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基于低拷贝质粒的高产紫色杆菌素谷氨酸棒杆菌的构建和发酵
被引量:
1
1
作者
卢丹妮
洪沛雄
+1 位作者
张国超
叶燕锐
《现代食品科技》
CAS
北大核心
2023年第2期170-179,共10页
该研究以公认安全(Generally Recognized as Safe,GRAS)的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)为宿主,构建高产紫色杆菌素的重组菌株。利用谷氨酸棒杆菌天然大质粒pTET3的复制与分配元件,构建了低拷贝质粒pOK12CG1,该质粒在谷氨...
该研究以公认安全(Generally Recognized as Safe,GRAS)的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)为宿主,构建高产紫色杆菌素的重组菌株。利用谷氨酸棒杆菌天然大质粒pTET3的复制与分配元件,构建了低拷贝质粒pOK12CG1,该质粒在谷氨酸棒杆菌中的拷贝数约为6拷贝/基因组,且与谷氨酸棒杆菌常用质粒pEC-XK99E和pXMJ19兼容。以低拷贝质粒pOK12CG1为骨架构建了携带紫色杆菌素合成操纵子(vioABCDE)的质粒pCGvio,并分别以谷氨酸棒杆菌标准株ATCC 13032和插入序列(Insertion Sequence,IS)元件删除株为宿主,构建了7株合成紫色杆菌素的重组菌株。通过初步筛选,发现基于低拷贝质粒的重组菌株ATCC 13032/pCGvio,其紫色杆菌素产量(508.24 mg/L)高于基于中高拷贝质粒的重组菌株ATCC 13032/pECvio(376.16 mg/L),而基于低拷贝质粒的IS元件删除重组菌株ISDM023/pCGvio紫色杆菌素产量达到了610.13 mg/L。进一步采用正交实验设计对重组菌株ISDM023/pCGvio进行培养基体积比(V_(LB):V_(BHIS))、诱导时间和IPTG诱导剂浓度这3个因素的发酵条件优化。结果表明,在VLB:VBHIS为1:2、诱导时间为18 h、IPTG浓度为0.75 mmol/L的优化条件下,紫色杆菌素的摇瓶发酵产量可达了1007.47 mg/L。该研究成功构建了紫色杆菌素的谷氨酸棒状杆菌重组菌株ISDM023/pCGvio,为谷氨酸棒状杆菌高效合成紫色杆菌素奠定了实验基础,也为其它产物的高效合成提供参考。
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关键词
低拷贝质粒
谷氨酸棒状杆菌
紫色杆菌素
发酵优化
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职称材料
一种重金属铬污染土壤修复技术研究
2
作者
邝颖聪
黄成娣
+5 位作者
刘柳
洪沛雄
黄楚伟
熊钡
李永梅
邵友元
《广东化工》
CAS
2015年第22期138-140,共3页
本研究以两步法(淋洗法加电势迁移法)对受重金属铬污染的土壤进行的修复。实验分两个阶段进行,前期筛选出淋洗时间和淋洗剂用量,电压梯度以及电极处的p H作为变量,通过控制变量实验和正交实验得出可靠结果。结果表明,淋洗时间为72小时...
本研究以两步法(淋洗法加电势迁移法)对受重金属铬污染的土壤进行的修复。实验分两个阶段进行,前期筛选出淋洗时间和淋洗剂用量,电压梯度以及电极处的p H作为变量,通过控制变量实验和正交实验得出可靠结果。结果表明,淋洗时间为72小时,淋洗剂用量为1500m L时土壤中的重金属铬得到较好的去除。在电场离子电势迁移中,对铬迁移速率的影响从电压梯度,阳极p H到阴极p H依次递减。阴极p H可不控制,阳极p H在3~5范围内,电场梯度为1.5 V/cm时土壤中的铬去除率达到最高。
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关键词
两步法
土壤修复
铬污染
淋洗法
电场法
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职称材料
题名
基于低拷贝质粒的高产紫色杆菌素谷氨酸棒杆菌的构建和发酵
被引量:
1
1
作者
卢丹妮
洪沛雄
张国超
叶燕锐
机构
华南理工大学生物科学与工程学院
出处
《现代食品科技》
CAS
北大核心
2023年第2期170-179,共10页
基金
广东省基础与应用基础研究重大项目(2020B0301030005)。
文摘
该研究以公认安全(Generally Recognized as Safe,GRAS)的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)为宿主,构建高产紫色杆菌素的重组菌株。利用谷氨酸棒杆菌天然大质粒pTET3的复制与分配元件,构建了低拷贝质粒pOK12CG1,该质粒在谷氨酸棒杆菌中的拷贝数约为6拷贝/基因组,且与谷氨酸棒杆菌常用质粒pEC-XK99E和pXMJ19兼容。以低拷贝质粒pOK12CG1为骨架构建了携带紫色杆菌素合成操纵子(vioABCDE)的质粒pCGvio,并分别以谷氨酸棒杆菌标准株ATCC 13032和插入序列(Insertion Sequence,IS)元件删除株为宿主,构建了7株合成紫色杆菌素的重组菌株。通过初步筛选,发现基于低拷贝质粒的重组菌株ATCC 13032/pCGvio,其紫色杆菌素产量(508.24 mg/L)高于基于中高拷贝质粒的重组菌株ATCC 13032/pECvio(376.16 mg/L),而基于低拷贝质粒的IS元件删除重组菌株ISDM023/pCGvio紫色杆菌素产量达到了610.13 mg/L。进一步采用正交实验设计对重组菌株ISDM023/pCGvio进行培养基体积比(V_(LB):V_(BHIS))、诱导时间和IPTG诱导剂浓度这3个因素的发酵条件优化。结果表明,在VLB:VBHIS为1:2、诱导时间为18 h、IPTG浓度为0.75 mmol/L的优化条件下,紫色杆菌素的摇瓶发酵产量可达了1007.47 mg/L。该研究成功构建了紫色杆菌素的谷氨酸棒状杆菌重组菌株ISDM023/pCGvio,为谷氨酸棒状杆菌高效合成紫色杆菌素奠定了实验基础,也为其它产物的高效合成提供参考。
关键词
低拷贝质粒
谷氨酸棒状杆菌
紫色杆菌素
发酵优化
Keywords
low copy number plasmid
Corynebacterium glutamicum
violacein
fermentation optimization
分类号
TQ922.1 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
一种重金属铬污染土壤修复技术研究
2
作者
邝颖聪
黄成娣
刘柳
洪沛雄
黄楚伟
熊钡
李永梅
邵友元
机构
东莞理工学院
东莞市现代分离技术重点实验室
出处
《广东化工》
CAS
2015年第22期138-140,共3页
基金
广东省大学生科技创新项目(攀登计划专项资金)
项目编号pdjh2015a0515
东莞市社会科技发展项目(2014108101038)
文摘
本研究以两步法(淋洗法加电势迁移法)对受重金属铬污染的土壤进行的修复。实验分两个阶段进行,前期筛选出淋洗时间和淋洗剂用量,电压梯度以及电极处的p H作为变量,通过控制变量实验和正交实验得出可靠结果。结果表明,淋洗时间为72小时,淋洗剂用量为1500m L时土壤中的重金属铬得到较好的去除。在电场离子电势迁移中,对铬迁移速率的影响从电压梯度,阳极p H到阴极p H依次递减。阴极p H可不控制,阳极p H在3~5范围内,电场梯度为1.5 V/cm时土壤中的铬去除率达到最高。
关键词
两步法
土壤修复
铬污染
淋洗法
电场法
Keywords
two step methodology of restoration
soil restoration: the contamination of Chromium
showering methodology
electro-kinetic remediation
分类号
X53 [环境科学与工程—环境工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于低拷贝质粒的高产紫色杆菌素谷氨酸棒杆菌的构建和发酵
卢丹妮
洪沛雄
张国超
叶燕锐
《现代食品科技》
CAS
北大核心
2023
1
下载PDF
职称材料
2
一种重金属铬污染土壤修复技术研究
邝颖聪
黄成娣
刘柳
洪沛雄
黄楚伟
熊钡
李永梅
邵友元
《广东化工》
CAS
2015
0
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职称材料
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