单胚清见橘橙×椪柑产生高比例多胚种子及多胚有性的分子检测

多胚现象是柑橘研究及育种实践中一个重要问题。为了避开珠心胚的干扰 ,育种实践中常采用单胚材料作母本。清见橘橙是柑橘杂交育种中一个比较优良的单胚材料 ,以其为母本配制了 7个杂交组合。当父本为强德勒柚和塔罗科血橙时 ,只产生单胚种子 ;父本为脐血橙梨形橙和冰糖橙时 ,产生较低比例的多胚种子 ,为 3.5 %～7.2 %;而以新生系 3号柑和太田柑为父本时 ,则产生高比例的多胚种子 ,达 2 8.4%～ 44 .2 %。通过连续 2年杂交试验 ,发现清见×柑产生高比例多胚种子现象比较稳定。此现象与前人研究的结论有明显不同 ,前人多认为单胚柑橘一般只产生单胚种子 ,即使有时也产生多胚种子 ,但其比例较低 ,一般不超过 7%。为此 ,笔者对清见×新3号柑的多胚种子进行了分胚培养 ,获得多胚苗 ,并取部分幼苗叶片进行RAPD分析。分析发现多数多胚苗具有父本的特征带或具有与母本明显不同的带型 ,肯定为有性后代 ;而且这些多胚苗大部分在遗传上非常一致 ,可能为同一受精卵分裂而来 ,但也发现所检测的部分多胚苗之间还存在差异谱带 ,可能为多卵受精发育而来 ,或在同一受精卵分离后出现了明显的变异。

两对互补的显性基因控制着柑桔属和枳属的无融合生殖

无融合生殖具有重要的学术价值和应用价值 ,这种生殖方式普遍存在于柑桔属及其近缘属植物中。对母本分别为单胚 (即有性生殖 )的宽皮柑桔品种克力迈丁和韦尔金、父本分别为多胚 (即无融合生殖 )的甜橙品种锦橙、新会橙、桃叶橙和哈姆林的杂种F1代群体总计 8个杂交组合的 2 2 9个开花结果后代 ,进行了胚性分离的调查 ,发现F1代中既有有性生殖 ,也有无融合生殖 ;有性生殖与无融合生殖的分离比例 ,在韦尔金后代中接近 1∶2 ,而在克力迈丁后代中接近 1∶1。根据该结果 ,结合前人的研究资料 ,提出在柑桔属和枳属或者还包括其他柑桔近缘属中 ,无融合生殖受到位于细胞核的两对互补的显性基因A1和A2的调控 ,且其中一对基因 ,设为A1表现显性纯合致死效应 ;两对基因的分离重组符合孟德尔的分离定律和自由组合定律。按该模式可以较为合理地解释已有的大部分常规杂交资料。

大麦DNA单限制性酶切选择性扩增多态性技术及其优化

建立和优化了大麦DNA单限制性酶切选择性扩增多态性技术体系 (SADF)。分别用限制酶PstI、EcoRI和MseI酶切大麦基因组DNA ,再与各自相应的人工接头连接 ,使用带三个选择碱基的引物进行选择性扩增。结果表明 :采用分别优化建立的标准PCR扩增检测体系 ,六个识别碱基的PstI和EcoRI的SADF均能得到丰富稳定的带形 ,四个识别碱基的MseI不能得到明显谱带。SADF扩增产物片段大小范围为 :PstI一般在 2 0 0～ 2 0 0 0bp ,而EcoRI在 2 0 0～ 10 0 0bp ;两者在不同大麦品种中均能检测到多态性 ,可用于不同大麦品种的检测 ,但PstI得到的带型明显优于EcoRI,在大麦中得到的片段具有范围宽、分布均匀、易于观察、多态性高等特点。

锦橙叶片叶绿素含量在田间严重干旱时及灌水后的变化

作为主要的捕光色素，叶绿素对光合作用有重要的影响。但叶片叶绿素含量并非是一个稳恒值，它受到多方面因素的影响，干旱胁迫即是一个重要的影响因子。利用１９９７年夏季重庆罕见的干旱条件，我们对少核锦橙在严重干旱时及抗旱灌水后叶绿素含量的变化进行了研究。１材料...

中间砧对脐橙叶片水势的影响

对基砧均为枳,中间砧分别为锦橙和兴津温州蜜柑的4个不同脐橙品系,以及无中间砧的锦橙和兴津温州蜜柑对照,进行了早晨和中午的叶片水势测定。早晨,叶片水势一般差异不显著,只是在田间特别干旱时,锦橙中间砧的脐橙叶片水势才显著低于温州蜜柑中间砧,对照锦橙的叶水势亦低于温州蜜柑;中午,锦橙中间砧的脐橙叶片水势一般低于温州蜜柑中间砧,在田间水分蒸腾较大的晴天以及干旱逐渐加重时,二者的差异达到显著水平甚至极显著水平,对照锦橙和温州蜜柑的叶水势呈现类似变化。不考虑中间砧影响时,不同脐橙品系的叶片水势在早晨或中午一般无显著差异。结果表明:中间砧是影响脐橙叶片水势高低及变化的重要因素之一,温州蜜柑中间砧能更有效地阻抑脐橙接穗叶片水势的下降。脐橙品种与中间砧的互作对叶片水势的变化也有一定的影响。

略论我国柑桔鲜食加工兼用品种的选育与发展

1我国的柑桔发展速度喜人，但困境未解 据2008年的数据，全国柑桔面积达206．87万hm2，产量2200万t，面积和产量均位居世界第一。随着重庆、四川、云南等省市已规划面积的落实，以及近年来陆续定植的柑桔园进入结果期和盛产期，面积和产量还将继续增加。

壹志嘉树 修远求索——忆柑桔资源和分类专家叶荫民先生

老的资源楼是一幢简单方正的两层小楼,是一个做柑桔资源研究的好地方。楼里的蜡叶标本馆保存柑桔属及近缘属蜡叶标本6800余份,植被标本756份,花样标本947份,是世界上收集保存柑桔蜡叶标本最多的标本馆之一。

柑橘EST-SSR分子标记分析(英文)

对来源于甜橙(Citrus sinensis Osbeck)、枳壳(Poncirus trifoliata Raf.)和其他柑橘非冗余EST数据库的38 124条单一基因(Unigene)序列进行了简单重复序列SSRs(Simple Sequence Repeat)搜索,所分析的柑橘非冗余核酸序列总长23.29 Mb,从中获得了 8 218 条 SSR,其中包括单碱基重复 4 913 条(59.8%), 2 碱基重复 1 419 条(17.3%),3 碱基重复 1 709条(20.8%),4碱基重复114条(1.39%), 5碱基重复23条(0.28%), 6碱基重复40条(0.49%)。大约每2.8kb 长度的单一基因序列中即存在1个SSR, 即平均4.6个单一基因中存在1个SSR。随碱基重复单元(motif)的不同, SSR的最大长度在40–105之间,全部重复序列的平均长度为20.9 bp。各种SSR (1-,2-,3-,4-,5-,6-核苷酸重复)的发生频率在甜橙和枳壳间非常接近。其中单碱基重复序列是最丰富的重复单元,其次为3碱基重复。在所得的SSR的重复单元中,富含A碱基的重复单元的分布占据优势地位,出现的频率与密度均较高,而富含CG碱基的重复单元出现频率和密度较低。用25对EST-SSR引物对6个柑橘品种的多样性进行了PCR检测,结果表明,所有25对引物在6个柑橘品种间均扩增到多样性条带,证实通过柑橘EST数据库的发掘能够高效地筛选到基因水平的SSR标记。

基于COS Marker分析柑橘属及其近缘、远缘属植物的遗传与进化

【目的】研究柑橘属及其近缘、远缘属种质资源的遗传多样性及亲缘关系,为柑橘类果树的遗传和进化关系提供新的视点,也为遗传育种以及种质资源深入的收集、保护及评价利用提供新工具和参考。【方法】下载Phytozome网站公布的全部克里迈丁Conserved ortholog sequences,并在NCBI中与测序甜橙序列比对,获得具有Gap的序列,从中设计60对COS引物,筛选并利用多态性标记对柑橘属及其近缘、远缘属植物进行扩增检测,通过Structure、Power Marker和Gen Al Ex等软件进行数据分析。【结果】从设计引物中筛选出谱带清晰、稳定性好、具有多态性且分布在柑橘不同连锁群的引物25对,对45份柑橘属及其近缘、远缘属种质资源进行扩增检测,共得到584条谱带,平均每对引物约为23.36条;基因多样性为0.26—0.88,平均0.49;PIC为0.26—0.87,平均0.48。群体遗传结构分析显示,在K=9时,群体结构图清晰地揭示了柑橘属及其近、远缘属植物间的遗传组成关系,可区分为宽皮柑橘类群、柚类群、枸橼类群、大翼橙类群、金柑类群、枳及澳沙檬澳圆檬类群、花椒类群、黄皮酒饼簕九里香类群以及印度野橘和莽山野柑杂合类群,类群关系与聚类分析结果总体比较一致。UPGMA聚类分析显示,COS Marker能够明确地区分柑橘属及其近缘、远缘属种质资源,柑橘属在较高分类层次与金柑属、枳属、澳沙檬属、澳圆檬属、花椒属以及黄皮、酒饼簕、九里香等近、远缘植物分离;在柑橘属内,枸橼和大翼橙类首先聚类,然后与宽皮柑橘、柚类等其他柑橘属植物聚类;宽皮柑橘类群里,道县野橘、岑溪酸橘等半野生宽皮柑橘与椪柑等栽培宽皮柑橘可以明确区分,而莽山野柑和印度野橘不在本类群。【结论】根据甜橙和克里迈丁基因测序信息设计的COS引物,在柑橘近缘、远缘属植物中均能获得有效扩增,能够有效区分柑橘属及其近缘、远缘属种质资源;莽山野柑和印度野橘的遗传组成表现杂合,聚类分析中与宽皮柑橘距离比较远,可能并非宽皮橘类群最原始类型。

不同甜橙品种果汁中柠檬苦素含量的变化

为了减少柠檬苦素对橙汁品质的影响,为橙汁加工的原料品种和加工时间选择提供参考,对20个甜橙品种的鲜榨果汁与巴氏灭菌果汁,在7个不同成熟期,采用高效液相色谱法检测了柠檬苦素和诺米林含量。结果表明:各成熟阶段的所有测试甜橙品种的鲜榨果汁与巴氏灭菌果汁均能检测到柠檬苦素,巴氏灭菌果汁中柠檬苦素含量更高,平均是鲜汁的约2倍;随着果实的成熟,柠檬苦素含量总体逐步降低,到11月中旬时,试验甜橙品种的鲜榨果汁与巴氏灭菌果汁的柠檬苦素含量已低于人的苦味阈值,适于橙汁加工;不同甜橙品种甚至不同脐橙品种之间,柠檬苦素的含量存在明显差异;诺米林含量与柠檬苦素含量呈现类似变化,但含量更低,不是导致橙汁苦味的主要因素。此外,短期的冷冻贮藏对柠檬苦素的含量影响不大。

柑桔砧木育种研究进展

柑桔主要通过嫁接进行繁殖。柑桔砧木对接穗生长势、产量、果实大小、品质和抗性等都有直接的影响。砧木遗传改良是保持柑桔产业具有较强竞争力和较高生产力的重要步骤,世界各国都在致力于柑桔优良砧木的培育。本文就近几十年来柑桔砧木育种进展进行简要综述。

塔罗科血橙新系的选育研究

塔罗科血橙新系是从意大利引进的塔罗科血橙珠心系后代中筛选的优变无性系。该品种果实倒卵形或短椭圆形,平均单果重194 9g,果皮和果肉色泽深红至紫红,汁多肉嫩,果汁含量55 25%,含可溶性固形物11 68%,每100mL果汁含总糖9 08g,酸0 95g,Vc60 16mg,有浓郁的玫瑰芳香,无核(平均0 32粒),品质上等。丰产性强,成年果园公顷产22500～37500kg。成熟期晚(1月下旬至2月初),避开了中熟品种集中上市高峰。经济效益显著,发展潜力巨大。

不同柑橘属种质对柑橘褐斑病菌的抗性评价

【目的】探讨不同柑橘种质及‘梨橙2号’ב晚蜜2号’部分杂交种对柑橘褐斑病菌Alternaria alternata的感病程度及抗性分级标准。【方法】采用室内果实去皮接种观察不同种质的感病程度并根据系统聚类分析法、病斑平均直径法、病情指数法3种抗性评价方法对抗病性进行分级。【结果】大部分宽皮柑橘类种质易感病;甜橙类、柚类和柠檬类种质较抗病。参试的54份种质划分为高抗、抗病、中抗、感病、高感5类,未发现免疫种质;‘胡柚’、‘强德勒’、‘华盛顿脐橙’和‘梁平柚’4个品种为高抗品种。‘梨橙2号’ב晚蜜2号’杂交种抗病性出现分离,可以进行遗传分析。【结论】宽皮柑橘种质及其杂交种和葡萄柚易感病。

单胚槾橘×多胚岩溪晚芦椪柑多胚种子的胚分离培养及后代的叶形态和SSR鉴定

继首次报道单胚清见与多胚椪柑杂交产生高比例多胚种子后,在单胚槾橘(Citrus tardiferax Hort.ex Tan)与多胚岩溪晚芦椪柑(Citrus reticulata Blanco)的杂交组合中,又发现高比例多胚种子,其比例一般为30%左右。为探明多胚来源,对多胚进行了分胚组织培养,获得同一种子来源的多胚苗。选取多组多胚苗进行叶形态比较分析。结果表明,同种子来源的多数多胚苗及亲本间叶形指数差异显著,但5胚苗中有3株跟母本相似,难以判断来源。筛选来自9个柑橘不同连锁群上的特异SSR引物对多胚苗进行标记分析,结果显示,多胚苗在多个标记上与母本不同,不可能为无性后代(珠心胚来源),均可能是有性苗;同组多胚苗之间既有部分在全部检查位点完全相同,表明其可能由同一合子胚分裂而来,也有部分在多个检查位点明显不同,可能来源于多卵受精形成的不同合子胚。

柑桔果实主要性状的遗传倾向研究

对10个柑桔杂交组合F1代768个株系的果实主要性状进行了3～5年的测定和统计分析，研究和探讨了柑桔果实性状的遗传倾向。结果表明，果实大小、果形、果实的可溶性固形物、糖、酸和Vc含量均为多基因控制的数量性状，呈连续性变异。F1代果实大小主要为趋小变异，果形主要呈趋中变异，果实可溶性固形物含量具有很强的超高亲优势，糖含量主要为超高亲或趋中变异，酸含量主要为趋酸变异。Vc含量遗传分布则较为分散。但其超高亲和超低亲后代频率均较高。由于酸含量的增高，F1代果实固／酸比值呈趋低变异。

柑橘不同类型砧木的种子和苗期性状

【目的】优良的砧木能促进果树生长、提高果实产量和品质、增强植株的抗逆性和适应性。目前我国柑橘生产上使用的砧木品系混杂,生长参差不齐,抗逆性差异明显,严重影响了苗木质量。通过对各种种质类型柑橘砧木的连续多年评价,分析不同遗传种质砧木的种子和苗期特征,鉴定影响砧木苗木质量的关键性状,建立规范柑橘砧木的评价标准,为筛选优良砧木单系提供指导。【方法】以104份柑橘砧木种质为材料,连续5年评价单果种子数、种子饱满度、千粒重和胚型等种子性状及播种后的出苗率、黄化率、立枯率、株高和茎粗等苗期性状,并对这些指标进行相关性、主成分分析以及不同年份间的变异系数分析。利用保守的直系同源序列(conserved ortholog sequences,COS)分子标记技术评价部分不同胚型砧木种质幼苗遗传背景的一致性,分析部分种质中微型反向重复转座元件(miniature inverted-repeat transposable element,MITE)片段插入与胚型的关联性。【结果】(1)枳、枳杂种和香橙的果实为多核和较多核,种子为混胚和多胚,种子饱满,大部分材料的种子千粒重为200 g以上;而宽皮柑橘为少核、较多核和多核,多胚,种子中等饱满,约一半种质的种子千粒重为100 g以下。(2)在苗期特性方面,香橙出苗率最高,黄化率较低,其幼苗对立枯病比较敏感;枳及其杂种的出苗率较高,黄化率也较高,但耐立枯病;宽皮柑橘的出苗率则较低,幼苗发生黄化和立枯的比例也比较低。比较播种后10个月内的幼苗生长势,枳的生长势最强,其次是枳杂种和香橙,而宽皮柑橘的生长势最弱。(3)对种子和苗期性状指标的相互关系及主成分分析结果表明,除黄化率和立枯率外,单果种子数、千粒重、饱满度、单胚比例、多胚比例、胚型、出苗率、幼苗株高和茎粗等指标之间具有极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)的相关性,且不同指标对主成分的方差贡献率有明显差异。通过主成分分析能够清楚地区分枳、枳杂种、香橙、宽皮柑橘及其他砧木的种质类型。除黄化率外,种子性状和苗期表现的指标在不同年份间的变异系数相对较低,说明这些性状较为稳定。(4)COS分子标记结果显示,单胚宽皮柑橘幼苗的变异程度比单胚枳及其他多胚或混胚类型种质的变异程度高;在单胚的柚和宽皮柑橘等种质中没有MITE片段的插入,而在多胚的香橙、宽皮柑橘、枳杂种等种质中有插入,但是在枳种质中无论是单胚还是多胚均没有检测到MITE片段的插入。【结论】柑橘砧木种子性状和幼苗性状指标之间高度相关,通常种子性状优异的砧木种质,其幼苗质量也较好。枳的种子和幼苗(播种后10个月)综合性状最好,其次是枳杂种和香橙,宽皮柑橘的种子和苗期综合性状最差。

甜橙新品种‘塔罗科血橙新系’

‘塔罗科血橙新系’是从塔罗科血橙珠心苗中选育出的新品种。该品种保持了塔罗科血橙树势强健的特点,比塔罗科血橙果大,单果质量180～250 g,果实品质优良,无核,较晚熟,丰产性强,抗病,适应性广,栽培容易,是优良的鲜食晚熟甜橙品种。