张弦梁结构张拉力确定方法研究

张弦梁结构属于预应力钢结构的一种,在进行拉索预应力导入过程中必须保证施工过程的安全性和完工时的受力状态满足设计要求.因此,必须对张拉索进行张拉过程的索力优化分析和研究,保证对整个施工过程的安全控制.以双向张弦梁为例对比了3种优化方法对张弦梁结构的适用性.经计算分析,得出了张力补偿法为适用于张弦结构张拉力确定的最优方法.结合鹤壁市体育馆预应力空间桁架钢屋盖结构,采用张力补偿法进行了该结构施工阶段分析,得出了高强钢索的内力发展变化规律,验证了张力补偿法在实际大型预应力空间钢结构中的适用性.

弓形虫GRA7致密颗粒蛋白与宿主巨噬细胞蛋白的相互作用

目的鉴定与弓形虫GRA7致密颗粒蛋白相互作用的宿主巨噬细胞蛋白组分,并研究蛋白相互作用与感染过程的相关性。方法建立基于人源THP-1单核巨噬细胞系的弓形虫-巨噬细胞感染模型。以含GST标签的GRA7全长重组蛋白为诱饵,采用GST沉降体外蛋白相互作用方法 ,捕获与诱饵相互作用的人THP-1单核巨噬细胞系成分,采用液相色谱-两级质谱联用(LC-MS/MS)技术鉴定宿主靶蛋白。采用免疫共沉淀(Co-IP)方法验证其体内的相互作用。采用人碳酸酐酶1(h CA1)抗血清为一抗的蛋白质印迹(Western blotting)验证捕获蛋白为宿主h CA1蛋白组分。采用pc DNA3.1(+)真核质粒过表达宿主靶蛋白的方法研究蛋白相互作用与弓形虫感染巨噬细胞的相关性。结果 GST沉降实验捕获的THP-1细胞蛋白组分主要为相对分子质量为Mr29 000的蛋白,质谱鉴定为h CA1。Co-IP实验证明弓形虫GRA7蛋白与宿主h CA1蛋白在感染过程中具有显著体内相互作用。THP-1巨噬细胞内过表达h CA1基因可显著增强弓形虫的繁殖速度和纳虫泡形成速度,但不影响最终繁殖数量。结论弓形虫GRA7致密颗粒蛋白与THP-1巨噬细胞的h CA1蛋白具有显著蛋白相互作用,且该相互作用与弓形虫在THP-1巨噬细胞内的繁殖速度呈正相关。

张弦管桁架结构张拉力优化分析

张弦管桁架结构是预应力钢结构中的自平衡体系结构,数量众多的拉索是构成空间结构的关键。拉索预应力导入过程对结构的施工过程和最终受力形态产生不可忽略的影响,以鹤壁市体育馆张弦管桁架钢屋盖为例,应用张力补偿法进行拉索张拉控制力分析和张拉批次划分的分析,探寻其在施工过程中和施工完成后对结构受力状态的影响。

弓形虫分泌蛋白ROP2的原核重组表达与免疫反应性鉴定

本研究在大肠杆菌工程菌中重组表达弓形虫棒状体蛋白2（ROP2），并初步评价其免疫反应性。主要步骤为体外细胞培养速殖子，提取总RNA，反转录获得cDNA，PCR扩增ROP2基因全长，与pET-41 Ek／LIC载体通过基因重组直接连接，在大肠杆菌Rosetta^TM（DE3）pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白GST-6×His—ROP2，最后以重组蛋白与人源弓形虫抗血清的Western blotting反应评价rROP2免疫反应性。本研究获得了ROP2全长重组蛋白，初步证明其良好的免疫反应性，为进一步改进弓形虫免疫学诊断方法，研究分泌蛋白与宿主细胞的相互作用奠定了基础。

夯土房屋的生存现状及裂缝控制

现存的夯土房屋多分布于经济水平较为落后的村镇地区,存在很大的结构安全隐患。这里归纳夯土房屋现存状况和维护修缮情况,介绍其裂缝的成因和预防控制措施。

跨径比对曲线梁桥模态的影响

以两跨箱梁截面的曲线梁桥作为研究对象,通过有限元分析软件建立不同的模型,分析跨径比的变化对曲线梁桥的振动模态的影响,并进行比较得到变化规律。

非肥胖型与肥胖型非酒精性脂肪性肝病进展性肝纤维化临床特点分析

目的:探究非肥胖型与肥胖型非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)进展性肝纤维化患者的临床特点。方法:选取2019年9月至2020年6月在我院肝病门诊诊断为NAFLD进展性肝纤维化的患者91例,并按BMI分为非肥胖型组18例和肥胖型组73例,另选取同期健康体检者35例为对照组。比较3组一般资料与实验室检查结果。结果:与非肥胖型组比较,肥胖型组BMI、ALT、TG、GLU水平及合并糖尿病、高脂血症比例更高,男性比例更低(P<0.05)。与对照组相比,非肥胖型组ALT、AST、GLU、TG水平、腰围及合并糖尿病、高脂血症比例均增高,而PLT、ALB、H-DLC水平、BMI及男性比例降低(P<0.05)。结论:非肥胖型与肥胖型NAFLD进展性肝纤维化患者均存在糖类和脂类代谢紊乱,非肥胖型患者虽然没有肥胖这一危险因素,但仍存在其他的危险因素,值得临床重视。

弓形虫致密颗粒蛋白GRA7的全基因原核重组表达

目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白7(GRA7)的全长基因,在大肠杆菌工程菌中重组表达GST-His-GRA7融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA7基因全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,最后采用SDS-PAGE和West ern blotting鉴定重组蛋白产物。结果构建了弓形虫GRA7全基因的重组表达质粒,诱导表达了GST-His-GRA7融合重组蛋白,分子量为62kD,与预测结果相符。结论研究获得了弓形虫GRA7全基因的重组蛋白,为进一步研究弓形虫GRA7抗原性及其与宿主细胞的相互作用奠定了基础。

刚地弓形虫致密颗粒蛋白GRA2全基因的原核重组表达

目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白2(GRA2)的全长基因,在大肠埃希菌工程菌中重组表达GST-HisGRA2融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA2基因全长,与pET-41Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠埃希菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,然后采用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白产物。结果 PCR鉴定弓形虫GRA2全基因重组表达质粒构建正确;诱导表达的GSTHis-GRA2融合重组蛋白分子质量单位为52ku,与预测值相符。结论本研究成功构建了弓形虫GRA2全基因重组蛋白质粒,该质粒能表达GRA2蛋白,为研究GRA2与宿主细胞的相互作用奠定了基础。

钩端螺旋体聚Beta羟基丁酸(PHB)生物合成途径分析

【目的】致病型问号钩端螺旋体(问号钩体,Leptospira interrogans)和腐生型双曲钩体(L.biflexa)能够大量合成菌体内贮藏物,这可能是钩体在营养贫瘠环境中长时间存活的主要原因之一。本研究对钩体聚Beta羟基丁酸(PHB)贮藏物进行定性定量测定,通过基因组分析补充定义PHB合成主要功能基因,并采用分子生物学方法初步证明PHB合成途径的完整性,为进一步研究PHB合成与钩体抗逆能力的关系奠定基础。【方法】采用脂类特异性尼罗红染色法和浓硫酸氧化-紫外分光光度计测定法,对问号钩体和双曲钩体的PHB贮藏物进行定性定量测定;采用生物信息学方法(BLAST和InterProscan/InterPro2Go),通过同源性分析和功能结构域搜索寻找钩体基因组中的PHB合成相关基因;最后采用克隆测序和定量RT-PCR技术检测相关基因表达情况,初步验证生物信息学预测结果。【结果】尼罗红染色和氧化后比色定量实验证明钩体合成细菌常见贮藏物PHB,问号钩体合成量为菌体干重的42%45%,双曲钩体合成量为64%68%。尽管已公布的多个钩体基因组中均没有定义完整的PHB合成途径,但本研究通过综合生物信息学分析,在问号钩体和双曲钩体中鉴定了PHB合成途径的主要功能基因(phbC)。克隆测序和定量RT-PCR证实钩体转录表达大部分PHB合成相关基因(phbA/B/C),说明钩体内该生物途径基本完整,且部分高水平表达基因可能是钩体主要的PHB合成相关基因。【结论】问号钩体和双曲钩体均可合成PHB贮藏物,且具有基本完整的PHB合成生物途径。

弓形虫分泌蛋白ROP5的全基因原核重组表达与抗原性鉴定

目的在大肠杆菌工程菌中重组表达刚地弓形虫RH株棒状体蛋白5(ROP5)的融合蛋白GST-6×His-ROP5,并初步评价重组蛋白的抗原性。方法体外细胞培养弓形虫速殖子,提取总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增ROP5基因全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,最后通过Western blotting鉴定重组蛋白rROP5的抗原性。结果构建了弓形虫ROP5全基因重组表达质粒,诱导表达了GST-6×His-ROP5融合蛋白,分子量为96 kDa,与预测结果相符,重组蛋白与人源抗血清有显著免疫印迹反应。结论本研究获得了弓形虫ROP5全长重组蛋白,为进一步改进弓形虫诊断抗原,研究蛋白结构以及分泌蛋白与宿主细胞的相互作用奠定了基础。

非酒精性脂肪性肝病的进展性肝纤维化影响因素分析

目的分析非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的进展性纤维化影响因素。方法选取2019年9月~2020年6月首都医科大学密云教学医院收治的NAFLD患者192例作为研究对象,根据NFS评分结果将NFS积分>0.676设为进展性纤维化组,-1.455~0.676设为不确定组,<-1.455设为无纤维化组,分析三组临床资料特征,并采用Logistic多因素回归分析NAFLD进展性纤维化影响因素。结果进展性纤维化组61例(31.77%),无纤维化组96例(50.00%),不确定组35例(18.23%)。三组BMI、AST/ALT、FBG、腰围、AST、ALB、PLT、HDLC比较,差异有统计学意义(P<0.05);三组性别、年龄、ALT、TG、TC、LDLC比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic多因素回归分析显示,腰围(OR=1.149,95%CI:1.025~1.334)、BMI(OR=1.421,95%CI:1.073~1.924)、AST/ALT(OR=1.857,95%CI:1.046~3.454)、HDLC(OR=-0.532,95%CI:0.292~0.994)是NAFLD进展性纤维化的影响因素。结论腰围、BMI、AST/ALT、HDLC与NAFLD进展性纤维化密切相关,通过监测以上指标,可早期发现并干预NAFLD进展性纤维化,对控制并发症及改善预后具有重要意义。