壮药白花蛇舌草水提物对MDA-MB-231乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制及免疫调节作用研究

目的观察白花蛇舌草水提物对MDA-MB-231乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制及免疫调节作用,并探讨其作用机制。方法取6只正常BALB/c-nu雌性裸鼠作为正常组;取30只BALB/c-nu雌性裸鼠复制MDA-MB-231乳腺癌移植瘤模型,将造模成功裸鼠随机分为模型组、环磷酰胺组及白花蛇舌草水提物低、高剂量组,每组6只。环磷酰胺组给予环磷酰胺25 mg/kg腹腔注射,每7 d注射1次;白花蛇舌草水提物低、高剂量组分别按照1500 mg/(kg·d)、6000 mg/(kg·d)灌胃白花蛇舌草水提物溶液,正常组和模型组灌胃等体积灭菌注射用水,均1次/d。各组均连续干预21 d,监测裸鼠活动状况,每间隔2 d测量1次肿瘤大小。干预结束后,测量体重、瘤重与脾重,计算脾脏指数、抑瘤率;HE染色观察移植瘤的病理学形态;脾淋巴细胞增殖试验评价脾脏中T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖能力;血液分析仪测定外周血中白细胞数目和淋巴细胞占比;ELISA法检测血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western blot法测定模型组和白花蛇舌草水提物低、高剂量组裸鼠肿瘤组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路蛋白及凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶-7(Caspase-7)、半胱天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)]表达情况。结果与正常组比较,模型组裸鼠脾脏指数、外周血中白细胞数量均明显升高(P均<0.05),脾脏T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖能力指数、外周血淋巴细胞占比及血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α水平均明显降低(P均<0.05);肿瘤组织中肿瘤细胞密集丰富排列无序,肿瘤细胞异型性明显。与模型组比较,白花蛇舌草水提物高、低剂量组裸鼠脾脏指数、脾脏T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖能力指数、外周血淋巴细胞占比及血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α水平均明显升高(P均<0.05),瘤重、外周血中白细胞数量均明显降低(P均<0.05);肿瘤组织中肿瘤细胞数目大量减少,细胞凋亡,组织结构破损;肿瘤组织中p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、mTOR、Bcl-2蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),Bax、Caspase-7、Caspase-9蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。环磷酰胺组裸鼠脾脏指数、瘤重、脾脏T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖能力指数、外周血白细胞数量和淋巴细胞占比均明显低于模型组(P均<0.05);肿瘤组织中肿瘤细胞数量明显减少。结论白花蛇舌草水提物可显著抑制MDA-MB-231乳腺癌裸鼠移植瘤生长,诱导乳腺癌细胞发生凋亡,增强移植瘤裸鼠免疫功能,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR通路激活,下调凋亡相关蛋白表达、上调促凋亡蛋白表达相关。

理中汤加减治疗非酒精性脂肪性肝病临床研究

目的:观察理中汤加减治疗非酒精性脂肪性肝病的临床疗效。方法:将110例非酒精性脂肪性肝病患者按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组各55例。对照组给予多烯磷脂酰胆碱治疗,观察组在对照组治疗的基础上给予理中汤加减。比较两组患者治疗前后肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(alamine aminotransferase, ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、谷氨酰胺转肽酶(glutamine transpeptidase, GGT)]、血脂指标[总胆固醇(total cholesterol, CHOL)、三酰甘油(triglyceride, TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL-C)]、血糖指标[空腹血糖(fasting blood-glucose, FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin, FINS)、糖化血红蛋白A1c(hemoglobin A1c, HbA1c)、胰岛素抵抗指数(homa-insulin resistance index, HOMA-IR)]、肝脏硬度值(liver stiffness measurement, LSM)、受控衰减参数值(controlled attenuation parameter, CAP)及中医证候积分变化情况。结果:观察组有效率为85.45%,高于对照组的54.55%(P<0.05)。两组患者治疗后ALT、AST、GGT水平低于本组治疗前,治疗后观察组低于对照组(P<0.05)。两组患者治疗后FBG、HOMA-IR、FINS、HbA1c低于本组治疗前,且治疗后观察组FBG、HOMA-IR低于对照组(P<0.05),治疗后观察组FINS、HbA1c水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后CHOL、TG、LDL-C水平低于本组治疗前,治疗后观察组低于对照组(P<0.05)。两组患者治疗后LSM、CAP水平低于本组治疗前,且治疗后观察组CAP水平低于对照组(P<0.05),治疗后观察组LSM水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后中医证候积分低于本组治疗前,治疗后观察组低于对照组(P<0.05)。结论:理中汤加减治疗非酒精性脂肪性肝病,可有效改善患者肝功能指标、血脂水平及胰岛素抵抗情况,缓解临床症状,提高生活质量。

补肾化瘀汤联合恩替卡韦治疗乙型肝炎肝硬化代偿期患者临床研究

目的:观察补肾化瘀汤联合恩替卡韦治疗乙型肝炎肝硬化代偿期患者临床疗效。方法:100例脾肾阳虚夹瘀证乙型肝炎肝硬化代偿期患者,按随机数字表法分为对照组和治疗组,各50例。两组患者均口服恩替卡韦胶囊,0.5 mg/次,1次/d;治疗组患者加服补肾化瘀汤。1个月为1个疗程,两组患者均治疗6个疗程。治疗结束时比较两组患者的中医证候积分、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、白蛋白(Alb)、血清HBV DNA转阴率、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原蛋白(PCⅢ)、Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)、肝脏硬度值、门静脉内径、脾静脉内径、脾脏厚度及长度等指标的变化,比较两组患者临床疗效。结果:治疗结束时,治疗组患者中医证候积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而ALT、AST、TBil水平及血清HBV DNA转阴率与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05),但Alb水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗6个月时治疗组患者的HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平明显低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05),而肝脏硬度值、门静脉内径、脾静脉内径、脾脏厚度及长度明显低于对照组,差异亦有统计学意义(P<0.05)。治疗组患者的临床疗效比对照组好,差异有显著性意义(P<0.05)。治疗期间两组患者均末出现不良反应。结论:补肾化瘀汤联合恩替卡韦治疗乙型肝炎肝硬化代偿期患者临床疗效显著,能改善患者肝功能,降低肝硬化程度,明显改善临床症状,提高其生活质量,值得临床推广运用。

岩黄连总生物碱对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的改善作用研究

目的研究岩黄连总生物碱对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的肝纤维化大鼠的保护作用及机制。方法通过向SD大鼠腹腔给予30%CCl4橄榄油溶液(0.1 mL/100 g)诱导复制肝纤维化模型,2次/周,连续12周。将肝纤维化大鼠随机分为模型组,岩黄连总生物碱低、中、高剂量(25、50、100 mg/kg)组及联苯双酯(30 mg/kg)组,另设正常组大鼠,各组均为8只。各给药组于造模第11周按设定剂量灌胃相应药物(1.0 mL/100 g)干预,1次/d,连续2周。正常组与模型组大鼠每天灌胃等体积的生理盐水。末次给药24 h后,收集大鼠血清、肝脏及脾脏组织,测定大鼠肝脾指数;采用HE染色和Masson染色观察肝组织病理学变化。比色法检测各组血清丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)与谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)的含量;通过ELISA检测血清透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(typeⅢprocollagen,PCⅢ)及Ⅳ型胶原(collagenⅣ,Ⅳ-C)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)及白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠反应迟钝,肝脾指数增大(P<0.01),肝组织呈现明显纤维化,血清ALT、AST、MDA、LN、HA、PCⅢ和Ⅳ-C水平显著升高(P<0.01),血清TP、ALB、SOD及GSH-Px水平显著下降(P<0.01);血清中TGF-β1、IL-1β、IL-8及IL-6蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。与模型组比较,岩黄连总生物碱中、高剂量组均能明显改善大鼠状态和肝脾指数(P<0.05,P<0.01),有效调节大鼠肝组织病理学损伤和纤维增生;显著降低大鼠血清ALT、AST、MDA含量(P<0.01),明显提高血清TP、ALB、SOD及GSH-Px的表达水平(P<0.05,P<0.01);并能明显下调LN、HA、PCⅢ、Ⅳ-C、TGF-β1、IL-1β、IL-8及IL-6蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论岩黄连总生物碱具有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与抗氧化、抑制炎症因子表达相关。

镁合金铸件的安全生产

针对目前镁合金铸件生产过程中存在的安全问题,根据单件小批量手工砂型铸造镁合金铸件的生产实际情况,按照镁合金铸件生产的流程对镁合金铸造过程存在的危险性进行分析,提出了相应的安全对策措施,包括镁合金原材料的存放和准备、镁合金型芯砂工艺的选择、镁合金熔炼和倒料过程中的注意事项、镁合金浇注方法的选择、浇注后的安全防护以及镁合金铸件生产过程中的安全管理措施,以减少镁合金铸件生产过程中意外伤亡事故的发生。

济生肾气汤加三七、鳖甲对CCl4诱导肝纤维化大鼠模型的干预作用及机制

目的:探讨济生肾气汤加三七、鳖甲对四氯化碳(CCl;)诱导的肝纤维化大鼠模型的干预作用及具体机制。方法:将SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药治疗(低、中、高剂量)组,模型组与中药治疗组采用腹腔注射40%CCl4橄榄油溶液,每周2次,持续8周的方法复制肝纤维化大鼠模型。造模成功后,各给药组分别灌胃相应药物,对照组及模型组予等体积蒸馏水灌胃,每天1次,治疗4周。末次灌胃结束后,对肝组织切片进行HE染色和Masson染色观察肝组织病理形态学,检测肝功能指标(ALT、AST);ELISA法测定转化生长因子β(TGF-β)、血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)、壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;RT-PCR法测定Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅰ、Col-Ⅲ)及TGF-βmRNA的表达水平。结果:HE和Masson染色显示模型组大鼠大量肝细胞炎症坏死,肝组织胶原纤维广泛增生,纤维间隔相互连接,假小叶形成,而中药各剂量治疗组大鼠的肝脏炎症及肝纤维化程度均较模型组减轻;与模型组比较,中药治疗组ALT、AST、TGF-β、Ang-Ⅱ、CHI3L1、IL-1、IL-6、TNF-α水平均下降,Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、TGF-βmRNA表达均减少,其中以中药中、高剂量组效果最为明显(P<0.01)。结论:济生肾气汤加三七、鳖甲对CCL4诱导的大鼠肝纤维化具有明显的改善作用,其作用机制可能与下调血管紧张素转换酶(ACE)-血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)-血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)信号通路相关基因表达,降低相关细胞因子水平、促进细胞外基质降解方面等有关。

探讨喷锚支护施工的监理

喷锚支护技术是近几年才广泛应用于我国民用建筑中的，它能有效改善施工中出现的噪音污染、设备简单以及效率低等现象，在我国一般适用于15m深度以内的临时支护中。随着喷锚技术的发展速度愈演愈烈，如何在保证支护体系安全、稳定的同时，还能满足一些具有特殊工程的需求，所以喷锚支护施工的监理出现了。文章主要分析喷锚支护的作用以及喷锚支护施工的监理。

基于SDF-1/CXCR4轴观察济生肾气汤对肝硬化大鼠BMSCs归巢的影响

目的探讨济生肾气汤通过基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)/CXC族趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)轴对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)归巢效率的影响,分析其联合BMSCs移植治疗肝硬化的机制。方法以40%四氯化碳橄榄油溶液腹腔注射联合复合因素建立SD大鼠肝硬化模型,将30只造模成功的大鼠随机分为模型组、BMSCs移植组(BMSCs组)、BMSCs移植联合济生肾气汤组(联合组),每组10只,另以10只正常大鼠设为正常组,共4组。BMSCs组与联合组造模后行尾静脉注射移植荧光标记的BMSCs,联合组同时予济生肾气汤灌胃,正常组及模型组不予处理。用药4周后,观察各组大鼠肝功能指标及肝组织病理改变,荧光显微镜下观察各组大鼠肝组织内BMSCs归巢情况,并且通过ELISA法检测各组大鼠血清干细胞因子(stem cell factor,SCF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,GCSF)及促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)水平变化,免疫组化法检测SDF-1、CXCR4蛋白表达情况。结果光镜下见模型组大鼠肝纤维化明显,大量炎症细胞浸润,而BMSCs组和联合组纤维化程度及炎症活动度均较模型组不同程度改善。与正常组比较,模型组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、γ-谷氨酰胺转肽酶均明显升高,白蛋白明显降低(P<0.05),与模型组比较,BMSCs组与联合组较模型组均有不同程度改善(P<0.05)。BMSCs归巢情况比较,同倍数视野下联合组可见归巢BMSCs数量多于BMSCs组(P<0.05)。与模型组比较,BMSCs组、联合组大鼠血清SCF、HGF、GCSF及EPO表达均不同程度升高,联合组表达高于BMSCs组(P<0.05)。免疫组化结果显示,BMSCs组与联合组大鼠肝组织SDF-1、CXCR4蛋白表达较模型组上调,联合组表达水平高于BMSCs组(P<0.05)。结论济生肾气汤可激活SDF-1/CXCR4生物轴,上调相关蛋白及其上游调控因子表达,促进BMSCs向受损伤肝组织归巢,改善肝硬化大鼠肝功能及肝硬化程度。

紫檀芪调节Keap-1/Nrf2/HO-1信号通路对非酒精性脂肪肝大鼠氧化应激和细胞凋亡的影响

目的:研究紫檀芪调节Kelch样ECH关联蛋白1(Keap-1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠氧化应激和细胞凋亡的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、紫檀芪低剂量组(30 mg/kg)、紫檀芪高剂量组(60 mg/kg)、紫檀芪(60 mg/kg)+N-(4-(2,3-二氢-1-(2’-甲基苯甲酰)-1H-吲哚-5-基)-5-甲基-2-噻唑基)-1,3-苯并二氧唑-5-乙酰胺(ML385)(30 mg/kg)组,每组12只。模型组与药物干预组大鼠以高脂饲料饲养诱导NAFLD模型,对照组大鼠以普通饲料饲养,各组连续喂养12周。以紫檀芪和ML385分组处理14 d后(对照组以等剂量生理盐水处理),检测各组大鼠脂代谢指标[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及游离脂肪酸(FFA)水平]、肝指数、肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)]水平、血清白细胞介素(IL)-17、IL-6、IL-10、氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)]水平;原位末端标记法(TUNEL)染色检测各组大鼠肝细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法检测各组大鼠肝组织凋亡相关蛋白及Keap-1/Nrf2/HO-1通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠血清IL-10、SOD及CAT水平、肝组织Nrf2、HO-1、Bcl-2表达水平显著降低(P<0.05),TG、TC及FFA水平、肝指数、ALT及AST水平、血清IL-17、IL-6、MDA水平、肝细胞凋亡率、肝组织Keap-1及Bax表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组相比,紫檀芪低、高剂量组大鼠血清IL-10、SOD及CAT水平、肝组织Nrf2、HO-1、Bcl-2表达水平均升高(P<0.05),TG、TC及FFA水平、肝指数、ALT及AST水平、血清IL-17、IL-6、MDA水平、肝细胞凋亡率、肝组织Keap-1、Bax表达水平均降低(P<0.05);与紫檀芪低剂量组相比,紫檀芪高剂量组大鼠血清IL-10、SOD及CAT水平、肝组织Nrf2、HO-1、Bcl-2表达水平升高(P<0.05),TG、TC及FFA水平、肝指数、ALT及AST水平、血清IL-17、IL-6、MDA水平、肝细胞凋亡率、肝组织Keap-1及Bax表达水平降低(P<0.05);与紫檀芪高剂量组相比,紫檀芪+ML385组大鼠血清IL-10、SOD及CAT水平、肝组织Nrf2、HO-1、Bcl-2表达水平降低(P<0.05),TG、TC及FFA水平、肝指数、ALT及AST水平、血清IL-17、IL-6、MDA水平、肝细胞凋亡率、肝组织Bax表达水平升高(P<0.05)。结论:紫檀芪可能通过激活Keap-1/Nrf2/HO-1信号通路,改善NAFLD大鼠脂代谢水平,调节炎症反应及氧化应激,减轻肝组织脂肪变性及细胞凋亡。

基于“土壅木郁”探讨加味理中汤治疗非酒精性脂肪性肝炎的理论基础

非酒精性脂肪性肝炎(NASH)又称代谢性脂肪性肝炎,是指在肝细胞发生脂肪变性后所导致的肝细胞炎症,是一种病理变化与酒精性肝炎相似但无过量饮酒史的临床综合征,根据炎症程度可划分3级(G 0~3)[1]。NASH被认为是非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)进展的关键阶段,其占比为10%~20%,10年内肝硬化发生率高达25%,并增加了肝细胞癌等终末期肝病的风险[2]。祖国医学将NASH归类于“肥气”“肝癖”“肝著”等范畴[3],而在中医五行中脾与肝归属于土与木,其存在乘侮克制的内在联系。