超声波对固定化α-淀粉酶催化活性的影响

对超声波处理固定化α-淀粉酶进行了研究,结果表明,在一定参数范围内,固定化α-淀粉酶活力升高。对超声功率、超声频率和超声时间等能够影响固定化酶活力的因素的研究和优化,得出最适当的超声参数为:超声功率为40W、超声频率为15kHz、超声时间为5min。

基因工程菌Pichia pastoris高密度培养条件的摇瓶研究

对基因工程菌Pichiapastoris高密度培养的培养基进行了研究,选取了价廉易得的培养基,对此培养基各组分进行了优化,并对其它发酵条件进行了优化试验,得到了最优培养基配方及培养条件。结果表明,培养基最佳配方为:葡萄糖为5%,氨水单次补料量为20μL(250mL摇瓶装液量为20mL),KH2PO4浓度为0.7%,培养基其它组分为:K2HPO40.1%、MgSO4.7H2O0.03%、FeSO4.7H2O0.05%、MnSO4.H2O0.05%。种子液最佳培养时间为40h,接种量为10%,250mL三角瓶装液量为20mL,摇床转速为220r/m,发酵培养基最佳初始pH5.5,发酵温度为30℃,发酵结束时间64h。在此优化的培养基及培养条件下,菌体密度达到最高,OD600达到64.3,细胞干重20.2g/L。

黄伞多糖的研究进展

黄伞多糖具有调节机体免疫力、抗肿瘤、降血脂、抗菌、抗氧化、抗衰老等多方面的生物活性,是目前最具开发潜力的食药用真菌多糖。该文对黄伞多糖的来源、菌丝体发酵工艺优化、多糖提取工艺优化、分离提取方法、纯化和组成鉴定、生物学活性进行了综述,以期对黄伞多糖未来的研究提供理论基础。

不同补料发酵方式对重组毕赤酵母高密度培养的影响

目的:研究5L发酵罐中葡萄糖补料方式对重组毕赤酵母高密度培养的影响,为大规模工业化生产奠定基础。方法:葡萄糖分批发酵阶段结束以后,以不同的流加策略流加补料培养基。结果:分批发酵初始葡萄糖最佳浓度为10g/L;采用间歇补料和恒速流加补料方式培养毕赤酵母,发酵结束后菌体细胞干重分别为33.2g/L和41.5g/L,而采用指数流加补料方式,发酵前期和发酵后期控制比生长速率分别为0.20h-1和0.15h-1,发酵结束后菌体细胞干重可达53.4g/L。结论:采用分阶段控制比生长速率的发酵策略,发酵结束后菌体细胞干重远远大于间歇补料和恒速流加补料发酵策略。

反相高效液相色谱法测定微生物发酵液中的生物素

建立了一种测定成分比较复杂的微生物发酵液中生物素含量的方法,确定了最佳的色谱测定条件:色谱柱为ZORBAX SB-C18(5μm,4.6×250mm),流动相为乙腈和水(体积比为1∶6,用H3PO4调节pH为3.5),柱温为30℃,流速为0.8mL/min,紫外检测波长210nm。方法的相对标准偏差在2.0%以内,回收率在90%以上,检测限为2mg/L。实验表明,此法简便、准确、快速,仅需对样品进行简单的离心、过滤即可直接进样测定。

黄伞胞外多糖发酵培养条件的响应面法优化

采用Plackett-Burman试验设计筛选显著影响多糖产量的培养条件,然后用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,最后通过Box-Behnken设计及响应面分析确定主要影响因素的最佳值。结果表明,多糖发酵培养条件为:初始p H值6.5、摇床转速209 r/min、装液量48 m L/250 m L、温度31℃、接种量10%、种龄90 h、培养时间180 h。在此最佳条件下,黄伞发酵胞外多糖产量可达7.44 g/L,比优化前提高了近2倍。利用响应面分析法优化黄伞胞外多糖发酵培养条件是可靠的,具有实际的应用价值。

发酵液中植酸酶活性测定方法的研究

以钒钼法对发酵液中植酸酶活性进行了测定,并对影响酶活性测定结果的因素进行了研究。实验结果表明,钒钼法测磷的灵敏度和线性范围分别为0.025mmol/L和0.025mmol/L^0.60mmol/L;为减小植酸酶活性的测定误差,结果测定必须在颜色反应结束后的4h以内完成。研究中同时发现,发酵液含有的无机磷远远大于酶活测定产生的无机磷含量,直接用发酵液测得的植酸酶酶活是不可靠的。通过对透析2h的发酵液进行植酸酶酶活的测定,实验结果的最大相对偏差仅为7.1%。

医学院校生物技术专业发酵工程课程改革与实践

针对医学院校生物技术专业特点,结合我校生物技术专业特色,对发酵工程课程进行了教学内容和教学方法等方面的改革和实践,即优化了教学体系、对教学内容进行重组、教学方式采取多样化手段、改革实验教学方法和内容、改革和完善课程考核制度。

医学院校生物技术实验室建设的探索与实践

针对医学院校生物技术实验室建设特点,结合我校生物技术专业特色,探讨了医学院校生物技术实验室建设的背景和必要性,并对生物技术实验室建设进行了探索与实践,即加强医学生物技术实验室师资队伍建设、大力加强实验室基础设施建设、完善实验室各项规章制度,并简要论述了实验室建设所取得的成效。

改革实验室管理体制,提高实验教学质量

泰山医学院近年来对医学检验实验室建设与管理体制进行了改革,从加强实验室队伍建设、完善规章制度、强化服务意识、强化实验室安全管理和所取得的成效等方面探索了医学检验实验室建设与管理的模式。

重组毕赤酵母产植酸酶的性质初步研究

对基因工程重组酵母的植酸酶进行分离和纯化,并考察纯化酶的酶学性质。结果表明,该植酸酶酶蛋白分子量为60ku;有2个pH值活力峰:pH值为3.5和pH值为5.5;最适反应温度为60℃;在37℃下以植酸钠为底物的反应初速度为128μmol/(L·min),米氏常数为228μmol/L;Cu2+对此酶有较强的抑制作用;Mg2+,Ca2+,Al3+,Fe2+,Co2+,Zn2+和EDTA等对酶活性影响不大。

植酸酶毕赤氏酵母诱导条件初步研究

目的优化产植酸酶的毕赤酵母基因工程菌的表达条件,确定最佳的诱导表达条件。方法先培养酵母细胞,然后进行诱导产酶,最后进行酶活测定。结果植酸酶的最佳收获时间为3 d;甲醇的最佳诱导浓度为10 g/L。结论在诱导开始之后加入0.4%的PTM1和0.1%酪蛋白水解物可以明显促进植酸酶的表达。

超临界CO_2萃取黄伞脂溶性成分及其GC-MS分析

目的:采用超临界CO_2萃取技术对黄伞脂溶性成分进行萃取并利用GC-MS联用技术对其化学成分进行分析。方法:采用单因素试验、正交试验方法,以萃取温度、萃取压力、萃取时间及夹带剂浓度为考察因素,以黄伞脂溶性成分得率为指标,确定黄伞的超临界CO_2萃取最佳提取工艺。利用GC-MS技术对其化学成分进行分析,采用面积归一化法确定其百分含量。结果:超临界CO_2萃取黄伞脂溶性成分的最佳工艺条件为:萃取温度40℃,萃取压力30 MPa,夹带剂乙醇浓度95%,萃取时间2 h。此试验条件下,黄伞脂溶性成分的得率为1.43%。利用GC-MS技术,从黄伞萃取物中共鉴定出35种化合物,其中组分含量较高的依次为:1-异丙烯基-3-丙烯基环戊烷(35.96%)、反式-1,2-双(1-甲基乙烯基)-环丁烷(17.99%)、石竹烯(11.31%),这几个成分占黄伞脂溶性成分总量的65.26%。结论:用超临界CO_2提取可较好的获得黄伞脂溶性成分。

杨树枯萎病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为建立荧光定量PCR检测杨树枯萎病的方法和明确前期分离的拮抗菌N6-34对杨树枯萎病致病菌尖孢镰刀菌的作用,本试验采用常规PCR法扩增尖孢镰刀菌的特异性片段,将此片段与载体连接构建质粒,提取质粒DNA在实时荧光定量PCR仪上采用两步法进行扩增并绘制实时荧光定量PCR标准曲线,同时对杨树进行不同灌根处理(T1:1×10~6 cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和未接N6-34菌株的发酵培养液各20 mL;T2:1×10~6 cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和灭活的N6-34菌株发酵培养液各20 mL;T3:1×10~6 cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和N6-34菌株的发酵培养液各20 mL),并于10、20、30 d取样检测杨树根际尖孢镰刀菌数量。结果表明:本研究建立的方法能应用于土传尖孢镰刀菌导致的杨树枯萎病的检测;T1处理的尖孢镰刀菌的数量随处理时间的延长呈先下降后上升的趋势,T2和T3中的尖孢镰刀菌数量则呈下降趋势,表明N6-34能够抑制尖孢镰刀菌。本研究对指导杨树种植和病害预报具有极为重要的应用价值,能够为杨树病害管理提供科学依据。

医学院校生物工程专业“产学研”一体化初探

针对当今医学院校生物工程专业教学体系存在的问题,积极探索以就业为导向、"产学研"一体化培养相结合的应用型人才培养的新模式。就泰山医学院生物工程专业在"产学研"一体化方面积累的经验进行了总结,以期对我国医学类高校生物工程专业"产学研"一体化提供理论指导。

柱前衍生高效液相色谱法测定中韩泡菜中的氨基酸含量

以传统中韩泡菜为研究对象,采用异硫氰酸苯酯柱前衍生化方法,应用高效液相色谱法(HPLC)检测了中韩泡菜中的游离氨基酸种类和含量。对17种氨基酸混合标准样品检测结果可知,所有的氨基酸在35 min内全部出峰,优于文献报道的检测方法;大部分氨基酸在浓度0.02~2.50 mmol/L时均具有较好的线性关系;17种氨基酸平均加标回收率为79.5%~94.7%,检测方法的相对标准偏差RSD为0.2%~0.7%。从检测到的氨基酸种类来看,中国泡菜中没有酪氨酸、缬氨酸和蛋氨酸,而韩国泡菜中仅没有蛋氨酸,其他氨基酸均检测出来。从检测到的氨基酸含量来看,中国泡菜中的各种氨基酸含量均远大于韩国泡菜,其中中国泡菜中的天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸和甘氨酸含量比韩国泡菜高出1倍左右,而苯丙氨酸含量比韩国泡菜高出近8倍;中国泡菜中的总氨基酸含量(12 204.19μg/g泡菜)远高于韩国泡菜中的总氨基酸含量(5 275.27μg/g泡菜),前者为后者的2.3倍。

丹参根腐病拮抗细菌筛选、鉴定及生防机理研究

腐皮镰刀菌Fusarium solani造成的根腐病是丹参主要土传病害之一。本研究采用稀释涂布平板法从丹参植株中分离筛选得到一株对根腐病具有良好防治效果的内生拮抗菌株DS-R5,经形态学和分子生物学鉴定为多粘类芽胞杆菌Paenibacillus polymyxa。通过孢子萌发试验、光学显微镜观察、扫描电镜和透射电镜观察,研究菌株DS-R5对腐皮镰刀菌的抑制机制。结果显示,菌株DS-R5抗菌活性物质粗提物对腐皮镰刀菌孢子萌发具有明显的抑制作用;受抑制菌丝发生畸变,菌丝缠绕、断裂,局部出现断裂;扫描电镜观察发现,受抑制菌丝大量断裂,有菌丝碎屑产生,菌丝粗细不一,表面粗糙,有胞内物质泄露;透射电镜观察显示,菌丝体细胞畸形,无完整细胞器存在,胞质外流,内部出现异常空洞。盆栽试验结果显示,菌株DS-R5对丹参根腐病的防治效果达到61.4%。综上,菌株DS-R5对丹参根腐病具有较好的生防潜力,具有进一步开发的前景。

癌症基因组图集数据库及其应用

癌症多是由DNA变异引起的细胞恶性增生,在基因组水平上研究这些变异及变异间相互作用引起的癌变分子机制,将有助于提高我们对癌症的预防、诊断及治疗能力。基于此,美国国家癌症研究所(NCI)和国家人类基因组研究所(NHGRI)联合发起了癌症基因组图集计划(TCGA),获得了海量数据。这些数据加速了人们对癌变分子机制的认识,为精准治疗和个性化治疗奠定了坚实的基础。此计划完成后国内鲜有对其详实的介绍,本文将对该基因组数据的产生、数据的类型、数据的获取与应用等进行描述,促进这些数据运用于癌症的预防、早期诊断和治疗中。

三种L-苏氨酸的测定方法比较

目的:比较3种测定L-苏氨酸含量的方法。方法:对三种L-苏氨酸的测定方法:纸层析法、薄层层析法、高效液相PITC柱前衍生法进行了比较和优化。并用以上三种方法测定10份发酵液样品中的L-苏氨酸含量及加标回收率。结果:纸层析法、薄层层析法和高效液相PITC柱前衍生法三种方法的决定系数分别为0.9938、0.9971和0.9992,检出限分别为:5、7和1.2μg/L。在每组样品的方差方面,高效液相PITC柱前衍生法方差最小,纸层析法和薄层层析法相近。三种方法平均样品加标回收率分别为95.60%、95.10%和99.30%。三种方法用来检测样品中的L-苏氨酸含量均效果良好。在准确性方面,高效液相PITC柱前衍生法的准确性最好,纸层析法和薄层层析法次之。结论:纸层析法和薄层层析法成本低,适合部分对精确度要求不高的含量测定。高效液相PITC柱前衍生法测定精确,成本较高,速度快,适合精确测定。