长链非编码RNA CRNDE通过下调miR-136-5p表达并上调MCM5表达促进U937细胞增殖并抑制其凋亡

目的 探究长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)对U937细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及其作用机制。方法 首先通过基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库分析CRNDE在急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中的表达水平;实时荧光定量PCR检测AML细胞系miR-136-5p、 CRNDE及微小染色体维持蛋白5(MCM5)的mRNA表达水平。构建敲低CRNDE的慢病毒载体并转染U937细胞,设为敲低CRNDE组(sh-CRNDE组)和阴性对照组(sh-NC组);分别转染miR-136-5p模拟物(miR-136-5p mimic)和miR-136-5p抑制物(miR-136-5p inhibitor)对U937细胞中的miR-136-5p进行过表达和敲低,设为miR-136-5p过表达组(miR-136-5p-mimic)、过表达阴性对照组(NC-mimic)、 miR-136-5p敲低组(miR-136-5p-inhibitor)和敲低阴性对照组(NC-inhibitor)。CCK-8法和细胞计数试验检测CRNDE和miR-136-5p对细胞增殖的影响,流式细胞术检测CRNDE和miR-136-5p对细胞周期和凋亡的影响。实时荧光定量PCR检测miR-136-5p、 CRNDE及MCM5的mRNA表达,Western blot法检测MCM5、 P53、 B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白A2(cyclin A2)的蛋白表达水平。结果 CRNDE在AML患者骨髓和细胞系中高表达。敲低CRNDE可以上调miR-136-5p,抑制MCM5 mRNA和蛋白表达,抑制细胞增殖,促进凋亡并使细胞周期阻滞在G1期。过表达miR-136-5p也可抑制MCM5核酸和蛋白水平表达。而敲低miR-136-5p则可以逆转以上作用。结论 CRNDE通过下调miR-136-5p和上调MCM5表达,进而促进U937细胞增殖并抑制其凋亡。

LBL结合PBL在分子诊断学规范化培训教学中的探索

分子诊断学具有十分突出的实践性和应用性,是医学检验专业主要课程之一,然而,传统的教学模式已无法满足我国对应用型人才培养的需求。该文以四川大学华西医院规范化培训班学员为培养对象,探讨了以授课为基础的教学法(LBL)结合以问题为基础的教学法(PBL)在分子诊断教学中的应用,在课前通过设计PBL案例对知识点进行预热,在授课过程中对于基础概念仍采用传统的LBL进行教学,并对教学所涉及的实验操作进行技能考核。LBL结合PBL能激发学员学习的主观能动性,同时提升教学效率和教学质量,为培养高素质的应用型检验技术人才提供新的教学思路。

成人急性白血病患者血小板输注阈值和品种对止血效果的影响

目的探讨成人急性白血病患者血小板输注阈值和品种对止血效果的影响。方法选取施行血小板输注治疗的成人急性白血病患者126例,按照输注前患者血小板计数(PLT)分为A组(20×109/L<PLT<50×109/L)、B组(10×109/L<PLT≤20×109/L)、C组(5×109/L<PLT≤10×109/L)、D组(PLT≤5×109/L)共4组,分别统计每组输注的血小板品种、输注后止血效果,分析它们之间的相互关系。结果 C组血小板输注后止血效果明显好于其他3组(P<0.05);根据输注的血小板品种的不同作比较,D组输注手工血小板的止血效果明显好于单采血小板(P<0.05),其余3组输注手工血小板和单采血小板的止血效果差异无统计学意义(P>0.05)。结论成人急性白血病输注血小板的止血效果与输注前血小板计数及血小板品种有明显相关性。