、1周、2周、3周、4周、6周每组分别处死 6只兔 ,取标本 ,采用免疫组化方法进行染色 ,光镜下观察 ,并利用图像分析的方法测定其TGF β1表达强度。结果 在骨折后的同一时间 ,实验组和对照组的骨痂组织中TGF β1的染色有差异 ,实验组的峰值比对照组约提前一周出现 ,且比对照组的峰值高。结论 伤科接骨片可以调节骨折愈合过程中TGF β1的合成和分泌 ,从而促进骨折的愈合。TGF β1可能是伤科接骨片对骨折愈合过程影响的一个作用环节。

芪麝颈康丸对颈椎间盘细胞凋亡的影响

目的 :探讨芪麝颈康丸抑制颈椎间盘退变的细胞分子机制。方法 :将 48只大鼠分成四组 ,切除其中3 6只 (A、B、C三组 )颈后部浅、中层肌 ,造成颈椎间盘退变模型 ,D组为正常假手术组。分别给予芪麝颈康丸(A)、颈复康 (B)等药物治疗 ,C、D组不给药。 4月后将动物处死 ,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法观察大鼠颈椎间盘退变模型椎间盘组织中细胞凋亡的情况及芪麝颈康丸等对细胞凋亡的影响。同时观察各组椎间盘退变程度的变化。结果 :模型空白组 (C)椎间盘退变明显 ,与 A、D组比较 ,差异有显著意义 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1 )。正常组 D组椎间盘细胞凋亡指数低于其余各组 ,分别与 A、B、C组比较差异有显著意义 (P<0 .0 5 ) ;空白对照组 C组细胞凋亡指数偏高 ,A组、B组细胞凋亡指数低于 C组 ,但差异没有显著意义 (P<0 .0 5 )。结论 :动物颈椎间盘退变与椎间盘细胞凋亡有关。 A组细胞凋亡指数明显低于 C组 ,差异虽无显著意义 ,却预示芪麝颈康丸有抑制椎间盘细胞凋亡的可能性。

养血软坚胶囊抗炎镇痛作用的实验研究

为探讨养血软坚胶囊的抗炎镇痛作用进行了动物实验。结果显示,养血软坚胶囊对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀 和角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀均有明显的抑制作用,能够明显提高小鼠热板法痛阈,抑制小鼠醋酸扭体反应率。提示 该药具有较好的抗炎镇痛作用。