多平面重建及3D打印在前交叉韧带翻修术中的应用

目的:前交叉韧带损伤是膝关节韧带损伤中最常见的类型。韧带重建手术存在较高的失败率,骨道异常被认为是最重要的失败因素。数字骨科技术可以在术前较为精准地制订翻修手术过程中骨道的实施方案,提高翻修手术成功率。本研究术前通过多平面重建(multiplanar reconstruction,MPR)技术测定骨道位置和直径及3D打印模型建立模拟骨道,以制订前交叉韧带翻修术方案。方法:回顾性选取2014至2021年在中南大学湘雅三医院行前交叉韧带翻修术的12名患者,收集患者的基本信息、术前制订的膝关节3D打印模型及术前膝关节CT数据。测量骨道直径及位置,以此为基础指导术中翻修骨道的建立,并对术后的骨道进行再次测量及对膝关节功能进行评分[包括国际膝关节文献委员会膝关节评估表(the International Knee Documentation Committee Knee Evaluation Form,IKDC)评分、Lysholm评分、Tegner运动等级评分]。结果:术前通过测量发现4名患者的股骨骨道位置和2名患者的胫骨骨道位置欠佳,通过MPR与3D打印技术指导术中新骨道的建立,术后测量所有患者的骨道位置满意。术前的股骨与胫骨骨道内口直径测量值的组内相关系数分别为0.843(P<0.05)和0.889(P<0.001),组间相关系数分别为0.811(P<0.05)和0.784(P<0.05);术中建立的股骨与胫骨骨道内口直径与术后复查CT测量的股骨及胫骨骨道内口直径的组内相关系数分别为0.995(P<0.001)和0.987(P<0.001)。12名患者末次随访的各项膝关节功能评分均较术前明显改善(均P<0.001),再次手术率为0。结论:MPR与3D打印技术能较为精准、有效地测量前交叉韧带重建骨道参数,为重建失败患者制订个性化的翻修方案,很大程度上保障了翻修手术的成功率,有利于改善患者预后。

体重指数与髋关节骨性关节炎关节置换术的相关性研究

目的主要探讨体重指数(BMI)是否是导致髋关节骨性关节炎行髋关节置换术的一种危险因素.方法选取1994年～2004年在本院确诊为髋关节骨性关节炎,并行髋关节置换术的158例,计算他们的入院时的体重指数.与同时期在本院住院的非髋关节骨性关节炎患者为对照,进行1:1病例对照分析.结果BMI的增加和髋关节置换术有紧密的关联.当BMI≥25.0kg/m2时,男性组的比值比(OR)值为3.30,95%可信区间(CI)为1.61～6.77;女性组OR值为1.61,95%CI为1.01～2.56.结论肥胖是导致髋关节骨性关节炎最终行髋关节置换术的一个重要危险因素.

三维CT重建在肩胛骨骨折中的应用

目的 探讨三维CT重建在肩胛骨骨折治疗中的指导意义。方法 7例肩胛骨粉碎性骨折患者接受X线、CT扫描、三维CT重建检查 ,对骨折的严重程度进行评估 ,并据此制定最佳治疗方案。结果 7例中 ,4例累及肩胛颈 ,2例累及肩胛颈和肩胛盂 ,1例伴锁骨骨折 ;6例接受手术治疗。所有患者均获得随访 ,随访时间 3个月～ 2年 6个月 ,骨折平均愈合时间 7～ 10周 ,肩关节功能恢复良好。结论 三维CT重建能多方位、立体、全面地显示肩胛骨骨折部位、程度。对骨折手术方案的制定、手术入路和内固定的选择有很强的指导意义。

Seminar教学法在外科临床见习教学中的应用

为了探讨Seminar教学模式在外科临床见习教学中的应用效果,将2009级临床医学专业的学生40名名学生随机分为实验组和对照组,每组各20名。实验组采用Seminar教学,对照组采用传统讲授法教学。学期结束后对学生进行问卷调查,并对临床技能进行考核。Seminar教学极大地提升了学生学习的积极性和主动性,提高了学生的自学能力、表达能力,培养了学生的科研能力,同时提升了学生的团队精神以及增加了师生互动。部分学生认为增加了学习负担,讲授的学习重点不清晰。Seminar教学模式是外科临床见习的较好的一种教学模式,对外科学的教学发展起到了积极作用。其运用推广还需更多的实践和探索。

脊柱显微内镜治疗腰椎间盘突出症手术原则

目的 :探讨后路脊柱显微内窥镜椎间盘摘除术 (MicroendoscopicDisectomy ,MED)治疗腰椎间盘突出症(LumbarDiscHemiation ,LDH)手术的原则。方法 :回顾总结 348例腰椎间盘突出症行MED手术的临床资料。结果 :本组 336例获得随访 ,随访时间平均 1 8个月 ,按照Macnnab标准评定 ,优 2 69例 ,良 38例 ,可 2 9例 ,优良率 91 .2 5 %。结论 :MED手术成功的关键是必须遵守MED手术原则 ,即 :正确的手术适应证、熟练的操作技术。

腰椎侧面节段血管神经的应用解剖

目的:为腹腔镜下腰椎融合术提供解剖学基础。方法:观测50侧成人尸体标本腰节段血管的走行及分布,测量相邻节段血管间距、交感干至椎间孔的垂直距离、椎体侧面中点处椎间盘上下缘至相邻节段血管的距离。结果:腰节段动、静脉较恒定地走行于椎体侧面中间浅沟内,大多数有交通支伴行。在椎间隙侧面,上、下位腰动、静脉、交感神经与腰丛之间构成了一个相对无血管神经的“安全区”,“安全区”最小面积为27.90mm×27.18mm。结论:(1)腰椎侧面的节段血管走行与分布较为恒定;(2)在腰椎间隙侧面存在相对无血管、神经的“安全区”;(3)腹腔镜下行腰椎融合术时,通过“安全区”植入融合器可减少对血管、神经的损伤。

特定培养基条件下大鼠脂肪间充质干细胞体外定向软骨细胞的分化

目的:体外诱导大鼠脂肪间充质干细胞向软骨细胞分化,并对分化细胞进行相应鉴定,观察脂肪间充质干细胞作为软骨组织工程种子细胞的可行性。方法:实验于2005-05/2006-05在湘雅医院中心实验室完成。①取大鼠腹股沟脂肪,消化分离脂肪间充质干细胞进行原代培养。②流式细胞仪检测第3代脂肪间充质干细胞表面CD29,CD34,CD44表达。③传3代细胞进行微团培养1d,换用含体积分数为0.01的新生牛血清、10μg/L的转化生长因子β1、6.25mg/L的胰岛素、6.25mg/L的转铁蛋白、1×10-7mol/L的地塞米松、50mg/L的维生素C的高糖DMEM诱导液,为特定培养条件。④在诱导后4,7,14d应用阿尔新兰染色、蕃红O/固绿染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学评价软骨形成情况。⑤反转录-聚合酶链反应在诱导后0和14d检测脂肪间充质干细胞前Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖mRNA的表达。结果:①脂肪间充质干细胞的形态特征:原代脂肪间充质干细胞呈短梭形、梭形及多角形,3代后呈均一长梭形。②脂肪间充质干细胞的表面标志鉴定:脂肪间充质干细胞表达CD29,CD44,基本不表达CD34。③脂肪间充质干细胞诱导后的形态特征:脂肪间充质干细胞经诱导后,由长梭形转变为三角形、多角形或短梭形,逐渐聚集成结节。④脂肪间充质干细胞诱导后的细胞化学染色结果:诱导后脂肪间充质干细胞胞外基质阿尔新兰染色、蕃红O/固绿染色、和Ⅱ型胶原免疫细胞化学着色阳性。⑤反转录-聚合酶链反应检测结果:反转录-聚合酶链反应检测未诱导脂肪间充质干细胞不表达前Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖mRNA基因,而诱导后的脂肪间充质干细胞表达前Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖mRNA基因。结论:脂肪间充质干细胞在由转化生长因子1、胰岛素、转铁蛋白等组成的特定培养基条件诱导下可以定向软骨细胞分化。

大鼠脂肪间充质干细胞的成骨分化

目的:观察大鼠脂肪间充质干细胞经成骨诱导向成骨细胞分化的生物学特性,探讨其作为骨组织工程种子细胞的可行性。方法:实验于2004-07/2006-03在中南大学湘雅医院中心实验室完成主要工作。①取健康SD大鼠双侧腹股沟区脂肪垫,消化法分离出脂肪间充质干细胞,接种入含有体积分数为0.1的新生牛血清的低糖DMEM培养基进行原代培养。②取第3代的脂肪间充质干细胞,用含有体积分数为0.1的新生牛血清、0.1μmol/L地塞米松、50μmol/L抗坏血酸、10mmol/Lβ-甘油磷酸钠的高糖DMEM培养基诱导其向成骨细胞分化。③于3,5,7,10,12,14,21d分别采用倒置显微镜观察细胞形态及增殖情况、Gomori改良钙钴法碱性磷酸酶染色、茜素红S钙结节染色和Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色检测脂肪间充质干细胞成骨分化的情况。结果:①脂肪间充质干细胞原代细胞呈成纤维细胞样长梭形外观,传代稳定,细胞形态均一。②经成骨诱导,脂肪间充质干细胞体积增大,呈多角形;成骨诱导14d,Gomori改良钙钴法碱性磷酸酶染色,细胞胞浆内可见浅棕色至棕黑色的颗粒,平均染色阳性率为80%;碱性磷酸酶活性随时间的延长而逐渐增高[3,5,7,10,12,14d依次为(2.43±0.09),(3.60±0.08),(5.01±0.09),(7.75±0.07),(9.59±0.09),(10.94±0.10)μkat/L];成骨诱导21d,钙结节形成明显,茜素红S染色,呈红色结节;成骨诱导7d,Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色,细胞胞浆呈棕黄色,胞核经苏木精复染为蓝色。结论:大鼠脂肪间充质干细胞经成骨诱导具有成骨细胞的生物学特性,可作为骨组织工程的种子细胞。

性别对人工全膝关节置换术后临床疗效的影响

目的探讨性别因素对膝关节骨关节炎患者全膝关节置换术后临床疗效的影响。方法随机选择2008年1月-2012年12月在中南大学湘雅三医院行初次单侧人工全膝关节置换术的100例膝关节骨关节炎患者（男、女各50例）,回顾性分析患者术后1周、2周、1年的临床疗效和术后1年的满意度差异。结果男女患者术后1周膝关节疼痛、ROM无差异（P〉0.05）,男性患者术后2周和术后1年的膝关节疼痛评分、ROM及术后1年的膝关节功能评分、HSS评分较女性好（P〈0.05）;术后1年男女患者满意度显示无差异（P〉0.05）。结论性别因素对膝关节骨关节炎患者全膝关节置换术后膝关节疼痛缓解、膝关节ROM及功能改善有影响;男女患者术后短期满意度无差异。

大鼠脂肪和骨髓来源间充质干细胞基本生物学特征的比较

目的:分离大鼠脂肪和骨髓来源的间充质干细胞,比较两种间充质干细胞的生物学特征。方法:实验于2003-09/2006-11在广州市第一人民医院、湘雅医院中心实验室完成。取SD大鼠的股骨、胫骨、肱骨及腹股沟处脂肪垫进行骨髓间充质干细胞与脂肪间充质干细胞的分离。将骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞在含10%血清,1%双抗的低糖DMEM培养基,37℃、体积分数为0.05的CO2条件下进行培养。在细胞达到80%～90%融合时,使用0.25%胰酶消化传代。传代至第3代使用倒置显微镜观察骨髓和脂肪两种不同来源细胞的传代后的形态、贴壁、生长增殖、集落等情况。取消化传3代的两种细胞分别制成单细胞悬液进行细胞贴壁率的检测,贴壁率=贴壁细胞总数/接种细胞总数×100%。取第2代和第5代骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞以1×107L-1密度培养。每天同一时间,随机抽取5孔细胞,加入5%噻唑兰20μL/孔,培养4～6h,吸出孔内液体,每孔加150μL二甲基亚砜震荡10min,酶联免疫测定仪测定波长490nm处的吸光度,取5孔吸光度的均值,以时间为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制生长曲线。采用流式细胞仪检测细胞表面CD29、CD34、CD44标记,免疫化学检测细胞CD29、CD34、CD44。结果:①在单位质量骨髓和脂肪组织中获得的间充质干细胞数量相当。两种细胞形态均为条索样,呈成纤维细胞形态。②应用直线相关分析,考察骨髓贴壁率与脂肪贴壁率之间的关系,相关系数r=0.999,决定系数r2=0.997(F=5862.949,P<0.001),两贴壁率之间有直线相关关系,不同的时间点两种细胞的贴壁率相似,并且有同向变化的趋势。③脂肪间充质干细胞的增殖能力与骨髓间充质干细胞相当。④脂肪间充质干细胞和骨髓间充质干细胞表面表达CD29、CD44,不表达CD34。结论:自大鼠脂肪中可提取出与骨髓间充质干细胞生物学特征类似的脂肪间充质干细胞。

脂肪干细胞向软骨细胞诱导分化能力的研究

目的探讨脂肪干细胞体外定向分化为软骨细胞的能力。方法在特定培养基条件下,采用"微团"培养方法对脂肪干细胞进行成软骨诱导,于诱导7,14d后应用Ⅱ型胶原免疫组化和aggrecan免疫荧光检测成软骨表型;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测脂肪干细胞诱导0周、2周和4周后前Ⅱ型胶原蛋白、ag-grecan和Sox9的mRNA基因表达情况。结果脂肪干细胞经诱导后,由长梭形转变为三角形、多角形或短梭形,逐渐聚集成结节,胞外基质Ⅱ型胶原免疫组化着色和aggrecan免疫荧光阳性,前Ⅱ型胶原蛋白、aggrecan和Sox9的mRNA基因均稳定表达。结论脂肪干细胞在特定培养基条件下可以定向软骨细胞方向分化,并能够稳定表达软骨细胞特异表型。

MED治疗腰椎间盘突出症的定位方法

目的 :探讨MED(microendoscopicdisectomy ,MED)治疗椎间盘突出症的定位方法。方法 :对我院 1 999年1 2月～ 2 0 0 1年 8月应用MED治疗腰椎间盘突出症的 348例手术定位方法进行分析、总结。结果 :按张朝跃MED镜下手术标准[1 ] 进行评定 :共有 1 0例出现定位失误 ,其中 2例因定位不准中转开放手术。定位准确率为 97.1 %。结论 :定位是MED治疗腰椎间盘突出症中的一个重要步骤 。

切开复位重建钢板内固定治疗跟骨关节内骨折效果(附35例报告)

目的探讨重建钢板内固定治疗跟骨关节内骨折的效果及减少并发症的策略。方法对35例39侧跟骨关节内骨折采用外侧扩大"L"形切口,使用跟骨重建钢板固定,并对术后并发症进行分析。结果术后3个月,35例39侧跟骨关节内骨折按Maryland评分,优良率为76.92%。Bhler角由术前13.2°±4.1°恢复到术后38.5°±9.1°。随访中有1例后关节面发生塌陷,Bhler角5°,行走严重疼痛。切口坏死2例,切口感染1例,无腓肠神经损伤。并发症发生率11.43%。结论采用重建钢板内固定治疗对SandersⅡ、Ⅲ型跟骨关节内骨折,术中掌握复位和固定的关键点,正确选择手术时机和切口无创操作能取得满意的疗效。

提取大白鼠脂肪干细胞的初步研究

目的探讨自脂肪中分离干细胞的方法。方法取大白鼠皮下脂肪组织,经消化、离心、去除红细胞等步骤,培养,间日换液。结果出现呈梭形成纤维细胞样生长的细胞,细胞增殖旺盛。结论可自大鼠皮下脂肪获得多能干细胞。

腰椎间盘突出症术后复发原因和手术方法的探讨

【目的】分析腰椎间盘突出症术后再突出的原因,探讨其手术方法。【方法】21例腰椎间盘突出症术后复发患者,经术前检查和术中证实为原发节段复发突出,行后路半椎板或全椎板切除椎间盘摘除神经根松解减压,或椎体间融合术。【结果】15例从原发侧突出,6例从对侧突出。10例初次术后有经常剧烈运动或负重劳动或外伤史。平均随访1.2年,按改良Macnab疗效评价标准,优10例,良7例,可3例,差1例。【结论】腰椎间盘原发节段复发可能和外伤及长期负重有关,且多为原发侧。再手术时如需切除关节突或棘上棘间韧带,则推荐进行椎间融合术。

全髋置换术中骨水泥反应的原因及预防

目的对人工全髋关节置换的病例进行分析总结,探讨人工全髋置换术中骨水泥反应发生的原因及预防.方法回顾调查1995年1月～2003年6月湘雅医院进行人工全髋关节置换术232例(239髋).男113例,女119例;平均年龄57.3岁.对术中出现骨水泥反应的患者术前、术后和随访期间的年龄、身体状况、症状、体征等进行总结评价,对术前准备、术中术后处理及预防进行探讨.结果232例(239髋)患者中5例现已死亡,失访5例,其余232例(242髋)患者随访0.5～9.0年,平均4.6年.骨水泥反应13例,发生率为5.60%,13例患者均为高龄患者,有明显的骨质疏松.使用现代骨水泥技术以后,只有2例患者出现明显的骨水泥反应.结论高龄、骨质疏松是骨水泥反应的高危因素;使用现代骨水泥技术可以降低骨水泥反应的发生率.

大鼠脂肪间充质干细胞的分离培养及生物学特性的实验研究

【目的】建立一种体外分离和培养大鼠脂肪间充质干细胞的方法,并探讨其部分生物学特性。【方法】无菌技术下切取双侧腹股沟脂肪垫,加入适量Ⅰ型胶原酶消化获取细胞,接种入含10%新生牛血清的DMEM培养液,倒置显微镜下连续观察细胞形态变化,测定其生长曲线及贴壁率。【结果】原代培养显示培养的脂肪间充质干细胞2 d左右开始贴壁,7 d左右可达90%融合,基本上为梭形成纤维样细胞形态。14代以前具有活跃的增殖能力。【结论】成功地建立了一种分离培养大鼠脂肪间充质干细胞的方法,其生长稳定、增殖较快,可以作为组织工程的种子细胞。

胰岛素样生长因子-Ⅰ对血清饥饿引起成骨细胞增殖抑制的保护作用

目的探讨血清饥饿条件下成骨细胞的增殖及胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的作用。方法采用组织块培养法体外培养成骨细胞,分正常血清浓度组,血清饥饿组,IGF-Ⅰ组进行干预,观察细胞生长状态,MTT法检测细胞增殖。结果血清饥饿组成骨细胞贴壁减少,融合缓慢,增殖低于正常血清浓度组(P<0.01),IGF-Ⅰ组细胞增殖较血清饥饿组增加(P<0.01),低于正常血清浓度组(P<0.01)。结论血清饥饿抑制成骨细胞增殖,可能是缺血性骨病的发病机制之一。IGF-Ⅰ能部分改善由于血清饥饿引起的成骨细胞抑制。

胰岛素样生长因子1对酒精干预体外培养成骨细胞增殖和功能抑制的影响

目的探讨体外培养成骨细胞在不同血清浓度条件下酒精干预后增殖和功能的改变,以及胰岛素样生长因子1(insulin-likegrowth factor1,IGF-1)的保护作用。方法体外分离培养新生SD大鼠颅骨成骨细胞,分6组在不同条件下进行培养,分别为正常血清浓度组(F15组,含15%新生牛血清)、正常血清浓度加酒精组(F15/EtOH组,酒精浓度为100mmol/L)、血清饥饿组(F2组,含2%新生牛血清)、血清饥饿加酒精组(F2/EtOH组)、血清饥饿加IGF-1组(F2/IGF-1组,IGF-1浓度为25ng/ml)和血清饥饿、IGF-1加酒精组(F2/IGF-1/EtOH组)。于培养24、48、72、96h检测细胞增殖、细胞内碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性和骨钙素(boneglaprotein,BGP)mRNA表达。结果各时间点F15/EtOH组成骨细胞吸光度(A)值及ALP活性、BGPmRNA表达较F15组均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。F2组较F15组A值及ALP、BGPmRNA降低(P<0.05),F2/EtOH组较F2组降低(P<0.05),F2/IGF-1组较F2组增加(P<0.05);F2/IGF-1/EtOH组较F2/IGF-1组除24h外A值无明显降低(P>0.05),ALP、BGPmRNA均降低(P<0.05),A值及ALP、BGPmRNA较F2/EtOH组增加(P<0.05)。结论酒精能引起成骨细胞增殖和功能抑制,加重血清饥饿对成骨细胞的抑制作用,可能是酒精性骨损害的机制之一。IGF-1能改善血清饥饿引起的成骨抑制,并抵抗酒精抑制细胞增殖的作用,可能成为探索治疗酒精性骨损害的途径之一。

脑外伤患者锁骨骨折的手术治疗

目的探讨脑外伤患者锁骨骨折手术治疗的时机和方法。方法对37例合并脑外伤的锁骨骨折患者进行手术固定,并随访。结果平均随访9.2个月,34例一期愈合,5例克氏针松动,其中3例骨折不愈合,钢板固定者6例发生螺钉松动。结论脑外伤患者病情平稳即可行锁骨骨折手术治疗,钢板固定系统有较好的疗效。