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劳埃晶体学时代的到来 被引量:1
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作者 REN Zhong Dominique Bourgeois +8 位作者 John R.Helliwell Keith Moffat VukicaSrajer Barry L.Stoddard 沈月全 杨晓静 任匡一 顾茵 任重 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期419-434,共16页
近年来 ,人们对古老的劳埃衍射技术重新产生了浓厚的兴趣。这主要是因为世界各地新的同步辐射光源的建成;各种先进的插入件,诸如波形器(wiggler)、波荡器(undulator)的飞速发展 ;以及利用这类光源通过时间分辨晶体学来研究分子结构动态... 近年来 ,人们对古老的劳埃衍射技术重新产生了浓厚的兴趣。这主要是因为世界各地新的同步辐射光源的建成;各种先进的插入件,诸如波形器(wiggler)、波荡器(undulator)的飞速发展 ;以及利用这类光源通过时间分辨晶体学来研究分子结构动态变化的前景。在过去的十年中 ,理论研究已经阐明了多波长衍射几何学的特征 ,在很大程度上加深了我们对劳埃法的认识。劳埃数据处理方法及其软件开发也因此有所创新。曾在相当长的时间内限制这项技术应用的劳埃数据处理中的大部分问题现在已经得到解决 ;同步辐射光源 ,束线光学器件及X射线探测器等方面也都取得了显著的进步。静态劳埃实验得到的结构因子振幅在质量上已同单波长数据相当。晶体中反应易于启动的时间分辨劳埃实验已经开始在一系列生物分子体系中得到成功的实践。由此得到的关于结构动力学的信息是任何其它传统的衍射方法所无能为力的。这些静态的及时间分辨的实验说明了劳埃法已经开始走向成熟 ,并指明了今后发展的方向 ,即对晶体的镶嵌度和劳埃衍射点的相应能量宽度的正确处理、扩散散射的考虑、时间分辨实验中低浓度瞬态中间物结构的测定等等。 展开更多
关键词 劳埃衍射 时间分辨晶体学 生物分子
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劳埃晶体学时代的到来
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作者 任重 Dominique Bourgeois +7 位作者 John R.Helliwell Keith Moffat Vukica Srajer Barry L.Stoddard 沈月全 杨晓静 任匡一 顾茵 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期1-10,共10页
关键词 蛋白质晶体学 劳埃技术 实验方法
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龙虾D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶四方晶型结构 被引量:1
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作者 沈月全 宋时英 林政炯 《中国科学(C辑)》 CSCD 2000年第1期9-15,共7页
用座滴汽相扩散法培养出龙虾 (Palinurusversicolor)D 甘油醛 3 磷酸脱氢酶(holo GAPDH)的四方型晶体 ,空间群为P42 12 ,晶胞参数为a =1 5 .49nm ,c =8 0 3nm ,不对称单位含两个亚基 .应用分子置换法测定了 0 .34nm分辨率晶体结构 .最... 用座滴汽相扩散法培养出龙虾 (Palinurusversicolor)D 甘油醛 3 磷酸脱氢酶(holo GAPDH)的四方型晶体 ,空间群为P42 12 ,晶胞参数为a =1 5 .49nm ,c =8 0 3nm ,不对称单位含两个亚基 .应用分子置换法测定了 0 .34nm分辨率晶体结构 .最后的晶体学Rfree和R因子分别为 0 2 74和 0 2 6 2 ,与标准键长和键角的均方根偏差分别为 0 0 0 2nm和 2 33°.不对称单位的两个亚基不仅三维结构相似而且平均温度因子也接近 ,这一结果说明以前报道的C2晶型中亚基平均温度因子的显著差别很可能是由于两个亚基处于不同的晶体学环境引起的 ,进一步支持了holo GAPDH分子具有良好的 2 2 2对称性 . 展开更多
关键词 磷酸脱氢酶 龙虾 晶体结构 GAPDH 四方型晶体
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龙虾D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶与辅酶类似物结合的晶体学
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作者 沈月全 王兆捷 +2 位作者 宋时英 周筠梅 林政炯 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第3期310-314,共5页
与辅酶不同,辅酶类似物ADP-ribose和SNAD与D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的结合不表现协同性.用共晶方法和座滴汽相扩散技术培养出中国南海龙虾(Palinurus versicolor)GAPDH与... 与辅酶不同,辅酶类似物ADP-ribose和SNAD与D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的结合不表现协同性.用共晶方法和座滴汽相扩散技术培养出中国南海龙虾(Palinurus versicolor)GAPDH与ADP-ribose和SNAD复合物的晶体.X射线衍射数据分析表明它们的空间群均为C2,并具有类似晶胞参数,分别为 α= 15.280 nm, b= 10.035 nm, c= 12.831 nm, β=110.28°和α=15.341 nm,b=10.051 nm,c=12.844nm,β=110.48°.估算不对称单位合1个分子即4个亚基.与GAPDH全酶和酶蛋白晶体比较,属于不同晶型.这个结果提示着辅酶类似物的结合产生了比较大的酶构象变化,而且这个构象变化不同于辅酶结合引起的构象变化.旋转函数计算结果表明,这两种辅酶类似物复合物的四聚体也具有明显的222分子对称性.它们的结构分析并与全酶和酶蛋白比较将为了解酶的协同性机理提供一些有益的线索. 展开更多
关键词 磷酸脱氢酶 龙虾 GAPDH 辅酶类似物 晶体学
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植物糖基转移酶的结构与机理及糖基化工程的研究进展 被引量:8
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作者 刘美子 王丹丹 +2 位作者 秦超 王小强 沈月全 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2019年第9期1133-1142,共10页
糖基转移酶(glycosyltransferases, GTs)广泛存在于各种有机体中,通过糖基化反应参与维持细胞代谢稳态.糖基转移酶能够识别多种受体,催化活化的糖基从供体分子转移到受体分子上,改变受体分子的化学稳定性、水溶性以及受体分子的转运能... 糖基转移酶(glycosyltransferases, GTs)广泛存在于各种有机体中,通过糖基化反应参与维持细胞代谢稳态.糖基转移酶能够识别多种受体,催化活化的糖基从供体分子转移到受体分子上,改变受体分子的化学稳定性、水溶性以及受体分子的转运能力和生物活性等,进而有助于提高其生物利用度和生物活性等.许多被糖基化修饰的化合物成为药物分子的重要来源.然而,天然产物中的糖苷类化合物存在含量低、提取难度大和提取产物纯度差等问题.在利用化学合成方法合成糖苷类化合物的过程中,无法实现特定位点的糖基化修饰,同时原料试剂和副产物易对环境造成污染.因此,近年来对糖基转移酶的研究日渐增多.本文简要综述了植物糖基转移酶的结构和生物技术应用的研究进展,为基于植物糖基转移酶结构的糖基化工程和生物活性糖苷化合物的生产提供有用信息. 展开更多
关键词 植物糖基转移酶 糖基化修饰 晶体结构 生物技术应用
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线粒体内膜膜蛋白结构研究的新方法及应用 被引量:1
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作者 唐雪莹 沈月全 +2 位作者 廖军 陆珺霞 张兴 《中国基础科学》 2018年第1期58-62,共5页
线粒体是细胞内极其重要的细胞器。一方面作为细胞的能量工厂,提供ATP来满足细胞的各种活动需要;另一方面,作为细胞内信号传导的节点,调控细胞内许多重要的生理进程。因此线粒体的功能紊乱直接导致多种重大疾病,对线粒体的研究是我国医... 线粒体是细胞内极其重要的细胞器。一方面作为细胞的能量工厂,提供ATP来满足细胞的各种活动需要;另一方面,作为细胞内信号传导的节点,调控细胞内许多重要的生理进程。因此线粒体的功能紊乱直接导致多种重大疾病,对线粒体的研究是我国医学健康领域的重大需求。线粒体内膜如何进行跨膜信号传导,从而完成各项生理学功能,这方面的研究工作还比较缺乏。本项目旨在研究和发展新方法,改善长期困扰真核膜蛋白表达和纯化的瓶颈,力争探索出一条适合于实验室常规应用的真核膜蛋白表达纯化的路径。并在膜蛋白结构研究的三大主要技术——X-射线晶体衍射、生物冷冻电镜和核磁共振的现有基础上,开发和利用新技术和新方法,对具有重大生理功能的线粒体内膜膜蛋白质开展结构生物学和生理学功能研究,阐明线粒体跨内膜信号传导的科学问题。 展开更多
关键词 线粒体 膜蛋白结构 X-射线 冷冻电镜 核磁共振
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Structure of D-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase from Palinurus versicolor in a tetragonal crystal form
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作者 沈月全 宋时英 林政炯 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2000年第1期96-104,共9页
D-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (holo-GAPDH) from Palinurus versicolor was crystallized in a novel crystal form by the method of sitting-drop vapor diffusion. The crystals have space group P4212, cell param... D-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (holo-GAPDH) from Palinurus versicolor was crystallized in a novel crystal form by the method of sitting-drop vapor diffusion. The crystals have space group P4212, cell parameters a=15.49 nm, c=8.03 nm and two subunits per asymmetric unit. The crystal structure at 0.34 nm was determined by the molecular replacement method. The final model has crystallographic Rfree and R factors of 0.274 and 0.262, and r.m.s. deviations of 0.002 nm for bond lengths and 2.33?for bond angles. The two subunits in asymmetric unit are similar to each other not only in the three-dimensional structure, but also in average temperature factors. This result demonstrates that the obvious difference in average temperature factors for the different subunits in C2 crystal form reported previously may be attributed to the different crystallographic environments of the subunits. This further supports that holo-GAPDH has a good 222 molecular symmetry. 展开更多
关键词 D-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase ALLOSTERIC enzyme and crystal structure.
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