神经元烟碱受体的分子生物学研究进展

神经元烟碱受体是重要的神经结构之一，但由于在脑内的含量甚微，研究进展一直较为缓慢。直到分子生物学技术引入到受体研究领域，神经元烟碱受体的研究工作才取得突破性进展。本文是对近十年来的神经元烟碱受体的分子生物学研究进展的综述，包括神经元烟碱受体的基因结构．基因克隆和表达，以及神经元烟时受体的功能性研究，神经元烟碱受体的亲和纯化和在脑内的分布。

新抗胆碱药[~3H]三环哌酯对人脑M受体的作用

用放射配体受体结合试验法，研究了新化合物三环哌酯与人大脑皮质Ｍ受体的结合特性，并与ＱＮＢ作了比较。饱和实验结果显示，［３Ｈ］三环哌酯的结合参数与［３Ｈ］ＱＮＢ相近，两种配体的作用均符合单位点模型。竞争性抑制实验结果表明二者作用强度相当。［３Ｈ］三环哌酯的结合和解离速率常数均较［３Ｈ］ＱＮＢ大，且其与皮质Ｍ受体的解离受季铵酚的变构调节，结果提示，两种配体与Ｍ受体有一些不同的结合特性，在Ｍ受体研究中。

中枢烟碱型乙酰胆碱受体的分离纯化

中枢烟碱型乙酰胆碱受体的分离纯化娄振军，洪孝庄（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）关键词乙酸胆碱受体，分离纯化烟碱型乙酰胆碱受体（ｎＡｃｈＲ）根据其分布分为中枢ｎＡｃｈＲ和外周ｎＡｃｈＲ。其中外周ｎＡｃｈＲ已经分离纯化，并对其结构和生化...

“桥抗体”对酶免疫分析的影响

在对 T-2毒素检测的 ELISA 研究中,T2-HS(T2-琥珀酸半酯)与 BSA 或 PLL联接,前者(T2-C_4-BSA)为免疫原,后者(T2-C_4-PLL)为检测抗原。在进行 ELISA 时,将 T2-C_4-PLL 包被于微板,并与兔抗 T-2抗体和标准 T-2样品一起保温。T-2抗体结合量用酶(HRP)标羊抗兔 IgG 与酶底物反应进行测定。在此情况下,我们不仅观察到抗 T-2抗体及抗 BSA 抗体,而且还有抗“-C_4-”抗体(即“桥抗体”)存在,同时发现“桥抗体”对T-2检测的灵敏度有明显干扰,甚至使 ELISA 不能进行。如以 T2-C_2-TT 代替 T2-C_4-PLL为检测抗原,由于“-C_4-”桥的排除,“桥抗体”的干扰也明显减弱。

神经元烟碱受体β_2亚基基因克隆和原核细胞表达

采用异硫氰酸胍－酚－氯仿抽提法从孵育至１２ｄ的鸡胚视叶顶盖中提取ＲＮＡ。根据Ｓｃｈｏｅｐｆｅｒ报道的序列设计引物，引物的５′端添加ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ酶切位点。通过逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）得到１．４８ｋｂ长的ｃＤＮＡ片段，用ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ酶切ｃＤＮＡ后插入质粒ｐＵＣ１９。测序采用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧终止法，结果与文献报道一致。将β２基因克隆入ｐＢＶ２２０原核表达载体中。宿主菌经４２℃诱导，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白电泳，在相对分子质量（Ｍｒ）５．

实验性重症肌无力症状与血清抗体水平的关系

一般认为重症肌无力(MG)是由于体内产生抗烟碱型胆碱受体(N-AChR)的抗体,使N-AChR受损害,骨骼肌运动终板发生退行性变化,但其病理机制尚未完全阐明。本文通过实验性自身免疫重症肌无力(EAMG)的研究,观察症状严重程度与血清抗体水平及其他因素之间的关系。

新抗胆碱药（^3H）—三环哌酯对人胎脑皮层M受体的作用

目的：研究三环哌酯与８月龄胎脑皮层Ｍ受体的结合特性，并与ＱＮＢ及成人皮层作比较。方法：用放射配体受体结合试验法，研究比较三环哌酯和ＱＮＢ与８月龄胎脑皮层Ｍ受体的饱和实验参数、竞争性抑制实验参数及结合和解离动力学实验参数。结果：［３Ｈ］三环哌酯与胎脑皮层的结合参数（Ｋｄ＝０．０３２ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｂｍａｘ＝４２６ｐｍｏｌ／ｇ）与［３Ｈ］ＱＮＢ（Ｋｄ＝０．０６４ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｂｍａｘ＝４３４ｐｍｏｌ／ｇ）相近，两种配体的作用均符合单位点模型。［３Ｈ］三环哌酯与胎脑皮层结合的Ｋｄ值与成人皮层相近，但胎脑皮层Ｂｍａｘ值稍低。三环哌酯与ＱＮＢ的ＩＣ５０值相近。［３Ｈ］三环哌酯与胎脑皮层Ｍ受体的结合和解离速率常数分别为１．２４Ｌ·ｎｍｏｌ－１·ｍｉｎ－１（Ｔ１／２＝５ｍｉｎ）和０．０５７ｍｉｎ－１（Ｔ１／２＝０．５ｈ）。结论：三环哌酯与胎脑皮层Ｍ受体的饱和结合特性与ＱＮＢ相似，作用强度与ＱＮＢ相当；胎脑皮层Ｍ受体密度明显比成年人少。