细小病毒非结构蛋白基因转染对胃癌细胞株细胞因子表达的影响

将可诱导表达的细小病毒非结构蛋白基因转染入人低分化胃腺癌细胞株MKN-45,该基因诱导表达后部分宿主细胞死亡,成活细胞生长特性发生显著改变,如细胞间粘附力增强,倍增时间延长,裸鼠体内成瘤能力下降。RNA斑点印迹显示非结构蛋白基因的表达能明显增加胃癌细胞白细胞介素-1α,白细胞介素-1β和白细胞介素6核因子表达,而对白细胞介素6表达无影响。提示细小病毒的抗肿瘤作用部分可能是由其非结构蛋白影响肿瘤细胞的细胞因子表达所介导的。

肿瘤及对照人群血清细小病毒H1抗体检测

细小病毒能抑制自发和诱发的肿瘤形成，具有明显的抗肿瘤作用。人群血清流行病学研究表明细小病毒AAV感染和宫颈癌的低发生率有关。本文用血凝抑制试验检测肿瘤患者和健康对照人群血清细小病毒H1抗体。结果表明，414例肿瘤患者血清中3例抗细小病毒H1抗体阳性（0．75％），对照血清420例中有21例阳性（5．0％）。肿瘤患者血清细小病毒H1抗体阳性率明显低于对照人群（P＜0．001）。提示细小病毒H1感染可能影响人群恶性肿瘤的发生。

血红蛋白氧化酶诱导剂Hemin在乙酸诱导大鼠胃溃疡中的作用

目的众多研究表明血红蛋白氧化酶(Heme Oxygenase,HO)具有内源性组织细胞保护作用,诱导 HO 表达能减轻和限制炎症引起的组织损伤.本研究目的旨在研究 HO 诱导剂 Hemin在乙酸诱导大鼠胃溃疡模型中所起的作用及可能的机制.方法用 RT-PCR,Western blotting 分别检测乙酸诱导大鼠胃溃疡1,3,7 d 后胃粘膜中两种诱导型酶,HO-1和一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达.以溃疡面积判断胃粘膜损伤程度,研究 HO-1诱导剂 Hemin 对乙酸诱导胃溃疡形成过程中胃粘膜损伤的影响,同时研究 Hemin 对胃粘膜iNOS 表达及活性的影响以探讨其可能的作用机制.结果乙酸诱导大鼠胃溃疡后,胃粘膜 HO-1和 iNOS 表达明显增强.HO 诱导剂 Hemin 能显著增强 HO-1 mRNA 和蛋白质表达,但溃疡面积反而增大,炎症加重.处理组大鼠溃疡面积1d 为(77±5)mm^2,明显大于对照的(51±3)mm^2(P<0.01,n=10);3d 为(53±4)mm^2,明显大于对照(36±3)mm^2(P<0.01,n=10).同时 Hemin 能显著增强胃粘膜 iNOS 的表达及 iNOS 的活性,溃疡诱导1 d Hemin 组 iNOS 的活性为5.3±0.3,对照3.1±0.3(P<0.01,n=10);3 d Hemin 组5.7±0.5,对照3.8±0.4(P<0.01,n=10,单位为 pmol[~3H]瓜氨酸·min^(-1)·g蛋白^(-1)).结论在乙酸诱导的胃溃疡模型中,HO-1表达增加对胃粘膜可能存在一定程度的保护作用,但这一保护作用不足于抵消其他损害因素如 NO 过度产生所导致的粘膜损伤.HO 代谢产物可能尚具有双向作用,即生理性产生增加具有粘膜保护作用,过度产生可能存在细胞毒性作用.

吲哚美辛对乙酸诱导大鼠胃溃疡形成和愈合的影响

目的 利用乙酸诱导大鼠胃溃疡模型研究吲哚美辛对化学诱导胃溃疡形成和愈合的影响 ,探讨其可能机制。方法 雄性SD大鼠 ,体重 16 0～ 180 g。分两组 ,即单纯乙酸诱导胃溃疡作为对照组和乙酸诱导胃溃疡加吲哚美辛处理组 ,各时间点每组均 8只。乙酸诱导胃溃疡后 1、3和 7d用RT PCR和Westernblotting分别检测胃黏膜中环氧合酶 (COX)和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的表达。用ELISA测定胃黏膜中PGE2 量反映COX活性。同时研究吲哚美辛对iNOS表达、活性及胃黏膜损伤的影响 ,以溃疡面积来评估胃黏膜损伤程度。结果 RT PCR结果显示乙酸诱导大鼠胃溃疡后 ,COX2 mRNA表达明显升高 ;以溃疡基底部为明显 ,3d最高 ,7d下降。胃黏膜PGE2 合成也明显增高。吲哚美辛能抑制胃黏膜PGE2 合成 ,处理组溃疡面积 1d时为 (5 2 .6± 6 .1)mm2 ,小于对照组的 (71.8± 5 .8)mm2 (P <0 .0 5 ) ,且周围充血水肿较轻 ;3d时两组溃疡大小无差异 ,但吲哚美辛处理组溃疡基底部厚度为 (11± 0 .5 )mm ,薄于对照组的 (2 0± 0 .8)mm(P <0 .0 1) ;7d时吲哚美辛组溃疡面积为 (35 .4± 3.5 )mm2 ,大于对照组的 (2 4.8± 3.2 )mm2 (P <0 .0 5 )。此外吲哚美辛能降低胃黏膜iNOS的表达及活性。结论 吲哚美辛能减轻大鼠溃疡形成初期炎症反应 。

门静脉高压症的药物治疗

门静脉高压症是指由各种原因导致门静脉系统压力升高所引起的一组临床综合征．其病理生理学改变为门静脉血流受阻和门静脉血流量增加．根据病因可分为肝前性、肝内性和肝后性。最常见的病因是各种原因导致的肝硬化。门静脉高压症最常见的严重并发症为食管胃底静脉曲张破裂出血．其发病迅速、死亡率较高。目前，

Heme Oxygenase-1对乙酸诱导大鼠胃溃疡的保护作用

目的研究血红蛋白氧化酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)在乙酸诱导大鼠胃溃疡模型中所起的作用及可能的机制.方法雄性 Sprague-Dawley 大鼠,体质量160 g～180 g,每组8只,乙酸诱导大鼠胃溃疡1,3,7 d 后用 RT-PCR,Westernblotting 和免疫组织化学分别检测胃粘膜中 HO-1和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide Synthase,iNOS)的表达.同时研究 HO-1抑制剂 tin mesoporphyrin(snMP)对 iNOS 表达、活性及胃粘膜损伤的影响.结果 RT-PCR 结果显示正常大鼠胃粘膜 HO-1仅轻度表达,乙酸诱导大鼠胃溃疡后,胃粘膜内 HO-1表达明显增强.HO 抑制剂 SnMP 处理组大鼠溃疡面积1 d 为(72±6)mm^2,明显大于对照组(51±4)mm^2,(P<0.01);3 d 为(51±4)mm^2,明显大于对照组(35±4)mm^2,(P<0.01);7 d 时(27±4)mm^2和对照组(24±3)mm^2无显著差异.同时 SnMP 能显著增强胃粘膜 iNOS的表达及 iNOS 的活性,溃疡诱导1 d SnMP 组 iNOS 的活性为5.6±0.3,对照组3.2±0.3(P<0.01);3 d SnMP 组6.4±0.6,对照组4.0±0.3(P<0.01);7 d SnMP 组0.6±0.1,对照组0.5±0.1无显著差异(单位,pmol[~3H]瓜氨酸·min^(-1)·g^(-1)蛋白).结论在乙酸诱导的大鼠胃溃疡模型中,HO-1对胃粘膜具有一定的保护作用,抑制 HO-1后加重胃粘膜损伤,同时伴 iNOS表达和活性的增强.提示 HO-1的粘膜保护作用可能通过抑制iNOS 功能,减少一氧化氮产生所介导的.

转基因小鼠在肿瘤研究中的应用

将可能激发肿瘤的基因导入小鼠受精卵,已制备了许多具有癌症倾向的小鼠系。这些小鼠能使人在整体水平系统研究不同癌基因在细胞分化、增殖中的作用以及在肿瘤发生中癌基因间的协同作用。同时,这些小鼠具有对病毒和化学致癌物敏感的倾向,因而为潜在致癌原测试,治疗和预防肿瘤药物的筛选提供了很有价值的研究模型。 过去20年,用分子克隆和基因转移等手段,将癌基因导入特定细胞以研究癌基因在细胞转化过程中的作用机制,取得了可喜进展。

细小病毒非结构蛋白基因转染及表达对胃癌细胞的作用

细小病毒非结构蛋白基因转染人人低分化胃癌细胞株MKN.45后诱导其表达。研究发现该基因的表达能明显影响MKN-45细胞的生物特性。表现为部分细胞脱落死亡;存活细胞间粘附力增强;细胞倍增时间延长;细胞形态变圆、胞浆丰富,核/浆比例缩小;体外克隆形成率及裸小鼠体内成瘤能力下降。提示:1.转染的细小病毒非结构蛋白基因能在胃癌细胞内诱导表达。2.非结构蛋白基因表达对部分胃癌细胞具有直接细胞毒作用。3.该基因表达能干扰胃癌细胞生长,可能影响细胞增殖和分化过程而改变胃癌细胞的一些生长特征。

用ELISA夹心法检测尿标本中的巨细胞病毒抗原

用聚乙二醇浓缩的巨细胞病毒(CMV)的无细胞培养上清液免疫山羊,获得高效价多克隆免疫血清。经细胞干粉吸收和过QAE-Sephadex A50柱,提取其IgG,用作ELISA夹心法捕捉CMV抗原的捕捉抗体,并以CMV-IgG抗体阳性的人血清作检测抗体,可检测10_(1·)TCID50/ml培养液中的CMV抗原。用此法检测105例临床尿标本中的CMV抗原,敏感性达92.31％,特异性为87.34％,与分离病毒结果的符合率为88.57％。结合血清学试验和特异性阻断试验证明,本法特异、敏感、快速、简便。

细小病毒非结构蛋白转基因小鼠模型建立

将小鼠乳腺癌病毒启动子控制的细小病毒非结构蛋白基因(长5.7kb)氯化铯超速离心,纯化透析后用显微注射法导入C57BL/SJL F_1小鼠受精卵雄核,植入假孕母鼠输卵管,得成活小鼠15只。抽取鼠尾DNA,对其中10只小鼠作PCR和southern blot鉴定,其中4只(40％)整合有目的基因。对首建者B_6()的8只子代小鼠鉴定,3只(37.5％)整合有目的基因。说明导入的目的基因能传代。

Heme Oxygenase-1对乙酸诱导大鼠胃溃疡的保护作用

目的研究血红蛋白氧化酶-1(Hemeoxygenase-1,HO-1)在乙酸诱导大鼠胃溃疡模型中所起的作用及可能的机制.方法♂Sprague-Dawley大鼠,体质量160g～180g,每组8只,乙酸诱导大鼠胃溃疡1,3,7d后用RT-PCR,Westemblotting和免疫组织化学分别检测胃粘膜中HO-1和诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)的表达.同时研究HO-1抑制剂tinmesoporphyrin(SnMP)对iNOS表达、活性及胃粘膜损伤的影响.结果RT-PCR结果显示正常大鼠胃粘膜HO-1仅轻度表达,乙酸诱导大鼠胃溃疡后,胃粘膜内HO-1表达明显增强.HO抑制剂Sn-MP处理组大鼠溃疡面积1d为(72±6)mm2,明显大于对照(51±4)mm2,(P<0.01);3d为(51±4)mm2,明显大于对照(35±4)mm2,(P<0.01),7d时(27±4)mm2和对照(24±3)mm2无显著差异,同时Sn-MP能显著增强胃粘膜iNOS的表达及iNOS的活性,溃疡诱导1dSn-MP组iNOS的活性为5.6±0.3,对照3.2±0.3(P<0.01);3dSn-MP组6.4±0.6,对照4.0±0.3(P<0.01);7dSn-MP组0.6±0.1,对照0.5±0.1无显著差异(单位,pmol[3H])瓜氨酸.min-1@g-1蛋白).结论在乙酸诱导的大鼠胃溃疡模型中,HO-1对胃粘膜具有一定的保护作用,抑制HO-1后加重胃粘膜损伤,同时伴iNOS表达和活性的增强.提示HO-1的粘膜保护作用可能通过抑制iNOS功能,减少一氧化氮产生所介导的.

乙型肝炎肝硬化抗病毒治疗研究进展

慢性乙肝病毒感染是全世界主要的公共卫生问题之一,每年有约3%的慢性乙型肝炎患者发展为肝硬化。若无有效的抗病毒治疗手段,这些乙肝患者会发展为失代偿期肝硬化或肝细胞癌。对于肝硬化患者,干扰素(interferon,IFN)和核苷类似物[nucleos(t)ide analogues,NUCs]是重要的抗病毒药物。IFN能抑制乙肝病毒复制并调节免疫功能,但不良反应较大,仅可用于情况较好的代偿期肝硬化患者;NUCs包括拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦、替比夫定及替诺福韦酯,能够抑制病毒复制,减少肝硬化患者远期并发症的发生,不良反应小但容易发生病毒耐药。本文对乙肝肝硬化的抗病毒治疗新进展作一综述。

磁性聚合物微球研究进展

磁性聚合物微球作为一种新型功能材料,在许多领域尤其是生物医药、生物工程等方面具有广阔的应用前景。本文综述了近年来磁性聚合物微球的制备及应用等方面的最新进展。

原发性小肠肿瘤93例临床分析

目的 探讨小肠肿瘤类型、临床特点及其诊断。方法 回顾性病例分析。结果 小肠良性肿瘤中以平滑肌瘤为多 ,占 12 / 17;恶性肿瘤中以腺癌多见 ,占 45 / 76。小肠肿瘤可表现为消化道出血、腹痛、腹块、发热、黄疸等。上消化道钡餐 (GI)检查 2 8例 ,2 1例阳性 ;9例行动脉造影 ,手术证实病变部位与造影一致。结论 动脉造影对小肠肿瘤有定性定位诊断价值 ,逆行胰胆管造影 (ERCP)。

聚合物胶束作为药物载体的研究进展

聚合物胶束作为药物载体具有其独特的优势。本文综述了形成聚合物胶束的两亲性共聚物的组成、聚合物胶束的形成、形态以及近些年来作为药物载体的研究进展。

壳聚糖-聚天冬氨酸-5氟尿嘧啶纳米的小鼠体内药动学

目的 5-氟尿嘧啶（5-Fluorouracil，5-FU）原药及其壳聚糖（chitosan，CS）-聚天冬氨酸（polyaspartic acid，Pasp）纳米粒子小鼠灌胃后血药浓度曲线及其药代动力学初步研究。方法同性健康昆明小鼠分为3组，分别予5-FU原药及其2种CS-Pasp纳米粒子灌胃，灌胃后15min，1、2、4、6、8、12、16、24和48h10个时间点颈动脉取血，高效液相色谱法测其血药浓度，代入3P97程序计算各样品的药代动力学参数并作比较。结果 5-FU原药组的药物峰浓度出现在灌胃后15min之内，此后血药浓度迅速降低。CS-Pasp-5FU纳米粒子1组的药物峰浓度出现在灌胃后6h左右，并在较长一段时间内（2～16h）维持较高的浓度。CS-Pasp-5FU纳米粒子2组的血药浓度曲线呈双峰形，药物峰浓度分别出现在灌胃后2h和16h左右，24h后下降。两种CS-Pasp-5FU纳米粒子的血药峰浓度（Cmax）降低，半衰期（f1/2）延长，血药浓度时间曲线下面积（AUC）明显增加。结论 CS-Pasp-5FU纳米粒子有缓释作用。

血清生化指标对慢性乙型肝炎肝纤维化及炎症程度的诊断价值

目的:研究血清生化指标对慢性乙型肝炎肝纤维化及炎症程度的诊断价值。方法:对75例慢性乙型肝炎患者进行肝功能检测,包括血清白蛋白(A)、球蛋白(G)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TB)、结合胆红素(CB)、谷氨酰转肽酶(GGT)和碱性磷酸酶(ALP)等。所有病例均行肝穿刺活组织检查,并进行肝组织炎症分级(G)及纤维化分期(S)。结果:一些血清学指标与肝组织炎症分级有一定的相关性,以ALT、AST、ALT/AST、A、G、A/G相关性最好,相关系数分别为0.247、0.273、0.424、0.646、0.423、0.579。伴随肝脏炎症及纤维化程度的增加,血清白蛋白水平趋于下降,球蛋白水平增高, 白球比下降;ALT/AST比值亦呈下降趋势。结论:血清生化指标能在一定程度上反映慢性乙型肝炎患者肝纤维化及炎症的程度,但无法划定具体的界值来判断炎症损害程度。

叶酸受体在肿瘤靶向诊断和治疗中的应用

叶酸受体(folate receptor,FR)是一种糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)偶联蛋白。除个别组织外,叶酸受体在正常组织上表达水平很低,而在许多肿瘤细胞表面过表达。叶酸受体与叶酸及其衍生物有高度的亲和性,基于这种特性,可将显像剂、治疗药物等与叶酸偶联,靶向给予肿瘤细胞,从而应用于肿瘤的影像诊断如核医学显像、核磁共振显像、荧光显像和肿瘤治疗如化疗、同位素治疗、免疫治疗、反义核苷酸治疗及基因治疗中。