尿胱抑素C检测方法的建立及临床应用

目的 建立尿胱抑素C的检测方法，初步探讨其临床应用价值。方法 采用胶体金免疫比浊法检测尿中胱抑素C，并作方法学评价。同时对40例正常人和135例相关疾病患者检测尿中胱抑素C、α1-微球蛋白（α1-MG）和β2-微球蛋白（β2-MG），比较3种蛋白在对照组和各疾病组的阳性率。结果 尿胱抑素C检测有较好的检测范围和良好的线性范围，总CV为5．01％，其他蛋白质对试验基本不存在影响。相对于α1-MG和β2-MG而言，尿胱抑素C有较高的灵敏度和特异性，没有明显昼夜节律。结论 尿胱抑素C是肾脏疾病时肾小管功能障碍的敏感指标。

空腹和餐后2h血糖与糖化血红蛋白关联度的研究

目的探讨空腹血糖(FPG)和餐后2h血糖(2h-PG)对糖化血红蛋白(HbA1c)的相关性,影响HbA1c水平的因素,以及HbA1c用于血糖控制效果评估的价值。方法选取健康体检者1001人作为对照组,糖代谢异常患者1422例。糖代谢异常患者分为3组分别为Ⅰ组:HbA1c<5.7%,Ⅱ组:5.7%≤HbA1c<6.5%和Ⅲ组:HbA1c≥6.5%,剔除离群值,作多重回归分析。观察相关系数、偏回归系数及标准回归系数,推断FPG和2h-PG对HbA1c的贡献度。结果随HbA1c的增高,线性回归的相关性增强,常数项随HbA1c的增加而增加。糖尿病组的相关性最好,r2为0.890。FPG对HbA1c的贡献较大,2h-PG的贡献在Ⅱ组最大,标准偏回归系数为0.265。结论影响HbA1c的主要因素是FPG,HbA1c降低主要依赖空腹血糖的降低,并且HbA1c难以反映2h-PG的控制情况,部分达到或接近HbA1c控制目标的患者可能出现过低的空腹血糖和不受控制的2h-PG,糖尿病患者的HbA1c检测不应该取代2h-PG的监控。

血清胱抑素C对2型糖尿病患者肾脏损伤早期预警能力的研究

目的探讨血清胱抑素C(Cys C)检测能否作为糖尿病患者糖尿病肾病早期检测指标。方法选择血压小于130/80mm Hg,尿清蛋白大于或等于30mg/gCr且小于300mg/gCr,肾小球滤过率(eGFR)>90mL/min的患者共135例。比较血清Cys C、尿清蛋白和eGFR之间的相关性,计算血清Cys C在该患者群的阳性率。结果该患者群中血清Cys C高于正常上限的占5.2%;低于正常下限的占3.7%。血清Cys C与尿清蛋白和eGFR结果间不存在相关性,R2分别为0.002 5和0.016 0。结论血清Cys C的诊断灵敏度不足以提示糖尿病患者的早期肾脏损伤。

尿胱抑制C在药物性肾功能损害早期诊断中的应用

目的探讨尿胱抑素C在早期检测药物导致肾脏损害中的作用,减少或预防药物原因导致的肾功能衰竭。方法在用药前选择肾功能检查正常,1周内未使用药物的患者,比较患者在使用氨基糖苷类、头孢菌素类、喹诺酮类、青霉素类、非甾体类抗炎药物及顺铂和卡托普利等药物前后1周内血CysC及尿GGT、UMA、α_1-M、TRF、IgG和CysC的差异及阳性率。结果 SCysC在除顺铂外的各组药物使用前后差异无统计学意义,P<0.01;UCysC在氨基糖苷类、顺铂和卡托普利组高于其他药物组,差异有统计学意义,P<0.01;UMA在氨基糖苷类和顺铂组高于其他组,差异有统计学意义,P<0.01;α_1-MG在顺铂组高于其他组,差异有统计学意义,P<0.01,在氨基糖苷类组高于其他组,差异有统计学意义,P<0.05;TRF在顺铂组高于其他组,差异有统计学意义,P<0.05;IgG在各组间差异无统计学意义,P>0.05;GGT在顺铂和卡托普利组高于其他组,差异有统计学意义,P<0.01。用药1周后,UCys、UMA和GGT全部阳性的患者共22例,占13.2%;UCysC、UMA和GGT有1项阳性的患者共89例,占53.3%。结论 UCysC在药物对肾脏的损害诊断中灵敏度高于其他各项指标,总灵敏度达到36.5%,UMA总灵敏度为24.6%,GGT总灵敏度为28.1%。UMA主要受肾小球滤过功能的影响,GGT为肾小管损伤指标。三者联合检测有利于尽早发现肾脏损伤并判断肾小球/肾小管源性损伤及程度,是较为理想的药物性肾脏损伤的筛选指标。

血清胱抑素C对肾功能损伤的评估

目的探讨血清胱抑素C（SCys C）在肾脏功能损伤筛查、诊断中的应用价值。方法采用胶体金免疫比浊法检测SCys C，对126例健康体检者、89例尿微量白蛋白（MA）〉30mg／gCr患者和12例肾移植患者分别根据Cockroft—Gault公式、MDRD7公式、AASK公式、Nankivell公式和Schwartz公式估算肌酐清除率（eCCr）和／或肾小球滤过率（eGFR），并对计算所得eGFR及eCCr与SCys C作相关性分析，并计算SCysC的受试者操作特征（ROC）曲线下面积。结果SCys C与Cockroft—Gault公式、MDRD7公式、AASK公式、Nankivell公式和Schwartz公式的相关系数分别为：-0．599、-0．654、-0．663、0．735和-0．701（n=227），P〈0．001，呈强负相关；在eGFR〉80mL／min、尿白蛋白／肌酐≥30mg／gCr时SCysC的ROC曲线下面积分别为0．775、0．803、0．799、0．763和0．819，P〈0．05。结论在肾脏的代偿能力尚能维持正常肾小球滤过功能时，SCys C不会明显升高，SCys C作为终末期肾病的早期诊断指标，比血清肌酐更敏感，但对于早期肾功能损伤的诊断，尿自蛋白比SCys C敏感；肾移植患者SCys C浓度明显高于健康对照者，但不能用于评估肾小球滤过功能。只有在尿白蛋白阳性情况下，用于监控肾脏损伤的进程，SCys C比血清肌酐更有价值。

血清(浆)同型半胱氨酸在肝病检测和普查中的临床应用

目的 探讨血清(浆)同型半胱氨酸在肝病时的临床应用价值。方法 根据临床诊断或金标准确诊的慢性肝病、肝硬化及原发性肝癌病例血清(浆)同型半胱氨酸浓度改变情况,评价其灵敏度和特异性,与常规检测慢性肝病项目的灵敏度和特异性进行比较。结果 显示血清(浆)同型半胱氨酸检测对于慢性肝病、肝硬化和肝癌诊断的灵敏度和特异性均高于常规方法。结论 由于有较高的灵敏度和特异性,且检测方便、费用较低,可作为临床慢性肝病的检测和大范围的慢性肝病筛选普查的一个重要指标。

超敏C-反应蛋白与血脂联合评估冠心病危险性

目的探讨超敏C-反应蛋白与血脂联合评估冠心病危险性的临床应用价值。方法对375名健康体检者、397名冠脉造影阳性组患者和23名心肌梗死组患者的血脂和hsCRP值进行分析,计算危险系数,并对健康组、冠心病组及两性间的危险系数进行统计学分析和评估。结果不同年龄组(除30～39岁和40～49岁组外)血脂、hsCRP和危险系数均有显著差异,冠脉造影阳性患者的危险系数显著高于健康对照组,但冠脉造影阳性组间危险系数无显著差异。结论危险系数与动脉粥样硬化的程度无关,健康男女间的危险系数无显著性差异。危险系数评估标准整合了引起动脉粥样硬化的内因-血浆脂蛋白和外在表现-hsCRP两方面的实验数据,反映动脉粥样硬化的临床变化及发生冠心病的实际危险性,消除了冠心病发病危险性评估的性别差异,利于临床的应用。

血清胱抑素C评估肾功能损伤的研究

目的探讨血清胱抑素C(SCys C)在肾脏功能损伤筛查、诊断中的应用价值。方法采用胶体金免疫比浊法检测SCys C,对126例健康体检者、89例尿微量白蛋白(MA)】30mg/gCr患者和12例肾移植患者分别根据Cockroft-Gault公式、MDRD7公式、AASK公式、Nankivell公式和Schwartz公式估算肌酐清除率(CCr)和/或肾小球滤过率(eGFR),并对计算所得eGFR(及CCr)与SCysC作相关性分析,并计算SCys C的ROC曲线下面积。结果SCysC与Cockroft-Gault公式、MDRD7公式、AASK公式、Nankivell公式和Schwartz公式的相关系数分别为:-0.599、-0.654、-0.663、-0.735和-0.701(n=227),P值均小于0.001,为强负相关;在eGFR】80ml/min,尿白蛋白/肌酐≥30mg/gCr时SCys C的ROC曲线下面积分别为:0.775、0.803、0.799、0.763和0.819,P【0.05。结论在肾脏的代偿能力尚能维持正常肾小球滤过功能时,SCys C不会明显升高,SCys C作为终末期肾病的早期诊断指标,比血肌酐更敏感,但对于早期肾功能损伤的诊断,尿白蛋白比SCys C敏感,肾移植患者SCys C明显高于正常对照,不能用于评估肾小球滤过功能。只有在尿白蛋白阳性情况下,用于监控肾脏损伤的进程,SCys C比血肌酐更有价值。

HbA1c体外代谢动力学研究

目的探索HbA1c与血糖浓度动态变化的规律,建立HbA1c反映血糖控制情况的理论基础。方法红细胞在不同浓度葡萄糖生理盐水中孵育,测量不同时间段不稳定型糖化血红蛋白(L-HbA1c)和稳定型糖化血红蛋白(S-HbA1c)值的变化,观察L-HbA1c(1～24h)和S-HbA1c(1～48h)浓度变化,计算两者初级反应时的生成速率,L-HbA1c合成的平衡常数及L-HbA1c与S-HbA1C转换比。结果 L-HbA1c升高程度随葡萄糖浓度的增加而增加。在4～8h达到最大,至少在8～20h内稳定,在孵育的前2h期间,L-HbA1c浓度增加呈线性,平均生成速率为0.033%/h/mmol葡萄糖/L;L-HbA1c在无葡萄糖的生理盐水中减少到孵育前浓度,平均降解速率为0.018%/h/mmol葡萄糖/L,平衡常数为1.83;S-HbA1c升高程度随葡萄糖浓度的增加呈线性增加,平均生成速率为0.003%/h/mmol葡萄糖/L;在无葡萄糖环境中,S-HbA1c浓度在24h内无显著变化。结论通过对HbA1c体外代谢动力学的初步探索,证实血糖控制较为稳定的2型糖尿病患者主要是由于餐后-空腹血糖差造成HbA1c水平差异较大而且还可推算出治疗后HbA1c的急剧变化和平均滞后时间。

尿胱抑素C检测方法的建立及初步临床应用

目的建立尿胱抑素C检测方法,初步探讨其临床应用价值。方法采用胶体金免疫比浊法检测尿中胱抑素C,并作方法学评价。同时对40例正常人群和135例相关疾病患者检测尿中胱抑素C、α1-微球蛋白和β2-微球蛋白,比较三种蛋白在对照组和各疾病组的阳性率。结果尿胱抑素C检测有较好的检测范围和良好的线性范围,总CV为5.01%,其它蛋白质对试验基本不存在影响。相对于α1-微球蛋白和β2-微球蛋白而言,有较高的灵敏度和特异性。尿胱抑素C没有明显昼夜节律。结论尿胱抑素C是肾脏疾病时肾小管功能障碍的敏感指标。标本可随机留取,有利于常规检验,并可作为体检人群的一个筛查指标。

最优化标准曲线制作介绍

用较合理的方法制作较合适的标准曲线．采用黄金分割法确定所需曲线线性范围内的定标点，迭代终点设在临界范围内，通过坐标变换使曲线达到最佳拟合位置．此法使临界范围内测定准确度增加，相关性更佳，并可估算测定值之最小非线性误差．

血清谷胱甘肽对肌酸激酶活性的影响

检测血清中加入还原型谷胱甘肽后CK活性与未加还原型谷胱甘肽CK活性之间的差异 ,分析还原型谷胱甘肽对血清肌酸激酶 (CK)活性的恢复作用。结果 ,在脑、肝脏损伤及多脏器受损时加入还原型谷胱甘肽的血清CK活性明显高于未加入还原型谷胱甘肽的血清 ,而这一现象在正常人及单纯的心肌、骨骼肌受损的情况下并不出现。结果表明 :血清中还原型谷胱甘肽含量低下使CK加速失活 ,加入还原型谷胱甘肽及NADPH则能恢复CK活性。

对氧磷脂酶1测定对慢性肝病的临床诊断价值

目的探讨血清对氧磷脂酶(PON1)活性测定对慢性肝病临床诊断的价值。方法通过与常规肝功能试验比较,包括胆碱酯酶(CHE)、总蛋白(TP)、清蛋白(Alb)、总胆红素(TBil)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酰基转移酶(GGT),用ROC曲线对慢性肝炎、肝硬化、肝癌和其他慢性肝病进行实验室试验的临床准确性评价。结果血清PON1活性在诊断慢性肝病时与GGT的准确性无显著差异,但优于其它项目(P【0.05);评价肝脏合成功能时,优于CHE和ALB(P【0.05)。结论PON1是一项较好的诊断慢性肝病的试验,对于评价肝脏合成功能具有常规肝功能检查所不能达到的准确性,PON1可作为常规肝功能的检测项目。

线性方法消除血清胆红素对胆固醇测定的干扰

用酶法测定血清总胆固醇，对各种浓度胆红素干扰测定的程度及规律进行了观察。实验提示，胆红素对胆固醇的干扰程度与其自身浓度呈直线负相关。其相关系数为-0．9951，回归系数为-3．40。根据实验，提出公式：S胆固醇实际＝S胆固醇测定＋3．4×S总胆红素（单位：mmol／L）。利用此公式可基本排除胆红素对胆固醇的干扰，对于胆固醇亚类分析准确度的提高更有意义。

四重荧光定量RT-PCR检测人感染新型甲型禽流感H7N9病毒

目的建立检测人感染新型甲型禽流感H7N9病毒的四重荧光定量RT-PCR方法。方法以人细胞RNA酶P(RNase P)基因为内参,用Primer Express3.0软件设计PCR特异性引物和探针。通过不同来源的呼吸道病毒进行特异性分析,构建质粒标准品用于分析该方法的灵敏度和重复性,并对1 896例临床标本进行回顾性检测。结果该方法检测甲型流感病毒(Flu A)、H7、N9与RNase P灵敏度均达102copies/m L,特异性达100%,每对引物和探针只检测出相应的病毒,无交叉反应,检测变异系数(CV)均低于1.55%。用该法检测1 896例临床标本,结果 Flu A 235例,H7N9 127例,与其他试剂报告结果完全一致。结论建立的四重荧光定量RT-PCR法可快速检测H7N9病毒,灵敏度与特异性好,可用于H7N9病毒感染患者的早期诊断。

糖化血红蛋白临床应用中值得关注的问题

糖化血红蛋白(GHb)是指葡萄糖通过非酶促反应连接到血红蛋白α链和β链缬氨酸和赖氨酸残基上形成的产物。HbA1c是特指葡萄糖与β链N末端上缬氨酸连接的那部分血红蛋白。HbA1c是GHb的主要部分。HbA1c含量与血中葡萄糖浓度及红细胞的半衰期密切相关。

双重荧光定量RT-PCR法检测柯萨奇病毒A2和A5型

目的建立同时检测柯萨奇病毒A2和A5型(CVA2、CVA5)的双重实时荧光定量RT-PCR法。方法用Primer Express3.0软件设计高度特异性引物和荧光标记探针。通过优化反应体系,建立标准曲线,并评价双重荧光定量RT-PCR法的特异性、灵敏度和重复性。用建立的方法检测367例疑似手足口病患儿的粪便标本,并对阳性结果测序验证。结果荧光定量RT-PCR结果表明本实验所选的引物和探针可特异性检测并区分出CVA2、CVA5亚型,与其他肠道病毒的阳性核酸未发生交叉反应。该方法最低检测限达到102copies/m L,批内变异系数(CV)均<1.49%。367份临床标本中CVA2型阳性23份,阳性率6.3%;CVA5阳性11份,阳性率3%,检测阳性结果与测序结果一致。结论成功建立了在单管中同时检测并鉴别CVA2、CVA5型的双重实时荧光定量RT-PCR检测方法。该方法具有较好的灵敏度、特异性、重复性,可用于CVA2、CVA5型引起的暴发疫情的快速筛查和手足口病的流行病学的研究。

急性脑梗死患者氧化低密度脂蛋白与颈动脉内膜中层厚度的关系探讨

目的研究急性脑梗死(ACI)患者氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)与颈动脉内膜中层厚度(IMT)之间的关系。方法采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测44例ACI患者(ACI组)和30例健康者(对照组)血清Ox-LDL水平,并对ACI患者进行颈动脉超声检查,检测颈动脉IMT,分析ACI患者Ox-LDL水平与颈动脉IMT的关系。结果 ACI患者Ox-LDL水平明显高于健康者,差异有统计学意义(P<0.01);颈动脉IMT≥1.0mm的ACI患者Ox-LDL水平高于颈动脉IMT<1.0mm者(P<0.05);ACI患者Ox-LDL水平与颈动脉IMT呈正相关(r=0.493,P<0.05)。结论 ACI患者的血清Ox-LDL水平升高,与颈动脉粥样硬化密切相关。