白介素-17诱导自噬促进破骨前体细胞分化的机制

目的:探讨白介素-17(IL-17)诱导的自噬及其相关蛋白在促进牙槽骨破坏过程中的具体机制。方法:对照组以含30 ng/m L巨噬细胞集落刺激因子、50 ng/m L核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的培养基诱导小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM),IL-17组分别以0.01、0.1、1.0、10 ng/m L IL-17处理,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察TRAP阳性多核破骨细胞;鬼笔环肽荧光染色检测肌动蛋白环周长;甲苯胺蓝染色分析骨吸收陷窝形成情况。另设对照组使用含50 ng/m L RANKL的培养基诱导RAW264.7细胞,IL-17组分别以0.01、0.1、1.0、10 ng/m L的IL-17处理,采用蛋白质印迹法检测不同浓度IL-17处理后自噬相关蛋白Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)及破骨细胞相关蛋白c-fos、活化T细胞核因子1(NFATc1)的表达;检测1.0 ng/m L IL-17处理及加入自噬抑制剂3-MA后RAW264.7细胞LC3、NFATc1、TRAF6/ERK/p38信号通路相关蛋白的表达。结果:0.01、0.1、1.0 ng/m L IL-17处理BMM后,TRAP阳性多核破骨细胞数量、肌动蛋白环周长以及骨吸收陷窝面积较对照组均增加,且1.0 ng/m LIL-17处理RAW264.7细胞后,c-fos、NFATc1、Beclin-1、LC3、TRAF6、磷酸化ERK、磷酸化p38蛋白表达均上调(均P<0.05);而采用自噬抑制剂3-MA处理后,LC3、NFATc1、TRAF6、磷酸化ERK、磷酸化p38的表达水平均下降(均P<0.05)。结论:IL-17可促进Beclin-1、LC3等自噬关键蛋白表达,增强破骨前体细胞的分化能力,TRAF6/ERK/p38信号通路参与该过程。