氧化酚砷诱导急性早幼粒细胞性白血病细胞凋亡的研究

目的：了解氧化酚砷（phenylarsineoxide,PAO）对急性早幼粒细胞性白血病（APL）细胞系NB4细胞的可能作用。方法：在台盼蓝排除法计数活细胞和细胞活力的基础上，通过细胞形态学和流式细胞仪检测细胞凋亡。通过对细胞进行Rhodamine（Rh）123和碘化丙啶双重染色，并应用流式细胞仪检测其荧光强度，以反映细胞线粒体跨膜电位（△Ψm）。结果和结论：低浓度（005和0．1μmol／L）的PAO明显抑制NB4细胞的生长，并显著降低其细胞活力。进一步地，细胞形态学观察和流式细胞仪分析显示，这些浓度的PAO诱导NB4细胞凋亡。该效应可能与△Ψm下降密切相关。

氧化酚砷对血液肿瘤细胞系的体外效应

目的：了解氧化酚砷（Ｐｈｅｎｙｌａｒｓｉｎｅ ｏｘｉｄｅ， ＰＡＯ）对血液肿瘤细胞系的影响。方法： ８种血液肿瘤系经０．０１μｍｏｌ／Ｌ、０.０５μｍｏｌ／Ｌ和０．１μｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＯ处理达一定时间后，经台盼蓝排除法计数细胞活力和应用流式细胞仪检测细胞ＤＮＡ含量分布。结果和结论：在生长抑制和诱导凋亡方面，ＰＡＯ对血液肿瘤细胞的效应谱相对较广，０．０５μｍｏｌ／Ｌ和０．１μｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＯ能抑制某些血液肿瘤细胞的生长，并诱导其凋亡。但是，不同来源的血液肿瘤细胞系对ＰＡＯ的敏感性不完全相同。

血清转铁蛋白受体的检测及其临床意义

采用针对ＴｆＲ的单抗ＨＩ１６６建立了定量测定血清转铁蛋白受体的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ工探讨其临床应用价值。通过对７例不同贫血患者ｓＴｆＲ水平检测，发现缺铁性贫血，溶血笥贫务帮急性去血性贫血患者ｓＴｆＲ均显著高于健康人。

提高骨髓细胞学实验教学质量的探索

总结了骨髓细胞学实验教学过程中的几点体会，并对实验教学的方法，实验报告的剖析及形态教学效果的评价进行了探讨．力求使形态实验教学的各个环节能有机地结合起来．进一步提高骨髓细胞学实验教学质量。

三氧化二砷对多发性骨髓瘤细胞的影响

目的 :了解多发性骨髓瘤细胞对As2 O3 的反应及其可能机制。方法 :使用多发性骨髓瘤细胞系RPMI82 2 6和U2 6 6细胞作为体外模型。细胞凋亡经细胞形态学、流式细胞仪和DNA凝胶电泳判定。通过测定细胞内荧光染料Rhodamine 12 3的染色强度分析线粒体跨膜电位 (ΔΨm) ,并采用蛋白印迹分析蛋白剪切情况。结果 :不同浓度的As2 O3 对RPMI82 2 6和U2 2 6细胞产生不同的效应 :0 1～ 0 5 μmol/L的As2 O3 抑制其增殖 ,2 0 μmol/L的As2 O3 诱导其凋亡 ,而 1 0 μmol/L的As2 O3 在抑制细胞增殖的同时轻度诱导细胞凋亡。As2 O3 诱导的MM细胞凋亡伴随线粒体ΔΨm下降和caspase 3的活化。结论 :As2 O3 具有一个相对较广的诱导凋亡效应谱 ,而线粒体ΔΨm破坏是As2 O3

贫血病人血清转铁蛋白受体水平的研究

应用单克隆抗体（ＣＤ７１）建立了斑点免疫过氧化酶法（ＤＩＰＡ），并对６１例不同贫血病人血清转铁蛋白受体（ＴｆＲ）水平进行测定。初步结果显示慢性再生障碍性贫血病人血清ＴｆＲ水平显著降低（Ｐ＜０．００１），溶血性贫血病人和缺铁性贫血病人则显著升高（Ｐ＜０．００１），而急性失血性贫血病人血清ＴｆＲ水平与正常人差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。提示血清ＴｆＲ测定为贫血性疾病的诊断提供了一项实用的临床新指标。

谷胱甘肽合成酶抑制剂加强三氧化二砷的凋亡诱导效应

目的 了解巯基在三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３） 诱导凋亡效应中的作用。方法 应用γ谷氨酰半胱氨酸合成酶抑制剂（ｂｕｔｈｉｏｎｉｎｅ ｓｕｌｆｏｘｉｍｉｎｅ，ＢＳＯ） 和Ａｓ２Ｏ３ 共同处理白血病细胞系ＮＢ４ 、ＨＬ６０、Ｕ９３７ 、ｊｕｒｋａｔ 和淋巴瘤细胞系ｎａｍａｌｗａ，通过流式细胞仪检测细胞线粒体跨膜电位（ΔΨｍ） 和凋亡细胞。结果１ ｍｍｏｌ／ＬＢＳＯ明显增加１ μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 诱导的ＮＢ４ 细胞ΔΨｍ 下降和凋亡，１ μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 不诱导ｎａｍａｌｗａ、ＨＬ６０、Ｕ９３７ 和ｊｕｒｋａｔ 细胞ΔΨｍ 下降和凋亡，但这些效应在Ａｓ２Ｏ３ 和ＢＳＯ同时处理后出现。结论 巯基是Ａｓ２Ｏ３

细胞凋亡机理的研究进展

细胞凋亡，亦称程序化细胞死亡。近年来在生物学、医学等领域备受关注，细胞凋亡机理的研究日新月异。现认为细胞凋亡过程大体可分为３个阶段；诱导期（ｉｎ－ｄｕｃｔｉｏｎｐｈａｓｅ）、效应期（ｅｆｅｃｔｏｒｐｈａｓｅ）和降解期（ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｐｈａｓｅ...

三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞凋亡机制研究

目的 了解三氧化二砷 (As2 O3 )诱导多发性骨髓瘤细胞 (MM)凋亡的可能机制及其与维甲酸和干扰素的相互作用。方法 联合应用As2 O3 和巯基还原剂 (DTT)、谷胱甘肽耗竭剂 (BSO)、全反式维甲酸 (ATRA)或干扰素 (IFN α)处理MM细胞系RPMI82 2 6和U2 6 6细胞 ;应用台盼蓝拒染法计数细胞活力 ,经细胞形态学和流式细胞仪等判定细胞凋亡的程度 ;通过测定细胞内荧光染料Rhodamine 12 3的色强度分析线粒体跨膜电位 (ΔΨm)。结果 BSO可加强As2 O3 诱导的RPMI82 2 6和U2 6 6细胞线粒体ΔΨm下降和凋亡 ,而DTT则有部分拮抗的作用。ATRA诱导RPMI82 2 6细胞凋亡 ,但它和As2 O3 之间无协同效应。ATRA并不诱导U2 6 6细胞凋亡。此外 ,IFN α既不抑制RPMI82 2 6和U2 6 6细胞的生长和活力 ,也不改变As2 O3 对这些细胞的作用。结论 As2 O3 诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡和巯基有关 ,但ATRA或干扰素和As2 O3 无协同效应。

三氧化二砷诱导血液肿瘤细胞凋亡的机制研究

目的了解三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）诱导的细胞凋亡是否与线粒体跨膜电位（ΔΨｍ）改变有关及其可能机制。方法以急性早幼粒细胞性白血病（ＡＰＬ）细胞系ＮＢ４、慢性淋巴细胞性白血病细胞系ＳＫＷ３、Ｂｕｒｋｉｔ’ｓ淋巴瘤细胞系Ｎａｍａｌｗａ及其它２个急性髓性白血病细胞系ＨＬ６０和Ｕ９３７为体外模型，应用碘化丙啶（ＰＩ）／Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ１２３（Ｒｈ１２３）双重染色检测ΔΨｍ，通过测定细胞活力、亚Ｇ１期细胞含量和基因组ＤＮＡ凝胶电泳及形态学观察等鉴定细胞凋亡。此外，还测定了细胞内丙二醛（ＭＤＡ）的含量。结果Ａｓ２Ｏ３可明显诱导线粒体ΔΨｍ下降。巯基还原剂—二巯基苏糖醇（ＤＴＴ）显著抑制Ａｓ２Ｏ３诱导的ΔΨｍ下降。在１μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３处理４８小时的ＮＢ４细胞，ＰＩ－Ｒｈ１２３－细胞达（１６．０±２．５）％，当ＤＴＴ同时处理时，ＰＩ－Ｒｈ１２３－细胞和凋亡细胞数分别降至（２．９±０．２）％和（１．８±０．３）％。Ａｓ２Ｏ３也明显诱导ＮＢ４细胞和ＳＫＷ３细胞产生ＭＤＡ［分别为（０．４７９±０．０４４）ｎｍｏｌ／１０６，（０．１６８±０．０１８）ｎｍｏｌ／１０５］，但该效应不被ＤＴＴ抑制。结论线粒体ΔΨｍ下降是Ａｓ?

三氧化二砷对恶性淋巴细胞系的影响

最近，有关三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）诱导细胞凋亡治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的研究引起了人们的广泛兴趣，并为国内外许多实验室所证实。Ｋｏｎｉｇ等［１］报道有机砷化合物ｍｅｌａｒｓｏｐｒｏｌ（０．１～１．０ｍｍｏｌ／Ｌ）有效地诱导慢性Ｂ细胞白血病细...

血液肿瘤细胞对氧化砷的敏感性与其抗氧化能力的关系

目的 探讨血液肿瘤细胞对三氧化二砷 (As2 O3 )的敏感性和细胞抗氧化能力的关系。方法 应用 9个血液肿瘤细胞系 ,通过细胞活力、形态学和流式细胞仪检测细胞凋亡 ,并测定细胞系的谷胱甘肽 (GSH)含量和 4种抗氧化酶的活性。结果 除了HL 6 0、U937、K5 6 2和Jurkat细胞外 ,其他5个细胞对As2 O3 诱导的凋亡敏感。与敏感细胞系比较 ,As2 O3 耐受细胞系存在较高的GSH含量和(或 )过氧化氢酶活性。谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽S转移酶和超氧化物歧化酶活性与细胞对As2 O3 诱导凋亡效应敏感性无明显相关。结论 细胞内GSH水平和过氧化氢酶的活性是决定血液肿瘤细胞对As2 O3 敏感性的重要因素。

氧化砷通过线粒体跨膜电位下降与激活Caspase3诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡

目的 探讨氧化砷 (As2 O3)是否诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡与其可能机制。方法 以两株多发性骨髓瘤细胞系RPMI82 2 6和U2 66为体外模型。以细胞形态学观察、流式细胞仪检测亚G1期细胞含量以及DNA凝胶电泳判定细胞凋亡。通过检测胞内Rhodamine12 3染色强度来判定线粒体跨膜电位。通过Western印迹分析蛋白表达。结果 0 1- 0 5μmol LAs2 O3抑制RPMI82 2 6与U2 66细胞系生长 ,2 0 μmol LAs2 O3 诱导两株细胞凋亡 ,而 1 0μmol LAs2 O3抑制细胞生长同时也诱导部分细胞凋亡。As2 O3诱导的细胞凋亡伴随线粒体跨膜电位下降与细胞凋亡 ,而二巯基苏糖醇 (二巯基还原剂 )则部分抑制以上效应。虽然全反式维甲酸 (ATRA)诱导RPMI82 2 6细胞凋亡 ,但是它与As2 O3无协同效应。结论 不同深度As2 O3可抑制多发性骨髓瘤细胞生长与诱导细胞凋亡。线粒体是As2 O3 诱导细胞凋亡的重要且共同的“靶子”。

三氧化二砷对转染表达两种早幼粒细胞性白血病融合蛋白的K562细胞的影响

目的 探讨急性早幼粒细胞性白血病的特异融合蛋白PML RARα和PLZF RARα在三氧化二砷 (As2 O3 )效应中的可能作用。方法 应用逆病毒载体转染技术建立稳定表达PML RARα(KPML)、PLZF RARα(ΚPLZF)和空载体 (KV)的K5 6 2细胞克隆。通过活细胞计数、形态学观察、流式细胞仪检测细胞DNA含量和分化抗原。应用免疫荧光分析PML RARα蛋白的亚细胞分布。结果 1 0μmol/LAs2 O3 不诱导KV 细胞凋亡和分化 ,但明显抑制其生长。在KPML和KPLZF细胞 ,As2 O3 也产生相似的生长抑制效应 ,但其效应强度明显增加。经 1 0 μmol/LAs2 O3 处理 3d时 ,KV、KPML和KPLZF的生长抑制率分别为 32 %± 3%、5 7%± 4%和 5 4%± 6 %。 1 0 μmol/L的全反式维甲酸也显示对KV 细胞克隆的生长抑制 ,但其效应明显低于As2 O3 。同时 ,全反式维甲酸的生长抑制效应在KPML的表现较KV 明显(P <0 .0 5 ) ,但在KV 和KPLZF之间差异无显著意义。此外 ,在 1 0 μmol/LAs2 O3 作用 2d时 ,KV 和KPML细胞内PML/PML RARα蛋白颗粒明显减少甚至消失。结论 PML RARα和PLZF RARα蛋白明显加强As2 O3 对K5 6 2细胞的生长抑制效应。

Arsenic trioxide induces multiple myeloma cell apoptosis via disruption of mitochondrial transmembrane potentials and activation of caspase-3

OBJECTIVE: To investigate the response of multiple myeloma (MM) cells to arsenic trioxide (As2O3) and their possible mechanisms. METHODS: Two MM-derived cell lines RPMI8226 and U266 cells were used as in vitro models. Cell apoptosis was assessed by morphology, flow cytometry, and DNA gel electrophoresis. Mitochondrial transmembrane potentials (delta psi m) were evaluated by measuring cellular Rhodamine 123 staining intensity. Protein expression was analyzed using Western blot. RESULTS: Zero point one to 0.5 mumol/L As2O3 inhibited cell proliferation and 2.0 mumol/L As2O3 induced cell apoptosis, while 1.0 mumol/L As2O3 inhibited proliferation with a weak degree of apoptosis induction in RPMI8226 and U266 cell lines. As2O3-induced apoptosis was accompanied by mitochondrial transmembrane potentials (delta psi m) collapse and caspase-3 activation in the presence of intact membrane. Glutathione depleter buthionine sulfoximine enhanced, while disulfide bond-reducing agent dithiothreitol partially antagonized As2O3-induced delta psi m collapse and apoptosis in MM cells. All-trans retinoic acid (ATRA) could also induce apoptosis in RPMI8226 cells, but it did not show any cooperative effects with As2O3. CONCLUSION: As2O3 exerts apoptosis-inducing and growth-inhibiting effects on MM cells, and mitochondrium is a pivotal and common target of As2O3 for apoptosis induction.