量子点标记免疫层析试纸条快速检测谷物中赭曲霉毒素A

目的:根据竞争抑制免疫层析原理,构建一种基于量子点标记的免疫层析试纸条用于检测谷物中赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)的残留量。方法:通过活化酯法将羧基功能化的量子点(Quantum dot,QD)与赭曲霉毒素A多克隆抗体(Antibody,Ab)偶联制备量子点抗体偶联物(QD-Ab);通过分别添加不同量的QD-Ab和工作液,优化量子点标记免疫层析试纸条的工作条件;通过商品化试剂盒验证该方法的有效性。结果:当QD与Ab的摩尔比为1∶10时,QD-Ab荧光特性最佳;在QD-Ab和工作液添加量分别为1、10μL时,量子点标记免疫层析试纸条结果最佳;量子点标记免疫层析试纸条的检测限为0.5μg/L,谷物样品中的检测限为5μg/kg,整个检测过程不超过10 min;量子点标记免疫层析试纸条特异性良好且具有有效性。结论:该方法操作简便、检测快速、结果准确灵敏,易于判断,可以满足谷物中赭曲霉毒素A残留量现场快速检测的要求。

澳洲坚果蛋白夹心ELISA方法的建立及应用

利用碱溶酸沉法提取未加工的澳洲坚果蛋白,分别制备鼠、兔多克隆抗体,并以兔多抗为捕获抗体,鼠多抗为检测抗体建立了双抗夹心酶联免疫检测方法。该方法的检出限为(0.95±0.17)ng/mL。方法与大豆、核桃、榛果、杏仁、花生、开心果、腰果和小麦蛋白无明显交叉反应,证明该方法特异性良好。焙烤的澳洲坚果和焙烤饼干中澳洲坚果蛋白的添加回收率为73.67%～77.03%,说明该方法不仅适用于未加工澳洲坚果蛋白的准确检测,也适用于热加工后以及焙烤食品中澳洲坚果蛋白的定量检测。