转位蛋白基因在FLT3-ITD/DNMT3A R882双突变急性髓系白血病疗效评估中的价值

目的:观察转位蛋白(TSPO)基因在FLT3-ITD/DNMT3A R882双突变急性髓系白血病(AML)疗效评估中的价值。方法:纳入2018年6月至2020年6月在宁波大学附属人民医院血液科住院治疗的初发AML患者76例,其中伴有FLT3-ITD突变34例,伴有DNMT3A R882突变27例,伴有FLT3-ITD/DNMT3A R882双突变15例,对照组为同期住院治疗的免疫性血小板减少症(ITP)患者19例。骨髓穿刺留取骨髓3 ml,常规提取RNA,通过转录组测序方法检测TSPO基因的表达量(使用2^(-ΔΔCT)法计算)。结果:FLT3-ITD单突变组和DNMT3A R882单突变组初诊时TSPO基因表达量分别为2.02±1.04、1.85±0.76,均高于对照组的1.00±0.06,但比较差异无统计学意义(P=0.671,P=0.821);双突变组初诊时TSPO基因表达量为3.98±1.07,明显高于FLT3-ITD单突变组和DNMT3A R882单突变组(P=0.032,P=0.021);双突变组化疗后达到完全缓解的患者,达到完全缓解时的TSPO基因表达量为1.19±0.87,明显低于其初诊时的水平(P=0.011)。结论:TSPO基因或许可以作为评估FLT3-ITD/DNMT3A R882双突变AML治疗疗效的一个指标。

组蛋白H3K27甲基化抑制剂EPZ005687对U937细胞和正常骨髓CD34^+细胞凋亡、增殖及细胞周期的影响

本研究目的在于探讨组蛋白H3K27甲基化抑制剂新药EPZ005687对白血病细胞系U937细胞和正常骨髓CD34+细胞的凋亡、增殖抑制和细胞周期的影响。以不同浓度的EPZ005687作用于U937细胞,在不同时间点采用Annexin V/PI法检测细胞凋亡,WST-1法检测细胞增殖,7-AAD流式细胞术检测法检测细胞周期,免疫化学法检测H3K27组蛋白甲基化活性。结果表明:EPZ005687显著诱导U937细胞的凋亡,在0.5、1、5和10μmol/L浓度下作用于U937细胞48 h后,其凋亡率分别为3.96%±0.79%、5.74%±0.73%、13.34%±1.77%和25.24%±2.55%,而EPZ005687对正常骨髓CD34+细胞的凋亡影响较小;在0.5、1、5和10μmol/L浓度下CD34+细胞凋亡率分别为3.64%±0.62%、4.28%±0.99%、6.18%±1.19%和7.56%±1.34%;0.5、1、5和10μmol/L浓度的EPZ005687分别作用于U937细胞12 h至96 h,作用CD34+细胞1至5 d,明显观察到EPZ005687显著抑制U937细胞的增殖且呈剂量依赖性,而对正常CD34+细胞的增殖抑制并不明显。细胞周期分析显示,1μmol/L EPZ005687作用72 h可使U937细胞明显阻滞于G1期(64.18%±13.27%vs 49.43%±12.54%),S期细胞比例明显下降低(9.67%±2.61%vs 15.26%±5.58%),而正常CD34+细胞因多数细胞位于G1期,S期细胞较少而不受其影响。进一步的H3K27组蛋白甲基化检测分析显示,EZP005687可明显地降低U937细胞的H3K27组蛋白甲基化,而不降低正常CD34+细胞的H3K27组蛋白甲基化。结论:组蛋白H3K27甲基化抑制剂EPZ005687明显抑制U937细胞的增殖,诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞,但对正常造血细胞CD34+影响较小,可作为一种潜在的血液肿瘤治疗药物应用于临床。

急性早幼粒细胞患者治疗前后循环内皮细胞的变化及其影响因素的分析

目的：探讨急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia,APL）患者治疗前后循环内皮细胞（circulating endothelial cells,CECs）数量、表面抗原及生物学特性的变化,并分析其与临床指标的关系。方法：免疫磁珠结合三色流式细胞仪分选计数APL患者初诊及治疗后CECs的数量;免疫荧光染色检测APL患者初诊及治疗后CECs表面CD146、CD31、CD144、VEGFR-2、CD45及CD133的表达水平。体外培养CECs进行血管生成实验及细胞集落形成率的测定。结果：APL患者CECs在外周血白细胞〉10×10^-9/L及CD34阳性患者中数量明显增多（P〈0.05）,高危、低危及中危3组患者的CECs数量也呈现明显的差异（P〈0.05）。32例APL患者诱导化疗后均获得完全缓解,治疗后CECs数量及其表面CD133表达水平均明显下降（P〈0.05）。同时治疗后APL患者CECs体外形成血管数目及细胞的集落形成率均明显减少（P〈0.05）。APL患者CECs数量治疗后/治疗前的比值与As_2O_3治疗1周后的尿砷浓度呈现明显负相关性（P〈0.05）。结论：精确计数并深入了解CECs生物学特性可能有助于评价APL的预后及设计治疗策略。

MACOPB方案治疗复发或难治性非霍奇金淋巴瘤的临床分析

目的观察MACOPB方案治疗复发或难治性非霍奇金淋巴瘤(NHL)的近期疗效及不良反应。方法对28例难治复发性NHL患者应用MACOPB方案(MTX 400 mg/m2第2、6、10周静滴,24 h后四氢叶酸钙15 mg/m2,qh×6次解救,MIT 6 mg/m2第1、3、5、7、9、11周静滴,CTX 400 mg/m2第1、3、5、7、9、11周静滴,VCR 2 mg第2、4、6、8、10、12周静滴,DXM 10 mg qd×2周静滴后减量,BLM 10mg/m2第4、8、12周静滴)化疗,评定疗效。结果 28例患者总有效率为78.6%(22/28),完全缓解(CR)率为60.7%(17/28),部分缓解(PR)率为17.9%(5/28)。毒副反应主要为骨髓抑制、黏膜炎、胃肠道反应等。全组病例支持治疗下均能完成所有化疗,全组无致死性毒性反应发生。结论 MACOPB方案可用于治疗难治复发性NHL,有较好的近期疗效,治疗相关不良反应轻微,易于控制。为能够再次缓解的复发淋巴瘤患者进行造血干细胞移植提供了治疗机会。

急性早幼粒细胞白血病患者循环内皮细胞增殖能力及临床意义的研究

目的：探讨急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia, APL）患者的循环内皮细胞（circulating endothelial cells, CECs）与健康者CECs在生物学特性上的差异，并分析其与PML/RARα融合基因的关系。方法免疫磁珠结合三色流式细胞仪分选计数APL患者的CECs。免疫荧光染色鉴定CECs表面CD31、CD144、VEGFR-2及CD133的表达情况，体外培养绘制其生长曲线，并测定CECs的集落形成率。结果 APL患者的CECs的数量及增殖能力明显高于对照组，16例APL患者CECs中CD133阳性率及集落形成率均高于对照组（P﹤0.05），其中CD34＋APL患者CECs表达CD133高达（50.3＆#177;9.2）%，其集落形成率是对照组的8倍。APL患者CECs数量及CD133阳性率均与PML/RARα融合基因呈正相关。结论精确计数并深入了解CECs可能有助于评价预后及设计治疗策略。

两种剂量甲氨蝶呤治疗急性淋巴细胞白血病对骨髓细胞的影响

目的比较两种剂量甲氨蝶呤治疗急性淋巴细胞白血病对骨髓细胞的影响。方法按随机数表法将140例急性淋巴细胞白血病患者分为对照组和观察组,各70例,对照组采用大剂量甲氨蝶呤治疗,观察组采用标准剂量甲氨蝶呤治疗,观察两组白细胞计数(WBC)、血红蛋白(HB)、血小板(PLT)、肾小球滤过率(GFR)、血浓度、疗效及不良反应情况。结果治疗后,观察组WBC、HB、PLT及GFR均优于对照组(均P<0.05);血浓度小于对照组(P<0.05);总有效率优于对照组(P<0.05);不良发应发生率低于对照组(P<0.05)。结论大剂量甲氨蝶呤治疗急性淋巴细胞白血病对骨髓细胞影响较大。

CD64指数在恶性血液病患者感染性发热和非感染性发热中的鉴别诊断价值

目的 探讨外周血中性粒细胞CD64指数在恶性血液病患者感染性发热和非感染性发热中的鉴别诊断价值。方法 收集2012-07-2013-07血液科住院的恶性血液病合并发热患者98例,其中感染性发热组(包括细菌感染、真菌感染及混合感染,除外病毒感染)65例、非感染性发热组(包括肿瘤性发热、药物热等)33例,对照组30例为同时期住院的非恶性血液病患者。流式细胞仪检测所有受试者外周血中性粒细胞CD64指数的水平。结果 感染性发热组中性粒细胞CD64指数水平较对照组明显升高(3.24±0.42 vs 1.09±0.41,P<0.05),也较非感染性发热组(1.58±0.59)明显升高(P<0.05);与对照组相比,非感染性发热组中性粒细胞CD64指数水平则无明显升高(1.58±0.59 vs 1.09±0.41,P>0.05)。经过有效治疗2周后,感染性发热组中性粒细胞CD64指数(1.11±0.72)明显下降,与治疗前比较有统计学差异(P<0.05),而非感染性发热组中性粒细胞CD64指数(1.10±0.28)无明显下降,与治疗前比较无统计学差异(P>0.05)。结论 中性粒细胞CD64指数在恶性血液病患者感染性发热和非感染性发热的鉴别中具有一定价值。

伏立康唑治疗儿童血液病侵袭性真菌感染疗效的分析

目的：分析伏立康唑治疗儿童血液病侵袭性真菌感染的疗效及安全性。方法：回顾性分析15例真菌感染患儿,全部病例均于诊断后给予伏立康唑注射液治疗,予4 mg/kg静脉滴注,q12 h,体温正常1~2周后改用口服伏立康唑片治疗。结果：11例有效,3例无效,1例放弃治疗,总有效率73.3%。结论：伏立康唑注射液是治疗儿童恶性血液病侵袭性真菌感染的安全有效的药物。

CML患者循环内皮细胞中BCR/ABL融合基因表达水平及其临床意义的研究

越来越多的证据显示,肿瘤组织的血管内皮细胞有着与正常血管内皮细胞不同的特征。这些肿瘤血管内皮系统与肿瘤的发生发展密切相关。本研究分离慢性髓系白血病(CML)患者外周血中的循环内皮细胞(circulating endothelial cells,CEC),研究其生物学特性及增殖潜能,并测定其CD133及BCR/ABL融合基因的表达水平,探讨CEC在CML自然病程中的重要作用。用淋巴细胞分离液分离CML患者外周血中的单个核细胞,应用免疫磁珠分选CD45-及CD146+的细胞,在相差显微镜下观察其形态,进行体外培养并绘制其生长曲线;采用免疫荧光染色法测定CEC表面CD31、CD34、VWF及CD133的表达情况;利用FISH技术检测BCR/ABL融合基因的阳性率。结果表明,CML患者外周血中分离的CEC具有典型血管内皮细胞形态,表达血管内皮细胞表面抗原CD31、CD34、VWF,增殖能力明显强于健康对照组,12名CML患者CEC中CD133表达的阳性率为31.29%,与健康对照组相比有显著性差异(P<0.05),BCR/ABL融合基因阳性率为10.77%,与疾病进程呈现正性相关的趋势。结论:CML患者的CEC是肿瘤侵袭发展的重要组成部分,与疾病的传播和扩散有关。

异甘草酸镁联合还原型谷胱甘肽治疗血液病患者化疗后药物性肝损害临床观察

药物性肝损害是化疗药物中常见的不良反应之一,主要表现为丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）升高.化疗药物引起的肝损害已占药物性肝损害的5.46%～8.36%[1],化疗药物所导致的药物性肝损害给患者带来极大的痛苦及不适,并可影响化疗的剂量及化疗给药进程.本研究于2009年6月至2011年6月观察了47例血液系统恶性肿瘤患者接受化疗后出现肝功能损坏,用异甘草酸镁联合还原型谷胱甘肽治疗,现报告如下.

趋化因子受体与多发性骨髓瘤疗效关系的研究

为了探讨趋化因子受体CXCR4、CCR1、CCR2与多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)疗效的关系,采用流式细胞术检测48例初发MM病人骨髓中MM细胞表面CXCR4、CCR1、CCR2的表达情况。患者分为2组,表达至少1个趋化因子受体的归为趋化因子受体表达阳性组(Ⅰ组),不表达趋化因子受体的归为趋化因子受体表达阴性组(Ⅱ组)。经过化疗3、6个月后分别评价和比较各组的疗效。结果显示:经过化疗3个月后,Ⅰ组患者(34例,中途失访3例)化疗有效率80.6%(25/31),Ⅱ组患者(14例)化疗有效率50%(7/14);经过化疗6个月后,Ⅰ组患者化疗有效率83.9%(26/31),Ⅱ组患者化疗有效率50%(7/14),无论经过化疗3个月还是经过化疗6个月,2组患者的有效率的差异均有统计学意义(p<0.05)。结论:CXCR4、CCR1、CCR2可以作为预测MM疗效的指标。

4例Ph阳性的急性白血病患者诱导缓解过程中出现静脉血栓报道并文献复习

目的提高对Ph染色体阳性的急性白血病患者诱导缓解过程中出现静脉血栓发病的认识。方法临床诊断4例Ph染色体阳性的急性白血病患者诱导缓解过程中出现静脉血栓并文献复习。结果4例急性白血病患者Ph染色体均阳性,化疗后继发血栓形成,予低分子肝素治疗后血栓无加重,无出血现象。结论对于Ph染色体阳性的急性白血病患者化疗过程中要高度注意血栓事件的发生,诱导缓解过程中是否常规给予抗凝治疗有待进一步探讨。

幽门螺杆菌阳性难治性特发性血小板减少性紫癜患者细胞凋亡的研究

目的:探讨Caspase-3和bcl-2在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori HP)阳性难治性特发性血小板减少性紫癜(Id-iopathic thrombocytopenic purpura ITP)患者B淋巴细胞的表达及其意义。方法:HP阳性的难治性ITP患者给予三联抗HP治疗,并应用流式细胞仪检测患者治疗前和治疗后3个月外周血B淋巴细胞Caspase-3和bcl-2表达水平。结果:18例HP阳性的难治性ITP患者中,12例治疗有效患者Caspase-3治疗后表达率(38.3±7.2)%较治疗前(16.1±2.5)%明显升高(P<0.05),bcl-2治疗后表达率(46.4±2.3)%较治疗前(78.6±9.6)%明显下降(P<0.05),而6例治疗无效患者Caspase-3和bcl-2表达水平却无变化(P>0.05)。结论:HP感染导致慢性炎性刺激引起难治性ITP患者B淋巴细胞凋亡异常,免疫功能紊乱,血小板计数持续低下,因而清除HP感染成为难治性ITP的一个治疗手段。

G—HAA方案治疗难治.复发性急性髓系白血病的疗效观察

目的评价小剂量阿糖胞苷（Ara—C）、阿克拉霉素（ACR）、高三尖杉酯碱（HHT）和粒细胞集落刺激因子（G—CSF）组成的G—HAA预激方案治疗难治、复发性急性髓系白血病（AML）的有效性和安全性。方法将48例难治、复发性AML患者分成采用CAG预激方案治疗的CAG组（23例）和G—HAA预激方案治疗的G—HAA组（25例）。两组患者根据年龄再分为3个亚组：儿童亚组（≤14岁）、中青年亚组（15～59岁）和老年亚组（≥60岁）。两组患者分别采用不同预激方案治疗，观察并比较其完全缓解率（CR）、部分缓解率（PR）和未缓解率（NR）；评价治疗期间的不良反应。结果CAG组和G—HAA组总CR率分别为69．6％、76O％，差异无统计学意义（P〉005），总有效率（CR＋PR）也无统计学差异（P〉0，05）；两组间M，、M。型AML和骨髓增生异常综合征（MDS）转化AML患者CR率的差异均无统计学意义（均P〉0．05），但两组M4、M5型AML的CR率分别为444％、90．9％，差异有统计学意义（P〈0．05）；CAG方案和G—HAA方案儿童治疗CR率分别为375％、90．0％，差异有统计学意义（P〈005），但中青年和老年的差异均无统计学意义（均，J〉0．05）；进一步分析儿童亚组显示，CAG方案和G—HAA方案治疗M4、M5型CR率分别为20．0％、100．0％，差异有统计学意义（P〈005），但M1、M2型CR率差异无统计学意义（P〉0．05）；各组不良反应发生率的差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论G—HAA预激方案治疗难治、复发性AML安全、有效，特别是对M。、M。型AML疗效较CAG预激方案佳。

HAG和CAG方案治疗难治性和复发性急性髓细胞性白血病的疗效比较

近年来,因联合化疗方案的广泛使用已使急性髓系白血病（AML）患者的治疗疗效明显提高;但难治性和复发性AML患者,常因对化疗不敏感、并发症多等因素而导致治疗疗效不理想,且与治疗相关的死亡率较高.日本学者Yamada等[1]首先采用CAG方案,即小剂量阿糖胞苷（Ara-C）、阿克拉霉素（ACR）联合重组人粒细胞集落刺激因子（G-CSF）预激疗法治疗难治性和复发性AML,疗效颇为显著.近年来笔者采用高三尖杉酯碱（HHT）代替ACR组成HAG预激方案治疗难治、复发性AML,并比较了HAG和CAG方案的疗效,现将结果报道如下。

小剂量利妥昔单抗联合IL-11治疗难治性免疫性血小板减少性紫癜的疗效观察

免疫性血小板减少性紫癜（ITP）是一种获得性的自身免疫性出血性疾病，临床表现主要为广泛的皮肤黏膜出血，也可出现危及生命的内脏出血。随着针对1TP发病机制新药物的出现，治疗有了更多选择。近年，国内外多项临床研究表明利妥昔单抗及重组人IL-11（rhlL-11）单药治疗难治性ITP取得一定疗效，但部分患者仍无效，本研究拟报告两者联合治疗19例难治性ITP的疗效。

急性早幼粒细胞白血病诱导治疗过程中继发弥漫性肺泡出血临床分析

急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia,APL）是急性髓细胞白血病的一种特殊亚型,具有独特的细胞遗传学改变,且90%以上的患者有特异性染色体易位（t15;17）（q22;q21）,其中t（15;17）易位可形成早幼粒细胞白血病蛋白（promyelocytic leukemia protein,PML）-维甲酸受体α（retinoic acid receptor alpha,

急性白血病化疗后继发嗜水气单胞菌骨髓炎临床分析

急性白血病患者自身免疫功能低下,加之反复化疗、长期应用糖皮质激素,极易并发医院内感染,且感染后病情明显加重,严重威胁患者的生命.以往被忽略的气单胞菌感染越来越受到关注,尤其是在肝胆疾病及恶性肿瘤等免疫功能低下患者,气单胞菌感染病例不断增加,病死率较高[1].现将我院2005年1月到2012年12月收治的6例急性白血病患者化疗后继发嗜水气单孢菌骨髓炎的病例报告如下.