Survivin对食管癌细胞Tak1、NF-κB表达调控以及细胞周期和凋亡的影响

目的探讨存活蛋白(Survivin)对食管癌细胞转化生长因子β激活激酶1(Tak1)、核因子κB(NF-κB)表达调控以及细胞周期和凋亡的影响。方法常规体外培养人食管癌细胞Eca109,随机分为空白对照组、Survivin-siRNA组、Survivin-siRNA空载体组、Survivin过表达组、Survivin过表达空载体组、YM155组,Survivin-siRNA组与Survivin-siRNA空载体组分别转染Survivin siRNA载体、Survivin siRNA空载体,Survivin过表达组与Survivin过表达空载体组分别转染Survivin过表达载体、Survivin过表达空载体,转染6 h,更换新鲜培养基继续培养24 h,收集细胞。空白对照组不予转染,YM155组加入Survivin抑制剂YM155,于各转染组同期收集细胞。采用Western blotting法检测Survivin、磷酸化Tak1(p-Tak1)、NF-κB p65表达,采用流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡率。结果与空白对照组比较,Survivin过表达组Survivin相对表达量显著升高,而Survivin-siRNA组和YM155组Survivin相对表达量显著降低(P均<0.05)。与空白对照组比较,各转染组及YM155组p-Tak1、NF-κB相对表达量无显著变化(P均>0.05)。与空白对照组比较,YM155组G_(2)期细胞所占比例显著升高(P<0.05),S期细胞所占比例显著降低(P<0.05),G_(1)期细胞所占比例无显著变化(P>0.05);与空白对照组比较,各转染组G_(1)、G_(2)、S期细胞所占比例均无显著变化(P均>0.05)。与空白对照组比较,Survivin-siRNA组早期凋亡率和总凋亡率显著升高(P均<0.05),晚期凋亡率无显著变化(P>0.05);与空白对照组比较,其他转染组和YM155组早期凋亡率、晚期凋亡率、总凋亡率均无显著变化(P均>0.05)。结论Survivin能够参与食管癌细胞周期分布和凋亡调控,但其作用途径并非通过调控Tak1、NF-κB表达实现。

铜死亡相关基因COX17在乳腺癌组织和细胞中的表达及其与临床特征和患者预后的关系

目的:探究铜死亡相关基因COX17在乳腺癌组织和细胞中的表达及其与肿瘤免疫细胞浸润、临床特征和患者预后的关系。方法:通过多种数据库数据分析COX17在人体正常组织和泛癌组织与细胞中的表达及其与患者预后的关系、COX17基因突变情况、COX17表达水平与肿瘤免疫微环境的相关性、COX17在浸润性乳腺癌中表达水平及其与患者临床病理特征的相关性、在乳腺癌细胞中COX17基因遗传突变及甲基化情况、COX17差异共表达基因的功能富集分析,构建COX17蛋白质相互作用网络及功能分析。采用免疫组化法检测COX17蛋白在国人乳腺癌组织中的表达以验证数据库分析结果。结果:COX17 mRNA广泛分布于全身组织中且在多数癌组织中呈高表达,COX17蛋白在乳腺癌等癌组织中呈高表达,COX17 mRNA表达水平明显影响乳腺癌等癌症患者的预后,COX17基因在多种癌组织中突变频率高且其主要突变类型为错义突变、扩增和深度缺失,COX17mRNA表达水平与多种肿瘤的肿瘤纯度和多种免疫细胞浸润存在相关性,COX17蛋白水平与乳腺癌临床分期、病理分型、淋巴结转移、患者性别和年龄有关联。免疫组化法检测结果证实在国人乳腺癌组织中COX17蛋白也呈高表达,COX17基因在乳腺癌中遗传突变和修饰特征分别是截断突变和启动子区高度甲基化。COX17蛋白与ATOX1等多种蛋白表达相关且构成复杂的相互作用网络,COX17在乳腺癌中差异表达基因主要涉及氧化还原酶活性、蛋白翻译、氧化磷酸化及TNF信号通路等生物过程。结论:COX17在乳腺癌组织和细胞中呈高表达,且与癌组织的免疫细胞浸润和患者预后相关,COX17是临床治疗乳腺癌的潜在靶点。