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沃尔巴克氏体在中国三种稻飞虱中的感染 被引量:27
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作者 甘波谊 周伟国 +2 位作者 冯丽冰 沈大 李昌本 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期14-17,共4页
用PCR方法检测了采集于不同地域稻田的 3种稻飞虱共生菌沃尔巴克氏体 (Wolbachia)的感染 ,发现灰飞虱Laodel phaxstriatellus、褐飞虱Nilaparvatalugens、白背飞虱Sogatellafurcifera为沃尔巴克氏体所感染。克隆了编码沃尔巴克氏体外膜... 用PCR方法检测了采集于不同地域稻田的 3种稻飞虱共生菌沃尔巴克氏体 (Wolbachia)的感染 ,发现灰飞虱Laodel phaxstriatellus、褐飞虱Nilaparvatalugens、白背飞虱Sogatellafurcifera为沃尔巴克氏体所感染。克隆了编码沃尔巴克氏体外膜蛋白质的wsp基因并进行了序列测定。对wsp的RFLP分析证实了这些飞虱为单一沃尔巴克氏体感染。研究了灰飞虱中沃尔巴克氏体所诱导的胞质不相容性及其在不同地域灰飞虱中的分布。还发现能寄生于上述 3种飞虱的稻虱红螯蜂也受同种沃尔巴克氏体感染。 展开更多
关键词 沃尔巴克氏体 灰飞虱 褐飞虱 白背飞虱 WSP基因 感染 共生菌 稻飞虱
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农杆菌介导将雪莲凝集素(GNA)基因转入籼稻单倍体微芽的初步研究 被引量:35
2
作者 杨长登 唐克轩 +4 位作者 吴连斌 李瑶 赵成章 刘光杰 沈大 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期129-133,共5页
以含有双元载体(携带GNA基因,npt-Ⅱ基因)的根癌农杆菌菌系LBA4404转化籼稻单倍体无性系微芽Hu18,经共培养后在含G418的保存培养基中连续筛选G418抗性芽,抗性芽经生根培养基中壮苗获得单倍体转化植株。PCR分析证明GNA基因已进入到... 以含有双元载体(携带GNA基因,npt-Ⅱ基因)的根癌农杆菌菌系LBA4404转化籼稻单倍体无性系微芽Hu18,经共培养后在含G418的保存培养基中连续筛选G418抗性芽,抗性芽经生根培养基中壮苗获得单倍体转化植株。PCR分析证明GNA基因已进入到Hu18细胞中,抗虫鉴定表明转基因植株具有白背飞虱抗性。并探明了G418对单倍体微芽的致死浓度和时间,共培养时间对G418抗性芽产生的影响。 展开更多
关键词 单倍体 无性系 根癌农杆菌 雪莲凝集素基因 籼稻
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低磷胁迫下不同水稻品种根系吸收能力差异的生理与遗传本质 被引量:18
3
作者 明凤 娄玉霞 +3 位作者 梁斌 沈大 叶鸣明 朱立煌 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2002年第5期473-477,共5页
在低磷 (1mgL-1)和适磷水平 (10mgL-1)下 ,分别以混合培养方式研究了粳稻京系 17(Oryzasativassp.japonica) (JX17)和籼稻窄叶青 8号 (Oryzasativassp .indica) (ZYQ8)对磷营养的反应 .结果表明 ,低磷胁迫下 ,JX17较ZYQ8吸收更多磷素 ,... 在低磷 (1mgL-1)和适磷水平 (10mgL-1)下 ,分别以混合培养方式研究了粳稻京系 17(Oryzasativassp.japonica) (JX17)和籼稻窄叶青 8号 (Oryzasativassp .indica) (ZYQ8)对磷营养的反应 .结果表明 ,低磷胁迫下 ,JX17较ZYQ8吸收更多磷素 ,干物重也显著增加 .相反 ,ZYQ8则受到更强的磷胁迫 ,吸磷量和干物重降低 .主要是因为JX17具有较高的吸磷速度 ,单位根长吸磷量大 ,即根系高亲和力磷酸盐转运蛋白表达强 ,最大限度地吸收可能利用的磷素 ,从而改善植株营养状况 ,同时又有较多的磷被分配到根系 ,使根长、根表面积和根干重相应提高 ,进一步增加了其在低磷胁迫条件下的竞争磷营养的优势 .图 3表 2参 展开更多
关键词 低磷胁迫 水稻 品种 根系 吸收能力 磷吸收 磷酸盐转运蛋白 竞争
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国内高校遗传学教材发展研究 被引量:22
4
作者 皮妍 林娟 +3 位作者 侯嵘 沈大 蒋科技 乔守怡 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期109-112,共4页
教材建设是课程建设的重要环节。遗传学教学在中国的发展道路是崎岖曲折的,与生命科学其他学科相比有其独特之处。通过对国内遗传学教材从解放前到21世纪的发展历程的研究,希望能为组编出更符合大学本科生教学特点,贴近国内外遗传学发... 教材建设是课程建设的重要环节。遗传学教学在中国的发展道路是崎岖曲折的,与生命科学其他学科相比有其独特之处。通过对国内遗传学教材从解放前到21世纪的发展历程的研究,希望能为组编出更符合大学本科生教学特点,贴近国内外遗传学发展前沿的教材,培养具有遗传学基本知识和创新能力的应用和研究型人才提供有价值的参考。 展开更多
关键词 遗传学教材 遗传学教学 国内发展史 研究型人才
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蝴蝶兰不同花色品种遗传多样性的RAPD分析 被引量:40
5
作者 明凤 董玉光 +4 位作者 娄玉霞 王敬文 梁斌 叶鸣明 沈大 《上海农业学报》 CSCD 2003年第2期44-47,共4页
利用筛选到的 2 5个特异引物对蝴蝶兰不同花色品种作RAPD分析 ,确定了 12个品种间的遗传距离 ;并根据Neighbor joining遗传距离矩阵构建系统聚类文件 ,将该 12个品种分为两个家族 :第一家族中包含基色为白色的花色品种 ,花蕊颜色略有不... 利用筛选到的 2 5个特异引物对蝴蝶兰不同花色品种作RAPD分析 ,确定了 12个品种间的遗传距离 ;并根据Neighbor joining遗传距离矩阵构建系统聚类文件 ,将该 12个品种分为两个家族 :第一家族中包含基色为白色的花色品种 ,花蕊颜色略有不同 ;第二家族为具有条纹的花色品种。品种间遗传距离最大为 0 .783 2 ,最小为 0 .10 3 4。 展开更多
关键词 蝴蝶兰 花色品种 遗传多样性 RAPD分析 花蕊颜色 遗传距离
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影响香石竹试管苗玻璃化的因素(简报) 被引量:41
6
作者 李瑶 王利华 +2 位作者 叶鸣明 沈大 徐根娣 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 1997年第4期256-258,共3页
香石竹组织培养中,当MS培养基中的6-BA浓度为0.5μg·ml-1,IAA浓度为0.2μg·ml-1,琼脂浓度为0.6%,光照时间为11h·d-1,温度在25.5℃左右并且通风状况良好时,香石竹试管苗玻璃化程度最低。
关键词 香石竹 花卉 玻璃苗 试管苗 组织培养
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转基因培育抗除草剂水稻 被引量:14
7
作者 吴爱忠 唐克轩 +3 位作者 潘俊松 蔡润 沈大 潘重光 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第11期992-998,共7页
以pAHC20(含Bar基因)和pWRG1515(含GUS基因和潮霉素抗性基因)以及含Bar基因和雪莲凝集素(GNA)基因的pCAMBIA3300 RG为供体DNA,选用水稻品系87203、上农香糯及鄂宜105的成熟... 以pAHC20(含Bar基因)和pWRG1515(含GUS基因和潮霉素抗性基因)以及含Bar基因和雪莲凝集素(GNA)基因的pCAMBIA3300 RG为供体DNA,选用水稻品系87203、上农香糯及鄂宜105的成熟胚诱导出的愈伤组织及微不定芽为受体材料,分别采用基因枪和根癌农杆菌(LBA4404,含pAM404)导入法进行基因转化;经抗性筛选、GUS检测和PCR分析。结果表明,外源基因已通过基因枪法导入水稻鄂宜105,并获得再生植株; 展开更多
关键词 水稻 抗除草剂 BAR基因 基因枪导入法
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灰飞虱类酵母型共生菌18SrDNA序列变异及系统发生 被引量:8
8
作者 严健 邓可京 +2 位作者 曹清玉 邵红光 沈大 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第3期219-226,共8页
分离纯化了云南楚雄、宁夏银川、北京通县、上海七宝镇、四川西昌5个地区的灰飞虱体内类酵母型共生菌(Yeast-like Symbionts, YLS),并对其18S rDNA的约600bp的序列进行了测定。结合已有的序列... 分离纯化了云南楚雄、宁夏银川、北京通县、上海七宝镇、四川西昌5个地区的灰飞虱体内类酵母型共生菌(Yeast-like Symbionts, YLS),并对其18S rDNA的约600bp的序列进行了测定。结合已有的序列,构建了不同宿主的YLS的分子系统树。结果表明,灰飞虱的YLS属于子囊菌亚门Pyrenomycetes纲,与此纲的H chrysoopermus亲缘关系最近。我国各地区及日本的灰飞虱体内YLS可能是同一种的不同地理群体,不同的YLS在其宿主分化后才选择了不同的宿主,之后与其宿主长期共同进化、共同适应。 展开更多
关键词 灰飞虱 类酵母型共生菌 18S rDAN序列 系统发育
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水稻高亲和力磷酸盐转运蛋白功能的初步研究 被引量:7
9
作者 明凤 路群 +1 位作者 戴薇 沈大 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期203-207,共5页
以所分离到的目的片段为基础 ,采用 3′RACE技术获得编码水稻磷酸盐转运蛋白基因的全序列 ,ORF区为含5 35氨基酸的基因 ,具有保守的酪蛋白激酶Ⅱ、N糖基化与蛋白激酶C作用位点的序列。通过对此蛋白编码基因功能的初步研究 ,认为此基因... 以所分离到的目的片段为基础 ,采用 3′RACE技术获得编码水稻磷酸盐转运蛋白基因的全序列 ,ORF区为含5 35氨基酸的基因 ,具有保守的酪蛋白激酶Ⅱ、N糖基化与蛋白激酶C作用位点的序列。通过对此蛋白编码基因功能的初步研究 ,认为此基因具有增加植物在缺磷胁迫下根系吸磷的能力 ,转基因的愈伤组织在低磷处理下具有相对于对照愈伤组织较高的吸磷速率。经对愈伤组织的PCR与PCRSouthern杂交分析 ,吸磷速率高的愈伤组织为遗传转化的阳性植株。 展开更多
关键词 水稻 亲和力 磷酸盐转运蛋白 基因 养分吸收速率 愈伤组织 磷素 转基因
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水稻条叶枯病毒(RStV)基因组组分4的克隆与序列分析 被引量:8
10
作者 曲志才 沈大 +3 位作者 邓可京 吕英芝 李昌本 Hull R 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期36-42,共7页
利用RTPCR技术合成并扩增了水稻条叶枯病毒(RStV)中国云南分离物基因组组分4的全长cDNA,将PCR产物克隆在载体pCRI上,并进行全序列测定,所得核苷酸序列及推测的氨基酸序列与日本分离物T进行比较。结果表明... 利用RTPCR技术合成并扩增了水稻条叶枯病毒(RStV)中国云南分离物基因组组分4的全长cDNA,将PCR产物克隆在载体pCRI上,并进行全序列测定,所得核苷酸序列及推测的氨基酸序列与日本分离物T进行比较。结果表明,在核苷酸水平,两分离物的vORF、vcORF及基因间非编码区序列的同源性分别为949%、941%、861%,5’端非编码区序列相同,而3’非编码区同源性为961%,仅有两个核苷酸不同;在氨基酸水平,vORF及vcORF编码蛋白的同源性分别为994%和983%。可见,编码区的大小及其氨基酸序列和两末端序列都是很保守的。因此,中国云南分离物Y与日本分离物T可能有很近的亲缘关系。 展开更多
关键词 水稻条叶枯病毒 水稻条叶枯病 序列分析 基因组
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水稻条叶枯病毒基因产物在水稻和昆虫体内的Western印迹分析 被引量:15
11
作者 曲志才 沈大 +2 位作者 徐亚南 谈家桢 RogerHULL 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第5期512-517,共6页
将AStV基因组组分3编码的NS3和NC蛋白基因以及组分4编码的NCP和NSvc4蛋白基因分别克隆于大肠杆菌表达载体pGEX3X在IPTG诱导下,表达出4种融合蛋白。这些表达产物用于免疫动物产生多克隆抗血清。以制备的多克隆抗血清为探针,Western印... 将AStV基因组组分3编码的NS3和NC蛋白基因以及组分4编码的NCP和NSvc4蛋白基因分别克隆于大肠杆菌表达载体pGEX3X在IPTG诱导下,表达出4种融合蛋白。这些表达产物用于免疫动物产生多克隆抗血清。以制备的多克隆抗血清为探针,Western印迹分析了宿主植物和介体昆虫体内NS3、NC、NCP和NSvc4种基因表达的产物。NC蛋白的抗体可在病株和病毒粒子制备物中以及NCP抗血清仅在病株中检测到相应大小的产物,其余的均与预期值相停。 展开更多
关键词 融合蛋白 印迹分析 条叶枯病毒 水稻昆虫
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云南滇西高原粳稻区白叶枯病菌遗传多样性初探 被引量:7
12
作者 梁斌 王敬文 +3 位作者 明风 戴陆园 叶鸣明 沈大 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2003年第B12期38-42,共5页
用IS-PCR和rep-PCR法分析了17个采自云南滇西高原粳稻区的水稻白叶枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.O-ryzae)和7个其他地区的水稻白叶枯病菌的群体遗传多样性。用2个适合中国水稻白叶枯病菌的引物J3和ERIC对这24个菌系基因组DNA进行PCR扩增... 用IS-PCR和rep-PCR法分析了17个采自云南滇西高原粳稻区的水稻白叶枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.O-ryzae)和7个其他地区的水稻白叶枯病菌的群体遗传多样性。用2个适合中国水稻白叶枯病菌的引物J3和ERIC对这24个菌系基因组DNA进行PCR扩增反应,J3引物有14条条带,ERIC引物有13条条带,2个引物呈现18种谱型。用PHYLIPVersion3.6软件UPGMA聚类分析法分析白叶枯病菌系之间的遗传距离,可将24个病原菌分为4簇,3个来自菲律宾的白叶枯病菌与中国的菌系距离较远,云南高原粳稻区分离的菌系十分复杂,4个簇中都有,但主要集中在2个簇中,共有14个菌系。 展开更多
关键词 高原粳稻区 白叶枯病菌 遗传多样性 水稻
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植物转基因方法概述 被引量:24
13
作者 叶健明 唐克轩 沈大 《生命科学》 CSCD 1999年第2期58-60,共3页
综述了植物基因转化的不同方法。植物基因转化方法主要包括直接基因转移和农杆菌介导的转化,直接基因转移又包括PEG介导、电激介导和基因枪方法。相比之下,农杆菌转化方法具有明显的优势;本文对其方法和机制作了较为全面的介绍。
关键词 直接基因转移 农杆菌转化 T-DNA转移
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水稻柠檬酸合酶编码基因的初步研究 被引量:3
14
作者 张珊珊 明凤 +2 位作者 路群 郭滨 沈大 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期501-505,共5页
以粳稻cDNA为模板,设计一对特异性引物,获得编码水稻柠檬酸合酶基因的cDNA序列,全长为1470bp,ORF区含475个氨基酸,推定蛋白序列与红葡萄、烟草、甜菜、拟南芥和柑橘等物种都有较高的同源性(>70%),氨基末端含一线粒体靶信号。Souther... 以粳稻cDNA为模板,设计一对特异性引物,获得编码水稻柠檬酸合酶基因的cDNA序列,全长为1470bp,ORF区含475个氨基酸,推定蛋白序列与红葡萄、烟草、甜菜、拟南芥和柑橘等物种都有较高的同源性(>70%),氨基末端含一线粒体靶信号。Southern分析表明此基因在水稻基因组中具有多个拷贝数。经0.4mmol/LIPTG诱导,根据Western印迹分析获得预测的蛋白大小为59kD。 展开更多
关键词 水稻 柠檬酸合酶 基因 克隆
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几种组织培养植物的染色体分析 被引量:5
15
作者 徐根娣 沈大 +2 位作者 李瑶 叶鸣明 潘重光 《上海农学院学报》 1995年第1期53-56,共4页
本文报道了紫参(SalviachinensisBenth)、马铃薯(SolanumtuberosumL.)、水稻(OryzaSativeL.)佛手(C、MedicaL.varsarcodactylisSwingle)... 本文报道了紫参(SalviachinensisBenth)、马铃薯(SolanumtuberosumL.)、水稻(OryzaSativeL.)佛手(C、MedicaL.varsarcodactylisSwingle)组织培养再生植株的染色体研究。结果表明:组培植物茎尖中的分裂相多于根尖。组培植物取材方便、材料丰富、不受生长周期限制,适用范围广。佛手染色体数属首次报道。 展开更多
关键词 染色体 佛手 紫参 马铃薯 组织培养
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稻胚凝集素基因的克隆、序列分析及表达 被引量:1
16
作者 郝峥嵘 刘庆法 +3 位作者 季昀 叶鸣明 陈永青 沈大 《西北植物学报》 CAS CSCD 1999年第2期183-189,共7页
以水稻基因组DNA为模板,以特异引物经聚合酶链式反应方法扩增出稻胚凝集素基因并克隆到E.coli质粒pBluescriptSK(+)的SmaⅠ位点。序列分析表明,克隆到的基因片段大小为781bp,没有内含子,编码1条... 以水稻基因组DNA为模板,以特异引物经聚合酶链式反应方法扩增出稻胚凝集素基因并克隆到E.coli质粒pBluescriptSK(+)的SmaⅠ位点。序列分析表明,克隆到的基因片段大小为781bp,没有内含子,编码1条长227个氨基酸、分子量约23kD的肽链,其中N-端28个氨基酸是信号肽。与报道的稻胚凝集素cDNA序列进行顺序同源性比较,发现它们之间有很高的同源性(99.74%),其编码区第167和563位各有1个碱基突变,但两者均为同义突变,并未造成氨基酸序列的变化。回收插入片段克隆到表达载体pRSET-C中,在大肠杆菌BL21(DE3)中得到表达,SDS-PAGE电泳图谱扫描结果表明,融合蛋白表达量约占菌体总蛋白的5%。鉴于凝集素可能具有抗病虫害的能力,稻胚凝集素基因的克隆及其在原核系统中的成功表达有助于我们进一步揭示稻胚凝集素在植物防御以及其他生理活动中的功能。 展开更多
关键词 稻胚凝集素基因 序列分析 基因表达 水稻
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植物基因表达的组织原位杂交和原位组织化学分析技术的改进 被引量:3
17
作者 刘庆法 郝峥嵘 沈大 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第6期580-584,共5页
改良了组织原位杂交和原位酶组织化学分析的方法。主要改进有:原位杂交采用简化的FAA固定程序,常规石蜡包埋,切片时采取液氮深冷冻;以随机引物法标记的DNA代替转录标记的RNA作探针,在保湿盒中进行杂交,而不用矿物油覆盖... 改良了组织原位杂交和原位酶组织化学分析的方法。主要改进有:原位杂交采用简化的FAA固定程序,常规石蜡包埋,切片时采取液氮深冷冻;以随机引物法标记的DNA代替转录标记的RNA作探针,在保湿盒中进行杂交,而不用矿物油覆盖。组织化学分析中用含铁氰化钾的显色液进行GUS染色后再包埋、切片的程序,代替先包埋、切片再显色的常规方法,可最大限度地保持酶活性的真实性。 展开更多
关键词 原位杂交 原位组织化学 基因表达 植物
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激素对旱芹胚性愈伤组织形成过程中生化变化的影响 被引量:1
18
作者 徐根娣 李瑶 +3 位作者 贾林 叶鸣明 倪德祥 沈大 《浙江农业学报》 CSCD 1995年第3期246-248,共3页
关键词 芹菜 旱芹 胚性愈伤组织 激素 组织培养
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植物染色体图象分析的现状与展望 被引量:5
19
作者 邓可京 曲志才 沈大 《细胞生物学杂志》 CSCD 1995年第2期80-82,共3页
生物的遗传信息基本上是储存在DNA之中的。在间期细胞中这些DNA以与蛋白质组成的纤丝状态存在,而在有丝分裂中期,经过几级的卷曲螺旋化凝缩,形成只有DNA双螺旋长度1/5000—1/10000的高度凝缩的染色体。在任何一种生物的细胞中染色体的... 生物的遗传信息基本上是储存在DNA之中的。在间期细胞中这些DNA以与蛋白质组成的纤丝状态存在,而在有丝分裂中期,经过几级的卷曲螺旋化凝缩,形成只有DNA双螺旋长度1/5000—1/10000的高度凝缩的染色体。在任何一种生物的细胞中染色体的数量和形态都是一定的。在普通光学显微镜下染色体是我们可以观察到的最小的遗传单位。通过染色体的数量及其形态的描述和分析,收集到了许多的遗传信息。对染色体的识别(特别是在形态上的各个染色体的区分),是进行染色体研究的基础。 展开更多
关键词 植物 染色体 图象分析
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水稻条叶枯病毒基因组组分3的克隆与序列分析 被引量:1
20
作者 曲志才 吕英芝 +2 位作者 沈大 苏德明 Hull R 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期44-48,共5页
利用RT -PCR技术 ,合成并扩增了水稻条叶枯病毒 (RStV)中国云南分离物基因组组分 3的全长cDNA。将PCR产物克隆在载体 pCRⅡ上 ,进行全序列测定。将所得核苷酸序列及其所推导的氨基酸序列与日本分离物T进行同源性比较 ,结果表明 ,在核苷... 利用RT -PCR技术 ,合成并扩增了水稻条叶枯病毒 (RStV)中国云南分离物基因组组分 3的全长cDNA。将PCR产物克隆在载体 pCRⅡ上 ,进行全序列测定。将所得核苷酸序列及其所推导的氨基酸序列与日本分离物T进行同源性比较 ,结果表明 ,在核苷酸水平上 ,两分离物的 5′端非编码区序列相同 ,vORF、vcORF及基因间非编码区序列的同源性分别为 97 6 %、96 8%及 87 6 % ,而 3′端非编码区同源性为 98 9% ,仅有一个核苷酸不同 ;在氨基酸水平上 ,vORF及vcORF编码蛋白的同源性分别为 99 1%和 98 5 %。可见编码区的大小及其氨基酸序列和两末端序列都是很保守的。序列分析显示 ,两个RStV分离物的RNA3均有双义编码特性。因此 ,中国云南分离物Y与日本分离物T可能有很近的亲缘关系。 展开更多
关键词 水稻条叶枯病毒 序列分析 组分3 克隆
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