非小细胞肺癌DNA甲基化研究进展

肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，也是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。有效的早期筛查方法的缺乏是导致肺癌死亡率居高不下的重要原因。与早期肺癌相比，晚期肺癌的5年生存率显著降低。因此，肺癌的早期诊断至关重要。研究发现DNA甲基化与肿瘤的发生、发展密切相关，随着DNA甲基化研究的深入，已经证实肺癌中存在异常甲基化的基因。检测组织、肺泡灌洗液、血清／血浆、痰液、尿液等标本中的特异性基因的甲基化状况，是促进肺癌早期诊断、改善预后的有效途径。

IL-12p40与IL-12p70在单病原菌性血流感染小鼠模型中的表达及意义

目的探讨白细胞介素-12p40(IL-12p40)和IL-12p70在不同病原菌致小鼠血流感染模型中的动力学变化及意义。方法建立金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌标准菌株的CD-1(ICR)小鼠血流感染模型并评价;采用蛋白液相芯片检测技术测定各实验组与磷酸缓冲溶液(PBS)的对照组0.5、1、3、6、12、24和48h的IL-12p40和IL-12p70浓度。结果金黄色葡萄球菌组与对照组相比,IL-12p40的浓度稍升高,而粪肠球菌组、大肠埃希菌组和肺炎克雷伯菌组感染后1h即明显上升,3h时达峰值,分别为(216.36±50.63)pg/mL、(118.32±9.98)pg/mL和(129.19±27.11)pg/mL。感染12h后仍维持较高水平,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);金黄色葡萄球菌组IL-12p70浓度在感染后6h时明显升高且达峰值,为(389.31±118.07)pg/ml;粪肠球菌组IL-12p70浓度在感染后3h明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),大肠埃希菌组与肺炎克雷伯菌组IL-12p70浓度于感染后3h达峰值,分别为(42.20±3.54)pg/mL和(62.80±8.37)pg/mL但升高幅度显著低于金黄色葡萄球菌组和粪肠球菌组(P<0.05)。结论 IL-12p40和IL-12p70在四组单病原菌性血流感染模型早期均明显升高,感染金黄色葡萄球菌或粪肠球菌后IL-12p70浓度的升高程度明显高于大肠埃希菌或肺炎克雷伯菌感染。联合检测IL-12p40和IL-12p70等指标对区分革兰阴阳性菌感染有一定价值。

直肠癌新辅助放化疗后病理完全缓解的临床因素研究

目的探讨应用临床因素预测直肠癌新辅助放化疗后病理完全缓解(pCR)的可行性。方法回顾性分析2011年1月至2018年12月在中国人民解放军总医院行新辅助放化疗的162例直肠癌患者的临床资料,根据术后病理结果将患者分为pCR组和非pCR组,寻找对直肠癌新辅助放化疗后pCR具有预测意义的临床因素。结果经新辅助放化疗后达到pCR者共28例(17.3%,28/162)。单因素分析显示,分化程度高的直肠癌(P=0.024)、肿瘤占据肠腔比例≤1/2(P=0.006)、较早的临床T分期(P=0.013)、较早的临床N分期(P=0.009)、新辅助放化疗结束至手术的时间间隔>49 d(P=0.006)、肿瘤最大直径≤5 cm(P=0.019)的患者更容易获得pCR,差异均有统计学意义。多因素分析显示,肿瘤占据肠腔比例≤1/2(P=0.01)、肿瘤最大直径≤5 cm(P=0.035)、新辅助放化疗结束至手术的时间间隔>49 d(P=0.009)是预测新辅助治疗后pCR的独立因素。结论肿瘤占肠腔比例、肿瘤最大直径、新辅助放化疗结束至手术的时间间隔能预测直肠癌新辅助放化疗后pCR。

低剂量全氟辛酸对人横纹肌肉瘤细胞增殖和迁移及侵袭的影响

目的观察全氟辛酸(PFOA)对体外培养的人恶性胚胎横纹肌瘤(RD)细胞的增殖、迁移及侵袭的影响,并初步探讨其作用机制。方法应用不同浓度PFOA作用体外培养的RD细胞一定时间后,使用细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK8)检测细胞活力并确定PFOA作用浓度;使用该浓度PFOA处理RD细胞,通过划痕实验和细胞体外侵袭(transwell)实验评估细胞的侵袭和迁移能力,流式细胞术检测细胞周期的分布,实时荧光定量PCR(qPCR)检测相关基因mRNA表达差异,蛋白质免疫印迹法(WB)检测相关蛋白水平表达差异。结果CCK8结果显示不同浓度PFOA作用RD细胞72h后,呈现出低浓度PFOA(1、10、50、100μmol/L)促进、高浓度PFOA(250、500μmol/L)抑制细胞增殖的趋势,与对照组相比,50μmol/LPFOA组对RD细胞的增殖呈现促进作用(P<0.001)。流式细胞术结果显示PFOA(50μmol/L)作用RD细胞72h后,G0/G1期细胞差异无统计学意义,S期细胞减少,G2/M期细胞增加。S期及G2/M期相对比例在PFOA组及对照组之间差异均有统计学意义(均P<0.01)。qPCR结果显示在mRNA水平,对照组与PFOA(50μmol/L)处理组的细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶2(CDK2)相对表达量分别为0.97±0.07、2.64±0.11,差异有统计学意义(t=12.60,P<0.001);细胞周期蛋白E2(cyclinE2)相对表达量分别为1.33±0.17、3.35±0.22,差异有统计学意义(t=7.42,P<0.001);WB结果显示,对照组与PFOA(50μmol/L)处理组的CDK2相对表达量分别为0.35±0.01、0.84±0.03,差异有统计学意义(t=14.60,P<0.001);cyclinE2相对表达量分别为0.67±0.04、0.86±0.01,差异有统计学意义(t=4.88,P<0.01)。p21、p53在mRNA及蛋白表达差异均无统计学意义(均P>0.05)。划痕实验结果显示,PFOA(50μmol/L)组的划痕愈合速度明显加快,其相对迁移面积大于对照组(P<0.001);transwell侵袭试验显示与对照组相比,PFOA(50μmol/L)组细胞穿过小孔数增多(t=54.40,P<0.001),侵袭能力明显增强。qPCR结果显示在mRNA水平,对照组与PFOA(50μmol/L)处理组的波形蛋白(vimentin)相对表达量分别为0.71±0.03、2.53±0.16,差异有统计学意义(t=11.00,P<0.001);基质金属蛋白酶2(MMP2)相对表达量分别为1.09±0.04、10.73±1.20,差异有统计学意义(t=8.04,P<0.001)。WB结果显示,对照组与PFOA(50μmol/L)处理组的vimentin相对表达量分别0.55±0.06、0.81±0.01,差异有统计学意义(t=4.50,P<0.05);MMP2相对表达量分别为0.64±0.04、1.03±0.13,差异有统计学意义(t=2.94,P<0.05)。结论低剂量PFOA(50μmol/L)暴露可通过上调细胞周期相关蛋白及MMP2、vimentin促进横纹肌肉瘤细胞的增殖、侵袭转移。