G6PD介导的还原应激在砷致细胞恶性转化中的作用

目的探讨糖代谢关键酶葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)介导的还原应激在砷致细胞恶性转化中的作用以及具体机制。方法以0.0(对照组)、1.0μmol/L(染砷组)亚砷酸钠(NaAsO_(2))处理永生化人皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞),利用细胞生长动力学、细胞划痕和软琼脂集落形成实验检测细胞恶性转化指标。在砷处理不同时期(0、1、7、14、21、28、35代细胞),通过相应试剂盒和免疫印迹(Western blot)检测NaAsO_(2)对HaCaT细胞糖代谢[葡萄糖-6-磷酸(G6P)、乳酸、乙酰辅酶A、G6PD水平及己糖激酶2(HK-2)、6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)、丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)、6-磷酸葡萄糖脱氢酶(PGD)、G6PD蛋白表达水平]的影响;提取线粒体,通过相应试剂盒检测NaAsO_(2)对HaCaT细胞及线粒体氧化还原[还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)比值、还原型谷胱甘肽(GSH)/氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值]的影响;使用小干扰RNA(siRNA)干预方法,检测G6PD对还原应激及NaAsO_(2)诱导的HaCaT细胞恶性转化的影响。结果1.0μmol/L NaAsO_(2)培养HaCaT细胞至35代(T-HaCaT细胞),与传代匹配的0.0μmol/L NaAsO_(2)培养HaCaT细胞相比[(33.797±0.280)h、0.177±0.015、(13.667±2.625)个],倍增时间[(24.042±0.479)h]较短(t=30.45,P<0.001),细胞迁移率(0.396±0.039)较高(t=9.08,P<0.001),软琼脂集落数量[(73.667±4.450)个]较多(t=20.11,P<0.001)。与同组0代和同代对照组细胞相比,染砷组细胞糖代谢指标G6P水平在1、7、14、21、28、35代均较高(均P<0.05),乳酸和G6PD水平在14、21、28、35代均较高(均P<0.05),乙酰辅酶A水平在21、28、35代均较低(均P<0.05),HK-2、PFKFB3、PDK1、PGD、G6PD蛋白表达水平在7、14、21、28、35代均较高(均P<0.05);细胞NADPH/NADP+比值在1、14、21、28、35代均较高(均P<0.05),GSH/GSSG比值在21、28、35代均较高(均P<0.05);线粒体NADPH/NADP+比值在1、7、21、28、35代均较高(均P<0.05),GSH/GSSG比值在1、7、14、21、28、35代均较高(均P<0.05)。siRNA沉默T-HaCaT细胞G6PD表达后,与T-HaCaT con siRNA处理组相比,T-HaCaT G6PD siRNA处理组细胞和线粒体NADPH/NADP+和GSH/GSSG比值均较低(均P<0.05),细胞倍增时间较长、细胞迁移率较低、软琼脂集落数量较少(均P<0.05)。结论NaAsO_(2)致HaCaT细胞恶性转化过程中,G6PD等糖代谢相关酶被激活导致糖代谢重编程,引起细胞氧化还原稳态失衡,细胞和线粒体的还原应激增强,进而促进NaAsO_(2)所致HaCaT细胞恶性转化。

肝癌影像组学临床应用研究进展

肝癌,一种在消化系统中广泛流行的恶性肿瘤,在我国其患病率和死亡率都非常高,对民众的生活健康造成了巨大危害。目前针对肝癌患者的肿瘤异质性和侵袭性的快速评估还没有一种可信赖的检测手段和诊断工具。伴随着计算机人工智能科技以及图像处理科技的快速发展,崭新的影像组学研究领域正在应运而生。医学影像诊断和大数据技术的结合可以从图像中提取出人眼无法察觉的特性,同时也可以对病灶的像素灰度值的波动和分布进行公正的定量分析。这为肝癌的诊断、治疗、预测以及评价提供了坚实的基础,也为患者的个性化、全方位、精确的治疗提供了强有力的支撑。本文将详细研究影像组学在肝癌的诊断和预测方面的作用。

钆塞酸二钠增强MRI影像组学在诊断双表型肝细胞癌中的价值

目的建立和验证基于钆塞酸二钠(Gd-EOB-DTPA)增强MRI的双表型肝细胞癌(DPHCC)术前诊断影像组学模型。方法回顾性收集行Gd-EOB-DTPA增强MRI检查并经术后病理证实为肝细胞癌(HCC)的住院患者共250例,其中苏州大学附属第一医院的172例患者(DPHCC 72例,非DPHCC 100例)作为训练组(2020年1月至2023年7月),南通市第三人民医院的78例患者(DPHCC 44例,非DPHCC 34例)作为外部验证组(2019年1月至2023年7月)。于平扫、动脉期(AP)、门静脉期(PP)和肝胆期(HBP)图像中逐层勾画肿瘤感兴趣区,使用开源软件FAE进行影像组学特征提取,应用Pearson相关性分析及递归特征消除法进行特征选择,使用逻辑回归、线性判别分析、支持向量机3种分类器构建各期及联合影像组学DPHCC术前诊断影像组学模型。采用受试者工作特征曲线下面积(AUC)评估并筛选最优影像组学模型。联合诊断效能最优的组学模型与临床独立因素构建临床影像组学模型。采用Delong检验评价模型AUC的差异。结果训练组年龄为(59.6±10.4)岁,男135例(78.5%),外部验证组年龄为(57.8±9.2)岁,男56例(71.8%)。训练组病灶最大径[M(Q_(1),Q_(3)),4.7(2.6,7.5)比2.7(1.8,4.4)cm]及多发病灶比例(39.5%比16.7%)均高于外部验证组(均P<0.001)。在训练组中,DPHCC亚组患者乙型肝炎病毒(HBV)感染率(66.7%,48/172)高于非DPHCC亚组(49.0%,49/78)(P=0.021);在外部验证组中,影像组学模型中PP模型和三期联合模型AUC(95%CI)分别为0.835(0.733~0.937)和0.786(0.681~0.891),均高于平扫的0.451(0.319~0.584)、AP的0.566(0.435~0.696)和HBP模型的0.496(0.363~0.629)(均P<0.05),PP模型与三期联合模型AUC差异无统计学意义(P=0.189);影像组学模型与纳入HBV感染后的临床-影像组学模型的AUC差异亦无统计学意义(均P>0.05)。结论Gd-EOB-DTPA增强MRI PP影像组学模型可用于术前鉴别DPHCC和非DPHCC。

慢性非职业性砷暴露与高血压关系的Meta分析

目的系统评价慢性非职业性砷暴露与高血压的相关性。方法通过Web of Science、Pubmed、Embase、Cochrane Library、万方数据库(WanFang Data)、中国知网(CNKI)、维普中文期刊服务平台(VIP)和中国生物医学文献数据库进行文献检索,收集国内外发表的有关慢性非职业性砷暴露与高血压关系的流行病学文献纳入研究,时限为建库至2023年1月1日。采用Stata MP15软件进行二分类变量Meta分析,以比值比(OR)值[95%置信区间(CI)]作为效应评价指标,根据异质性结果选用随机效应模型或固定效应模型进行综合定量分析;通过亚组分析寻找其异质性来源;使用漏斗图进行发表偏倚定性分析并通过Egger检验进一步评估结果。采用Stata 15.0软件使用限制性立方样条函数和广义最小二乘估计方法(GLST)分析慢性非职业性砷暴露与高血压的剂量-反应关系。结果最终纳入29篇文献(n=127258),其中包括24篇英文文献和5篇中文文献。通过Meta分析,高血压合并OR值(95%CI)为1.07(1.04~1.09),差异有统计学意义(P<0.05)。经亚组分析,尿砷、饮水砷、头发砷合并OR值(95%CI)分别为1.10(1.04~1.17)、1.13(1.07~1.20)、2.55(1.55~4.20)。横断面研究、病例-对照研究和队列研究的合并OR值(95%CI)分别为1.11(1.06~1.16)、1.13(1.04~1.23)、1.04(1.00~1.07)。饮水砷暴露每增加1个单位(μg/L),高血压患病风险增加0.13%[OR值(95%CI):1.001269(1.000104~1.002434),P<0.05]。结论慢性非职业性砷暴露与高血压的发生相关,尿砷、饮水砷和头发砷为可能的暴露标志。慢性非职业性砷暴露与成人高血压呈非线性剂量-反应关系。