扩大切除手术治疗肉芽肿性小叶性乳腺炎的疗效分析

目的探讨扩大切除手术治疗肉芽肿性小叶性乳腺炎(GLM)的临床效果与可行性。方法选取2014年6月—2015年12月我科收治的88例GLM患者,随机分为观察组与对照组各44例,对照组进行常规药物治疗,观察组行扩大切除手术,对疗效差异随访。结果经随访,观察组治愈率为95.45%,明显高于对照组的75.0%,复发率为4.76%,明显低于对照组的21.21%,治愈率与复发率差异均有统计学意义(P<0.05),乳房外形满意度调查显示两组满意度相似(88.64%vs.93.18%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论扩大切除手术治疗肉芽肿性小叶性乳腺炎效果显著,愈后复发率低。

蛋白质组学检测P4HB蛋白在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的分析结直肠癌(CRC)组织和正常癌旁组织之间的差异表达蛋白质,探讨其与CRC疾病特征的关系。方法应用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳法(2D-PAGE)分析12例配对CRC组织和正常癌旁组织之间的差异表达蛋白,并运用激光解吸电离飞行时间质谱分析(MALDI-TOF-MS)和MS/MS法对差异表达的蛋白质标记点进行鉴定和分析。找出CRC组织中表达上调的蛋白脯氨酰-4-羟化酶(P4HB)β亚单位作为兴趣蛋白后,通过Western-blot验证,并运用免疫组织化学技术检测P4HB在CRC中的表达情况,分析其与CRC的临床病理特征及预后的关系。结果 2D-PAGE分析和MALDI-TOF-MS鉴定结果显示,CRC组织中P4HB表达丰度比正常黏膜组织上调2.01倍(P<0.01)。Western-blot结果显示,CRC组织中P4HB的表达水平明显高于其配对的正常黏膜组织[(1.36±0.54)vs(0.74±0.35)](P<0.05)。P4HB蛋白在CRC组织、腺瘤组织和正常黏膜组织中的表达阳性率依次减低,分别为43.85%(82/187),19.35%(12/62)及12.67%(19/150),三者间的差别均有统计学意义(P<0.001)。P4HB蛋白表达与CRC的TNM分期(P=0.003)、肿瘤分化程度(P=0.020)、肿瘤大小(P<0.001)有关,而与患者的性别(P=0.880)、年龄(P=0.464)及肿瘤部位(P=0.293)无关。Log-rank检验结果显示,在CRC患者中,P4HB表达阳性组与阴性组的生存时间差别无统计学意义(P=0.110)。结论 CRC组织中P4HB表达上调,这与CRC更晚的分期、低分化及较大的肿瘤相关。

免疫组化检测三阴性乳腺癌患者果糖-1,6-二磷酸激酶表达的临床价值

目的探讨果糖-1,6-二磷酸激酶(FBP1)在三阴性乳腺癌(TNBC)表达的临床意义。方法收集我院临床及病理资料完整的乳腺癌患者石蜡块100例制作组织芯片,其中TNBC组42例,非三阴性乳腺癌(NTNBC)组58例,采用免疫组化法检测FBP1的表达和分布情况,并进行比较分析。结果FBP1低表达与雌激素受体(ER)阴性(P=0.027)、病理分期晚(P=0.034)、淋巴结转移(P=0.015)以及远处转移(P=0.012)关系密切。其中,FBP1在TNBC组主要表现为低表达,在NTNBC组主要表现为高表达,两组间比较的差异有统计学意义。结论结合临床病理资料分析,提示FBP1可能作为TNBC诊断和/或评估疾病进展的新型生物学标志物。

基于微阵列数据研究RGS3与乳腺癌的预后关系

目的基于微阵列数据研究G蛋白信号调节因子3(RGS3)与乳腺癌的预后关系,为乳腺癌的治疗提供潜在的靶点及预后参考因素。方法通过Kaplan-Meier Plotter平台(http://kmplot.com/analysis/)的微阵列数据库分析RGS3高/低表达对不同类型乳腺癌以及伴有高复发危险因素乳腺癌10年、15年生存的影响。结果根据10年、15年的随访数据,R GS3的高表达与基底样型乳腺癌的不良预后有关(P=0.032),并且与伴有高复发危险因素乳腺癌的不良预后密切相关,包括激素受体阴性(P=0.000)、HER-2过表达(P=0.004)、肿瘤组织学3级(P=0.009)、TP53阳性表达(P=0.046)和腋窝淋巴结转移阳性(P=0.005)等。结论 RGS34高表达与乳腺癌的恶性生物学特征有关,提示R GS3可以成为乳腺癌潜在的治疗靶点和有效的预后参考因素。

探讨CD44^+/CD24^-细胞在乳腺癌患者不同时期外周血中的表达

目的:探讨CD44^+/CD24~细胞在乳腺癌患者不同时期外周血中的表达。方法:随机选取2011年1月-2013年6月笔者所在医院收治的乳腺癌患者30例,将其作为乳腺癌组,另选取笔者所在医院同期收治的30例乳腺良性病患者为良性组,对两组患者不同时期外周血中CD44^+/CD24~细胞表达情况进行分析。结果:乳腺癌组化疗后和淋巴结阳性患者外周血中CD44^+/CD24~细胞表达均显著高于良性组,差异有统计学意义(P<0.05),但术前、术后、淋巴结阴性患者外周血中CD44^+/CD24~细胞表达和良性组之间差异均无统计学意义(P>0.05),而化疗后患者外周血中CD44^+/CD24~细胞表达显著高于术前、术后,差异有统计学意义(P<0.05),淋巴结阳性患者外周血中CD44^+/CD24~细胞表达显著高于淋巴结阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:检测CD44^+/CD24~细胞在乳腺癌患者不同时期外周血中的表达能够为临床患者病情的评估及预后的判断工作提供有效依据,值得临床充分重视。

沉默Prohibitin基因对人结直肠癌细胞株HCT116增殖和凋亡的影响

目的 siRNA介导抗增殖蛋白Prohibitin（PHB）基因沉默对人结直肠癌细胞株HCT116增殖和凋亡的影响。方法 通过脂质体LipofectamineTM2000在HCT116细胞中转染PHB-siRNA,以Western blot来筛选siRNA片段。设立阴性对照NC组和高效沉默PHB138,PHB539siRNA片段为实验组,重新转染HCT116,通过平板克隆形成实验、CCK-8检测细胞增殖能力;AnnexinⅤ-FITC细胞凋亡试剂流式细胞术、Caspase-3/Caspase-9活性检测等方法检测细胞凋亡;AnnexinⅤ-FITC和Hoechst染色荧光显微镜观察。结果 Western blot结果显示siRNA片段PHB138、PHB539能明显抑制PHB蛋白表达;转染后HCT116平板克隆形成率分别PHB138（31.1±4.0）%、PHB539（12.4±1.2）%、NC（43.4±2.1）%,差异有统计学意义（P〈0.001）;CCK8实验发现转染后1~5d,实验组与对照组比较,细胞增殖未收到显著影响（P〉0.05）。在转染第7天,PHB539siRNA能显著抑制细胞增殖（P〈0.01）;Caspase-3活性度为PHB138（1.50±0.39）、PHB539（1.81±0.41）,Caspase-9活性度PHB138（2.02±0.43）、PHB539（2.81±0.51）,差异有统计学意义（P〈0.05）;AnnexinⅤ-FITC和Hoechst染色均在荧光显微镜下观测有明显的凋亡现象,且凋亡比例和强度比阴性对照强。结论靶向PHB-siRNA干扰可以有效地沉默结直肠癌细胞HCT116PHB基因,下调PHB蛋白水平,从而抑制结直肠癌细胞HCT116增殖、促进凋亡。

miRNA-301b对三阴性型乳腺癌的血管生成拟态和预后的影响

目的探讨微小核糖核酸301b(miR-301b)对体外三阴性型乳腺癌(TNBC)细胞血管生成拟态的作用,并结合微阵列数据库的生物信息学数据分析miR-301b对TNBC患者预后的影响。方法体外培养TNBC细胞株MDA-MB-231细胞,使用脂质体Lipofectamine2000将miR-301b模拟物(miRNA过表达组)、miR-301b抑制剂(miRNA抑制组)、miR-301b阴性对照(阴性对照组)分别转染于MDA-MB-231细胞,通过血管生成拟态实验验证miR-301b在TNBC细胞中的血管生成作用。同时,通过Kaplan-Meier Plotter平台(http://kmplot.com/analysis/)的微阵列数据库获取相关数据分析miR-301b高/低表达对TNBC患者10年、15年生存的影响。结果血管生成拟态实验表明,miR-301b过表达组MDA-MB-231细胞的管形成数量分别是阴性对照组的3.9倍(P<0.01)、miR-301b抑制组的9.6倍(P<0.01),而miR-301b抑制组MDA-MB-231细胞的管形成数量比阴性对照组减少了58%(P<0.01)。根据微阵列数据库获取相关的10年、15年的队列随访数据,miR-301b的高表达是TNBC患者不良预后的危险因素(HR=2.09,95%CI:1.21～3.60,P=0.0068);第3四分位数(P_(75))生存时间:miR-301b高表达队列TNBC患者是38.27个月,miR-301b低表达队列TNBC患者是106.59个月。结论 MDA-MB-231细胞中存在血管拟态现象,miR-301b过表达促进TNBC细胞的血管生成,是TNBC的一个负性预后因子。进一步寻找、研究、验证miR-301在TNBC中的靶基因,有望成为TNBC抗血管生成治疗的一个突破口。

硫氧还蛋白过氧化物酶2在人结直肠癌的表达及其对HCT116细胞增殖、迁移的作用

目的探讨硫氧还蛋白过氧化物酶2（PRDX2）蛋白在结直肠癌、腺瘤及正常黏膜组织中的差异性表达及其与结直肠癌的生物学关系；利用RNA干扰（RNAi）技术，特异性沉默PRDX2基因的表达，观察沉默PRDX2对结直肠癌细胞HCTJ16增殖与迁移的影响并探讨其机制。方法采用Westernblot、免疫组织化学检测并分析PRDX2蛋白的表达与结直肠癌发生及预后的关系。构建稳定沉默PRDX2细胞株，设立阴性对照组（shContr01）和沉默PRDX2实验组（shPRDX2-F3），通过细胞计数试剂盒（CCK-8）、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力，划痕实验和Transwell小室检测体外迁移能力，WesternNot检测E-钙黏蛋白（E—cadherin）、N．钙黏蛋白（N—cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、Snail、Slug蛋白表达。结果PRDX2蛋白在结直肠癌、腺瘤和正常黏膜组织中的表达阳性率依次减低（P〈0．01）。其表达与结直肠癌的TNM分期（P〈0．01）、肿瘤分化程度（P〈0．01）有关，PRDX2蛋白阳性表达者生存率（71．90％）明显低于阴性表达者（86．28％，P〈0．05）。沉默PRDX2基因后能抑制HCTI16细胞的增殖生长；PRDX2沉默后HCT116细胞克隆数量[（69．53±5．20）个]少于空载对照组[（98．33±10．69）个，P〈0．05]；沉默PRDX2的细胞迁移能力增强，且E—cadherin蛋白表达下降，N—cadherin、Vimentiu、Snail、S1ug蛋白表达增强。结论PRDX2蛋白表达参与结直肠癌的发生、发展，并与结直肠癌的预后有关。沉默PRDX2可抑制结直肠癌细胞HCT116增殖，促进迁移，其机制可能与转录因子Snail、Slug表达有关。

基于危险度分层差异的kit阳性胃肠间质瘤比较蛋白质组学研究

目的分析不同侵袭性c-kit突变型胃肠间质瘤（GISTs）组织的蛋白质差异表达谱，筛查影响GISTs侵袭和转移相关的新分子标志物。 方法应用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳（2D-PAGE）分析已确认c-kit突变型的高、低危型GISTs组织各5例的差异表达蛋白，并运用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术对差异表达的蛋白质标记点进行鉴定。 结果41个表达差异至少2倍的蛋白质斑点；应用MALDI-TOF-MS技术对差异蛋白质点进行质谱分析，成功鉴定27种不同分子特性的蛋白质。其中，在高危型GISTs组织中表达上调的14种蛋白质包括泛醌细胞色素c还原酶核心蛋白I（UQCRC1）、含TCP1伴侣蛋白亚基-2（CCT-2）、丙酮酸脱氢酶β（PDHB）、过氧化物酶3（PRDX3）、抑制素、蛋白酶体激活剂28β（Pa28β）、细胞色素c氧化酶亚基5A（COX5A）、线粒体基质酪蛋白酶水解亚基（CLPP）、线粒体的Tu翻译延伸因子（TuFM）、谷胱甘肽S转移酶ω1（GSTO1）、下视丘分泌素（食欲素）受体1（HCRTR1）、转移抑制蛋白NM23-H1及未知蛋白，下调的13种蛋白质包括载脂蛋白A1（APOA1）、结合珠蛋白、血红素结合蛋白1（HEBP1）、染色体1开放阅读框123（C1orf123）、热休克蛋白β6（HSPB6）、SH3域结合富含谷氨酸蛋白（SH3BGRL）、谷胱甘肽-S-转移酶Mu2（GSTM2）、原肌球蛋白α-1链（TPM1）、蛋白二硫化物异构酶A3（PDIA3）、二甲基精氨酸二甲胺水解酶1（DDAH1）、肽重复序列结构域1（TTC1）、不均一核糖核蛋白C（HNRNPC）及DJ-1蛋白等。 结论比较蛋白质组学能较好地提示基于危险度分层差异的GISTs组织间的蛋白质表达差异，筛选出27种差异蛋白有助于GISTs预后判断和转移预警。