神经酰胺对人内皮细胞凋亡及bax、bcl-2表达的影响

目的观察外源性神经酰胺(C2-ceramide)对内皮细胞凋亡及相关基因bax和bcl-2表达变化的影响。方法原代培养人脐静脉血管内皮细胞,加药组加入终浓度分别为5、12.5、25、50μmol/L的C2-ceramide,对照组加入体积分数为0.1%的无水乙醇。采用TUNEL法检测细胞凋亡,用RT-PCR、Western blot技术对bax mRNA、bcl-2mRNA及蛋白表达进行分析。结果加药组内皮细胞的凋亡阳性率显著高于对照组(P<0.05),且具有时间和剂量依赖性;加药组baxmRNA及蛋白的表达较对照组显著升高(P<0.05),bcl-2mRNA及蛋白的表达较对照组则显著降低(P<0.05)。结论外源性神经酰胺通过上调bax及下调bcl-2表达水平,改变bax/bcl-2值,从而诱导内皮细胞凋亡。

神经酰胺上调bax表达诱导人内皮细胞凋亡

目的观察外源性神经酰胺(C2-ceramide)对内皮细胞凋亡及相关基因bax表达变化的影响。方法原代培养人脐静脉血管内皮细胞,用不同浓度的ceramide干预内皮细胞24h,并用同一浓度的ceramide作用内皮细胞不同时间后,采用TUNEL法检测细胞凋亡,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot技术对bax mRNA及蛋白表达分析。结果神经酰胺处理组内皮细胞的凋亡阳性率显著高于对照组(P<0.05),且具有时间和剂量依赖性;对照组和5、12.5、25、50μmol/L神经酰胺处理24h后,各组细胞凋亡率随干预剂量的加大逐渐上升;终浓度25μmol/L的神经酰胺处理6、24、48h后,细胞凋亡率随时间延长而逐渐升高;神经酰胺处理组bax mRNA及蛋白的表达较对照组显著升高(P<0.01～0.05)。结论外源性神经酰胺能通过上调bax表达诱导内皮细胞凋亡。

曲美他嗪在老年慢性心力衰竭患者中的临床应用

目的探讨曲美他嗪治疗老年慢性心力衰竭(CHF)的临床疗效及安全性。方法 90例老年慢性心力衰竭患者,随机分为治疗组和对照组,各45例。两组均给予常规药物治疗,在此基础上治疗组加服曲美他嗪。治疗6个月后,观察并比较两组患者临床疗效、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)及药物不良反应等。结果治疗6个月后,治疗组总有效率为86.7%,对照组为63.7%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗前两组LVEDD、LVEF比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后治疗组LVEDD、LVEF均优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论曲美他嗪治疗老年慢性心力衰竭的临床效果显著,可以有效改善患者的心功能,降低不良反应,值得临床推广。

新型口服抗凝药在老年非瓣膜性房颤患者中的临床应用

目的探讨传统口服抗凝药华法林和新型口服抗凝药利伐沙班在老年非瓣膜性心房颤动(房颤)患者中的安全性。方法 90例房颤患者,按药物应用类型分为常规组和新型组,每组45例。两组患者均给予基础治疗,常规组采用口服华法林治疗,新型组采用口服利伐沙班治疗。观察比较两组患者的栓塞事件、出血事件发生情况。结果新型组患者的栓塞事件发生率4.44%(2/45)和出血事件发生率0(0/45)均明显低于常规组的22.22%(10/45)、8.89%(4/45),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论新型口服抗凝药利伐沙班在老年非瓣膜性房颤患者中的应用效果显著,不良反应发生率更低,值得临床推广。

神经酰胺在血管紧张素Ⅱ诱导的内皮细胞凋亡中的作用

目的探讨神经酰胺(CE)是否介导血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的内皮细胞(EC)凋亡。方法体外培养脐静脉EC,分别用血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)拮抗剂氯沙坦、血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)拮抗剂PD123319、CE合成酶抑制剂烟曲霉素B1(FB1)预处理细胞,再加入AngⅡ24h后与对照组比较观察细胞凋亡情况;用高效液相色谱(HPLC)检测上述各处理组细胞内CE浓度的变化。结果PD123319和FB1明显减少AngⅡ诱导的EC凋亡(P<0.05),氯沙坦反而增加AngⅡ诱导的EC凋亡(P<0.05);HPLC显示PD123319组和FB1组抑制了CE的合成。结论AngⅡ通过AT2诱导EC凋亡,AT2可以促发CE含量增加。

奥扎格雷钠联合用药治疗老年急性脑梗死效果及安全性评价

目的评价奥扎格雷钠联合桂哌齐特治疗老年人急性脑梗死的效果及安全性。方法将平均85.1岁的急性脑梗死患者82例随机分为治疗组(39例)和对照组(43例)。两组均予常规治疗,在此基础上,治疗组予奥扎格雷钠注射液联合桂哌齐特注射液静脉滴注,对照组予桂哌齐特注射液联合川芎嗪注射液静脉滴注;两组疗程均为14 d,观察两组治疗前后临床疗效(神经功能缺损程度改变)。结果治疗组总有效率为92.3%,对照组为76.7%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论奥扎格雷钠联合桂哌齐特治疗老年人急性脑梗死安全、有效。

血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞凋亡

目的探讨AngⅡ诱导人血管内皮细胞Ⅱ凋亡的作用及其机制。方法原代培养人脐静脉血管内皮细胞,用不同浓度AngⅡ及神经酰胺合成酶抑制剂烟曲霉素B1(fumonisin B1,FB1)处理细胞,采用TUNEL法检测细胞凋亡,RTPCR、Western blot技术对bax mRNA及蛋白进行表达分析。结果AngⅡ处理组内皮细胞的凋亡阳性率显著高于对照组(P<0.05)且具有时间和剂量依赖性,对照组和10-7、10-6、10-5mol/L AngⅡ处理24h后各组细胞凋亡率分别为(2.2±1.1)%、(6.0±1.2)%、(17.5±2.3)%、(27.4±4.5)%;终浓度10-6mol/L的AngⅡ处理6、24、48h后细胞凋亡率分别为(6.2±2.3)%、(15.5±3.1)%、(21.6±2.5)%;FB1能显著抑制AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡(P<0.05),AngⅡ处理组bax mRNA及蛋白的表达较对照组显著升高(P<0.05),FB1组bax mRNA和蛋白表达较对照组没有显著变化(P>0.05)。结论AngⅡ通过神经酰胺及bax诱导细胞凋亡,其中bax作为神经酰胺的下游基因起作用。

bcl-2在神经酰胺致人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用

目的研究bcl-2在神经酰胺诱导人脐静脉内皮细胞凋亡过程中的作用。方法原代培养人脐静脉内皮细胞,用不同浓度神经酰胺进行诱导并观察bcl-2的表达及细胞凋亡情况,采用逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法测定bcl-2mRNA和蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果神经酰胺以剂量依赖性诱导人脐静脉内皮细胞凋亡,对照组和5、12.5、25及50μmol/L神经酰胺处理24h后各组细胞凋亡率分别为2.13%±0.12%、13.24%±1.32%、29.67%±2.32%、34.43%±3.36%及38.56%±2.21%,神经酰胺处理组bcl-2mRNA及蛋白的表达较对照组显著降低(P<0.05)。结论神经酰胺在诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞时,bcl-2表达减低,从而引起细胞凋亡。

AngⅡ诱导内皮细胞凋亡及其受体拮抗剂的干预作用

目的:研究AngⅡ及其受体拮抗剂在内皮细胞凋亡中的作用。方法:体外培养脐静脉内皮细胞,用不同浓度的AngⅡ干预内皮细胞24h,并用同一浓度的AngⅡ作用内皮细胞不同时间后,TUNEL法检测细胞凋亡指数;分别用血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)拮抗剂氯沙坦(Losartan)、血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)拮抗剂PD123319预处理细胞,再加入AngⅡ,24h后与对照组比较观察细胞凋亡情况。结果:AngⅡ呈剂量和时间依赖性诱导内皮细胞的凋亡;PD123319组诱导内皮细胞的凋亡与对照组无明显差别(P>0.05),Losartan组诱导内皮细胞的凋亡与对照组有显著性差异(P<0.05)。结论:AngⅡ能诱导内皮细胞的凋亡,并通过AT2起作用;PD123319能抑制AngⅡ诱导凋亡的作用。

神经酰胺诱导内皮细胞凋亡机制的研究

目的探讨p53、Fas在外源性神经酰胺(C2-ceramide)诱导内皮细胞凋亡中的作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),以不同浓度的C2-ceramide处理后,用TUNEL染色法检测细胞的凋亡。用p53的抑制剂PFT-α和Fas的抑制剂Fas相关磷酸酶-1(FAP-1)预处理细胞后,加入C2-ceramide,与对照组比较观察Fas的表达和细胞凋亡指数的变化。结果C2-ceramide可剂量依赖性地诱导内皮细胞凋亡。FAP-1可抑制C2-ceramide诱导的内皮细胞凋亡;PFT-α不能抑制C2-ceramide诱导的内皮细胞凋亡。结论神经酰胺能够诱导内皮细胞凋亡,其作用机制可能是通过Fas途径而非通过p53途径。

p53在神经酰胺诱导内皮细胞凋亡中的作用

目的:探讨p53在外源性神经酰胺(C2-ceramide)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用。方法:体外培养脐静脉内皮细胞,用不同浓度的C2-ceramide进行处理,Tunel检测细胞凋亡;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测p53的表达;并用p53的抑制剂PFT-α(pifithrin alpha,PFT-α)预处理细胞,再加入C2-ceramide与对照组比较观察细胞凋亡指数。结果:C2-ceramide呈剂量依赖性诱导内皮细胞凋亡;p53的表达随着C2-ceramide浓度的增加呈现降低的趋势;PFT-α不能抑制C2-ceramide诱导的凋亡。结论:神经酰胺能诱导内皮细胞的凋亡,可能不依赖于p53途径。

老年多器官功能不全综合征患者免疫功能探讨

目的:检测老年多器官功能不全综合征(MODSE)患者的细胞免疫、体液免疫指标,了解其免疫水平及其与疾病的关系。方法:将老年患者根据诊断分为MODSE组(46例)和对照组(40例),用双/三色直接免疫荧光标记全血溶血法检测细胞免疫CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+、CD4^+/CD8^+、NK、CIK指标;用免疫比浊法检测体液免疫C3,C4,CH50,IgG,IgA,IgM指标。结果:两组患者CD3^+,NK,IgA差异有统计学意义(P<0.05)。两组免疫功能比较有明显差异:对照组CD3^+高,MODSE组NK、IgA高。结论:MODSE组患者存在免疫功能低下。

神经酰胺和p53在AngⅡ诱导内皮细胞凋亡过程中的作用

目的探讨AmgⅡ诱导内皮细胞凋亡过程中神经酰胺和p53的作用及相互关系。方法体外培养脐静脉内皮细胞,分别用血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)拮抗剂氯沙坦、血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)拮抗剂PD123319、神经酰胺合成酶抑制剂烟曲霉素B1 (FB1)、p53抑制剂PFT-α预处理细胞,再加入AngⅡ,24h后与对照组(用双蒸水预处理细胞)比较,观察细胞凋亡情况,RT-PCR和Western blot检测各组p53表达情况。结果PD123319和FB1能显著抑制AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡,而氯沙坦和PFT-α则不能抑制AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡。FB1和PFT-α可以抑制p53的mRNA和蛋白表达。结论AngⅡ通过AT2受体和神经酰胺诱导内皮细胞凋亡。神经酰胺在AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡过程中起重要作用,且可能经过p53诱导凋亡。

神经酰胺在Ang Ⅱ致人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用

目的研究神经酰胺在AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞凋亡过程中的作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,采用不同浓度的AngⅡ和FB1干预血管内皮细胞,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果AngⅡ处理组血管内皮细胞的阳性凋亡率显著高于对照组(P<0.05)且具有时间和剂量依赖性,对照组和终浓度分别为10^(-7)mol/L、10^(-6)mol/L、10^(-5)mol/L的AngⅡ处理血管内皮细胞24h后各组细胞凋亡率分别为(2.3±1.0)%、(6.2±1.1)%、(16.9±2.2)%、(28.8±4.4)%;终浓度为10^(-6)mol/L的AngⅡ处理血管内皮细胞6 h、24 h、48 h后细胞凋亡率分别为(6.4±2.4)%、(14.4±3.3)%、(22.7±2.8)%;FB1处理组结果显示血管内皮细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。结论AngⅡ能诱导细胞凋亡,神经酰胺可能是其途径之一。

沙库巴曲缬沙坦联合美托洛尔治疗慢性心力衰竭的临床观察

目的观察沙库巴曲缬沙坦联合美托洛尔缓释片治疗慢性心力衰竭(CHF)的临床效果。方法选取2017年11月~2019年2月于解放军联勤保障部队第九二〇医院就诊的119例CHF患者,根据药物治疗方案不同分成对照组(59例)和治疗组(60例)。对照组患者口服琥珀酸美托洛尔缓释片;治疗组患者在对照组基础上加用沙库巴曲缬沙坦钠片。治疗8周后比较两组疗效、6 min步行距离、明尼苏达生活量表(MLHFQ)评分、血清标志物N端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、血清细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及醛固酮(ALD)、心功能指标左室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(LVFS)及不良反应。结果连续治疗8周后治疗组疗效、6 min步行距离、LVEF、LVFS高于对照组(P<0.01),而NT-proBNP、ICAM-1、ALD、MLHFQ评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论沙库巴曲缬沙坦联合美托洛尔缓释片治疗CHF效果显著且无明显不良反应。

比索洛尔联合曲美他嗪治疗老年慢性阻塞性肺疾病合并心力衰竭的临床观察

目的观察比索洛尔联合曲美他嗪治疗老年慢性阻塞性肺疾病COPD合并慢性心力衰竭CHF的临床效果。方法将90例COPD(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)合并CHF(chronic heart failure,CHF)患者根据药物治疗方案不同分成对照组(45例)和治疗组(45例)。对照组给予吸氧、减轻心脏负荷等常规治疗方案;治疗组同时加用比索洛尔与曲美他嗪联合治疗。治疗16 w后比较两组疗效、6 min步行距离、左室射血分数(LVEF)及短轴缩短率(LVFS)。结果治疗组疗效、6 min步行距离、LVEF、LVFS高于对照组(P<0.01)。结论比索洛尔联合曲美他嗪治疗老年COPD合并CHF安全有效,可有效改善老年患者心功能。

大剂量乙酰半胱氨酸对高龄患者慢性阻塞性肺病合并肺间质纤维化急性加重期的干预作用及机制初探

目的:观察大剂量乙酰半胱氨酸(NAC)对高龄患者慢性阻塞性肺病(COPD)合并肺间质纤维化(PIF)急性加重期的干预作用,并对干预机制进行初步探讨。方法:年龄大于80岁COPD合并PIF患者18例,分为对照组(8例)和观察组(10例),对照组给予常规治疗,观察组在对照组治疗基础上给予口服乙酰半胱氨酸颗粒600 mg/次,3次/d,连用30天,观察两组治疗前后临床症状、肺功能指标(FVC、FEV1、FEV1/FVC)、动脉血氧分压(PaO2)、血液中细胞因子(IL-2和TNF-α)和影像学的变化。结果:观察组治疗总有效率和细菌培养转阴率显著升高(P<0.05);两组治疗后FVC、FEV1、FEV1/FVC、PaO2均较治疗前显著上升(P<0.05),血液中IL-2和TNF-α较治疗前显著下降(P<0.05);组间比较存在显著性差异(P<0.05);观察组治疗后胸部CT见感染明显控制。结论:在常规治疗基础上合用大剂量NAC可以有效治疗急性加重期COPD合并PIF的老年患者,机制可能与抑制炎性因子表达、减少细菌在呼吸道内的附着有关。

鼠双微基因2在血管紧张素Ⅱ和神经酰胺致内皮细胞凋亡中作用的实验研究

目的探讨神经酰胺和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致内皮细胞凋亡过程中鼠双微基因2(mdm2)的变化及其作用。方法体外培养脐静脉内皮细胞,分别用 AngⅡ1型受体拮抗剂氯沙坦、AngⅡ2型受体拮抗剂 PD123319、神经酰胺合成酶抑制剂烟曲霉素 B1(FB1)预处理细胞,再加入AngⅡ与双蒸水对照组比较观察细胞凋亡情况及 mdm2 mRNA 和蛋白的表达,并用不同浓度的 C2-神经酰胺进行处理,RT-PCR 和 Western blot 检测 mdm2的 mRNA 和蛋白表达及细胞凋亡的情况。结果PD123319组和 FB1组抑制了 AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡,其凋亡指数明显下降(P<0.05),而与对照组相比差异元统计学意义,相反氯沙坦组凋亡指数较对照组显著增加(P<0.05),FB1组抑制了mdm2的表达。C2-神经酰胺呈剂量依赖性诱导内皮细胞凋亡,mdm2的表达随着 C2-神经酰胺浓度的增加呈现降低的趋势。结论 AngⅡ诱导内皮细胞凋亡通过 AT2受体和神经酰胺起作用,AngⅡ和神经酰胺可能是通过抑制 mdm2来诱导凋亡的。