多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性研究

目的了解多重耐药铜绿假单胞菌的耐药机制,为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法采用K-B法进行常规药敏试验,筛选出50株多重耐药铜绿假单胞菌,用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶,用PCR检测各种相关的耐药基因。结果50株多重耐药铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)2株(4%)、产AmpC酶20株(40%),11株同时产ESBLs和AmpC酶(22%),耐药基因检测中共有8种基因阳性,其中阳性率较高的为CTX(56%)、外膜孔蛋白OprD(60%)、aac(6′)-Ⅱ(60%)。结论多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmpC酶为主,基因型以CTX阳性率较高,耐亚胺培南主要为外膜孔蛋白缺失,同时已获得较多的氨基糖苷类修饰酶基因及耐消毒剂基因,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗菌药物,以减少耐药菌株产生和控制医院感染。

临床标本的真菌培养和药敏分析

目的 研究本院真菌感染现状与耐药情况。方法 各种临床标本经分离培养 ,用ATBExpression细菌鉴定仪鉴定 ,采用ATBFUNGUS进行药敏试验。结果 13 974份临床标本共分离真菌 15 35株 ,检出率为10 9%;分离真菌 15种 ,白色念珠菌仍为主要菌种 ;各种真菌对 6种抗真菌药物均出现了不同程度的耐药。结论 真菌感染在临床上呈上升趋势且产生了耐药株 ,临床微生物实验室不仅应做好真菌的分离培养鉴定 ,而且要对分离的菌株进行药敏试验 ,以指导临床合理选择抗真菌药物。

下呼吸道标本的细菌分布及耐药性分析

目的 了解本院下呼吸道标本的细菌分布及耐药情况。方法 标本经分离培养 ,用ATBExpression细菌鉴定仪鉴定 ,用相应的ATB药敏试条进行药敏试验。结果 4 5 94份下呼吸道标本分离细菌 2 5 94株 ,G-杆菌中铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌为主要菌种 ,除嗜麦芽寡养单胞菌外 ,对亚胺培南的敏感性最高 ;G+ 球菌以金黄色葡萄球菌为主 ,MRSA的检出率为 71.9% ,肠球菌的分离呈增高趋势 ,耐万古霉素的肠球菌为 4 .4 %。结论 下呼吸道标本的细菌种类及耐药性发生变化 ,临床医生在治疗下呼吸道感染时应根据细菌检验报告合理选择抗生素 ,避免盲目的经验用药 ,减少或减缓细菌耐药的产生。

革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶检测与耐药性分析

目的了解本院革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的产生率及耐药性。方法按照2000年NCCLS推荐的纸片扩散初筛法和确认法检测ESBLs及K-B法进行药敏试验。结果8种革兰阴性杆菌ESBLs的检出率以肺炎克雷伯菌最高(43.4%);检测ESBLs的药物中CTX和CTX/CA的阳性率高于其他药物,分别为89.6%(120/134)、91.8%(123/134);产ESBLs菌株对各种抗生素的耐药率明显高于非ESBLs菌株,亚胺培南仍然未出现耐药现象。结论临床微生物实验室应加强革兰阴性杆菌ESBLs与耐药性检测,进一步探讨细菌的耐药机制,指导临床合理用药,减少或减缓细菌耐药的产生。

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶检测与分析

目的了解本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶产生情况,为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法用K-B法进行常规药敏试验,筛选出50株多重耐药铜绿假单胞菌,用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶,同时用2-巯基丙酸抑制试验检测金属酶。结果50株多重耐药铜绿假单胞菌中产ESBLs2株(4%)、产AmpC酶20株(40%),11株同时产ESBLs和AmpC酶(22%),金属酶筛选出8株(16%)阳性。结论本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmpC酶为主,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗生素,以减少耐药菌株产生和控制医院感染。

HBsAg阳性患者手术期间HBV-DNA的变化及其传染性分析

目的探讨HBsAg阳性患者经外科手术干预前后HBV-DNA的变化及其院内传染性的分析。方法采用时间分辨免疫荧光分析法,检测58例HBsAg阳性手术患者术前血清HBV-M;采用实时荧光定量PCR检测HBsAg阳性患者术前和术后第3、7天血清及术后胃引流液、腹腔引流液及医务人员接触HBsAg阳性手术患者后手指采样的HBV-DNA。结果58例HBsAg阳性手术患者中27例检测到HBV-DNA,阳性率为46.1%,经外科手术干预后第3、7天,血清HBV-DNA拷贝数比术前显著增高差异有统计学意义(P<0.01);胃引流液HBV-DNA的阳性率为31.0%,腹腔引流液为48.3%;医务人员手指采样HBV-DNA的阳性率为8.6%,其中医生6.7%,护士8.2%,护工12.0%。结论HBsAg阳性手术患者体内存在乙型肝炎病毒的活动,外科手术的干预可引起病毒复制增强,临床应重视HBV-DNA的监测,进行必要的抗病毒治疗;手术干预可使其传染性和传播途径增加,医务人员应重视防护和消毒,避免乙型肝炎病毒的院内传播。

湖州地区伤寒杆菌耐药性监测及噬菌体分型

目的 了解湖州地区伤寒杆菌对抗菌药物的耐药状况、噬菌体型别分布及对β-内酰胺类抗生素的耐药机制。 方法 对1987～1999年湖州市中心医院和湖州市防疫站分离的766株伤寒杆菌进行了耐药性监测 ,对1987～1988年 (33株 )和1998～1999年 (43株 )伤寒杆菌进行噬菌体分型及对1999年30株伤寒杆菌进行超广谱β-内酰胺酶检测。结果 湖州地区1998～1999年与1987～1988年流行的伤寒杆菌噬菌体型别大体相同 ,主要为M1、A、E1、D1 、D7 型 ;但M1 型菌检出率明显下降 (χ2=5.20,P<0.05) ,并出现两种新的型别 (D9 型及M4 型 )。伤寒杆菌对氯霉素的敏感率从1990年起已恢复至90%以上 ,但新近发现的5株多重耐药伤寒杆菌对包括第三代头孢菌素在内的多种抗菌药物均有不同程度的耐药 ,均为M1 型菌株 ,产超广谱β-内酰胺酶。 结论 湖州地区伤寒杆菌流行菌株主要为M1 、A、E1 、D1、D7 型 ,氯霉素仍为治疗伤寒的敏感药物。M1 型菌株与多重耐药性密切相关 ,其对 β-内酰胺酶类抗生素的耐药机制可能为产生超广谱β-内酰胺酶。

真菌(1,3)-β-D-葡聚糖检测在早期诊断ICU肺侵袭性真菌感染中的临床价值

目的探讨真菌(1,3)-β-D-葡聚糖检测(G试验)在早期诊断ICU肺侵袭性真菌感染(IFI)中的临床价值。方法选择2014年1月～2017年1月入住浙江省湖州市中心医院呼吸重症监护病房(RICU)和急诊重症监护病房(EICU)108例怀疑为肺部侵袭性真菌感染患者,根据出院时临床诊断分为IFI组(42例)和非IFI组(66例),使用G试验检测两组患者入院当天的真菌(1,3)-β-D-葡聚糖浓度,并与传统的真菌培养方法比较。结果 IFI组G试验值为(78.7±32.1)pg/mL,明显高于非IFI组(9.6±4.2)pg/mL,差异有统计学意义(P<0.01);IFI组患者中,G试验阳性率高达81.0%,高于真菌培养检验方法(66.7%),但差异无统计学意义(P>0.05);血浆G试验诊断IFI的灵敏度为81.0%、特异度为92.4%、阳性预测值为87.1%、阴性预测值为88.4%,而真菌培养方法的灵敏度为66.7%、特异度为80.3%、阳性预测值为68.3%、阴性预测值为79.1%。结论血浆(1,3)-β-D-葡聚糖检测(G试验)具有快速、准确、简易等特点,在ICU肺IFI早期诊断中具有较突出的临床价值。

ACE基因多态性与冠心病及高血压的关系

为探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性与冠心病(CHD)、原发性高血压(HTN)的关系。我们用聚合酶链反应(PCR)方法检测304例CHD及HTN患者和102名正常人的ACE基因I/D多态性,同时测定血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平。结果示ACE基因I/D多态中DD基因型及D等位基因频率在CHD)及伴CHD)的HTN中显著增高(P<0.001)。而在不伴CHD的HTN中增高不明显(P>0.05)。CHD患者血浆AngⅡ水平显著高于正常对照者,CHD中DD型患者的血浆AngⅡ水平与Ⅱ型患者比较差异显著(P<0.01),而HTN组血浆AngⅡ水平与正常对照组相比无差异。提示ACE基因DD型可能是CHD发病的独立危险因素,而与HTN无关。在高危人群中进行ACE基因调查,有助于冠心病的早期诊断和治疗。

不同贮存时间红细胞悬液蛋白质组学分析

目的比较不同贮存时间红细胞悬液蛋白质之间的变化,阐明库存红细胞损伤的机制。方法采用双向凝胶电泳(2-DE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测d 1、d 12、d 23和d 35血库贮存红细胞悬液中蛋白质水平的变化,寻找随着贮存时间延长发生变化的蛋白质点。结果通过比较分析3名健康献血者在d 1 d、d 12、d 23和d 35贮存在4℃冰箱的红细胞悬液的蛋白质表达谱。发现在贮存的d 12与d 1相比增加了14个蛋白质点并达到高峰,其中有7种蛋白质,在以后的d 23和d 35则逐渐降低到一个稳定的水平。结论通过血清蛋白质组学技术,成功鉴定了7种蛋白质与红细胞悬液贮存时间延长有关的差异蛋白质点,为减少红细胞损伤延长红细胞寿命提供重要的理论依据和途径。

乙型肝炎病毒前C区基因变异与肝纤维化的关系

为探讨乙型肝炎病毒前c区基因变异与肝纤维化程度的关系,利用错配聚合酶链反应——限制性片段长度多态性分析检测乙型肝炎病毒前C区1896位点突变,同时联合检测乙型肝炎患者血清透明质酸、层粘连素、Ⅳ型胶原水平,结果183例乙型肝炎患者检出前C区变异85例,急性乙型肝炎无变异,各类慢性乙型肝炎变异率(分别为51.5％、52.8％、57.1％、59.3％、54.8％)尤显著性差异(P>0.05)。而完全变异和变异株优势 变异者慢性乙型肝炎重度和慢性重型肝炎患者明显高于慢性乙型肝炎轻度患者(均P<0.05)。完全变异和变异株优势变异者肝纤维化3项血清学指标明显高于野生株者(均P<0.01)。提示慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒前C区基因变异普遍存在,且变异程度与病情和肝纤维化程度有关。

临床输血路径的信息化管理及效果分析

文章对医院临床用血管理信息化改进前后状况进行了对比分析,提出加强监管,倡导科学、合理开展临床用血,保护有限的血液资源,保障临床用血安全和医疗质量,实现科学、合理用血。

微小RNA差异表达谱在原发性干燥综合征的应用

目的探索原发性干燥综合征(primary Sjgren’s syndrome,p SS)患者血清中相关的差异表达微小RNA(microRNA,miRNA)。方法健康对照组和pSS组各选1例进行芯片分析,筛选出p SS患者与健康对照组表达差异有统计学意义的miRNA;选取6例健康对照和6例pSS患者治疗前后的血清,采用荧光定量法对差异表达的miRNA进行验证;通过Target Scan、miRanda以PicTar预测miRNA作用的靶基因并分析相关信号通路的生物学信息。结果共发现53条miRNA表达差异有统计学意义,选取22条差异倍数>1.5倍的miRNA,p SS治疗前组与对照组比较miR-146a-5p、miR-4484和miR-4687-5p表达均上调(P<0.05),miR-146a-5p和miR-4687-5p验证结果与芯片一致。治疗前组和治疗后组比较,miR-146a-5p和miR-4484表达均下调(P<0.05),而miR-4687-5p表达依然上调。靶基因预测结果显示p SS中miRNA可能通过Notch信号通路和花生四烯酸以及溶酶体等代谢发挥信号转导作用。结论 pSS患者与健康人群存在差异表达的miRNA,这些miRNA表达可能参与pSS疾病的发生和发展,对p SS诊断有一定价值。

泌尿系统感染病原菌分布及耐药性分析

目的:分析近二年来泌尿系统感染患者的病原菌分布及耐药性变化,为临床合理用药提供依据。方法:收集2008-2009年泌尿系统感染患者尿液标本的细菌培养和药敏结果进行统计分析研究。结果:共分离菌株1150株,其中革兰阴性杆菌580株,革兰阳性球菌299株,真菌271株。革兰阴性杆菌对碳青霉烯类抗菌药物较敏感,革兰阳性球菌对多肽类抗菌药物较敏感。结论:泌尿系感染病原菌仍以大肠埃希菌为主,真菌感染有升高的趋势,合理使用抗菌药物和严格规范无菌操作是预防医院内获得性尿路感染的重要措施。

大量输血治疗方案对严重多发伤患者凝血功能的影响

严重创伤患者伤情复杂、凶险,急诊处理十分棘手,病死率一直居高不下。输血在抢救该类患者的过程中至关重要。以往的复苏策略是先单纯使用浓缩红细胞和晶体液,在输注一定数量的红细胞后才开始补充血浆、血小板和冷沉淀等凝血底物。其导致的创伤性凝血病是引起该类患者死亡的主要原因。

8055株细菌耐药性检测分析

随着抗生素的大量运用,细菌耐药和耐药细菌感染已成为全球面临的重大挑战,开展细菌耐药性检测工作是WHO＂控制细菌耐药性的全球策略＂[1], 因此及时准确地掌握细菌耐药性动态,了解耐药细菌的变迁,对于指导临床合理用药,并为新抗菌药物的研制提供实验室依据,具有非常重要的意义.为此,笔者对本院近两年的细菌耐药性检测结果作一总结分析,报道如下.

TaqMan PCR快速检测食品中空肠弯曲菌

目的:利用荧光定量PCR技术,建立食品中空肠弯曲菌污染的快速检测方法。方法:以空肠弯曲菌的hipO基因为靶序列,设计引物和探针,优化引物、探针浓度比和Mg2+浓度,对反应体系进行评价。并初步应用于样品的检测。结果:所建反应体系特异性、敏感性和稳定性良好。定量检测低限15cfu/ml。结论:建立了适用于食品中空肠弯曲菌污染快速检测的荧光定量PCR方法。