高脂饮食与低剂量TCDD联合作用对雌性肥胖易感大鼠肝脏脂质代谢的影响

目的探讨高脂饮食(high fat diet,HFD)引起的肥胖与低剂量持久性有机污染物--2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)联合作用对肝脏脂质代谢的影响。方法采用2×2析因设计,研究HFD与低剂量TCDD(10 ng·kg^(-1)·d^(-1))联合作用对10周龄肥胖易感(obesity-prone,OP)雌性大鼠肝脏脂质代谢的影响。4组实验动物分别为:普通饮食无TCDD处理组(Cont+TCDD 0)、普通饮食低剂量TCDD处理组(Cont+TCDD 10)、高脂饮食无TCDD处理组(HFD+TCDD 0)及高脂饮食低剂量TCDD处理组(HFD+TCDD 10)。油红O染色观察肝脏脂肪沉积,酶法测定肝脏超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)的活性,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测肝脏脂质代谢相关基因mRNA表达。结果Cont+TCDD 0组、Cont+TCDD 10组、HFD+TCDD 0组及HFD+TCDD 10组大鼠体质量分别为(301.29±18.47)g、(312.16±20.45)g、(358.20±27.11)g及(373.83±26.50)g(F=7.43,P<0.01);肝脏油红O阳性区域比值分别为(1.26±0.16)%、(1.66±0.50)%,(9.06±1.54)%、(32.56±2.66)%(F=11.32,P<0.01),肝脏SOD酶活性分别为:(1.54±0.06)U/mg、(1.41±0.15)U/mg、(1.25±0.08)U/mg及(0.76±0.11)U/mg(F=4.31,P<0.05);肝脏GSH-PX酶活性分别为:(1511.00±69.30)U/mg、(1409.00±60.81)U/mg、(1232.00±65.05)U/mg及(965.00±83.44)U/mg(F=3.91,P<0.05)。对上述指标进行交互作用分析显示,高脂饮食与低剂量TCDD联合作用使肥胖易感的雌性SD大鼠体质量(F=6.33,P<0.05)及肝脏脂肪积聚(F=12.51,P<0.01)出现协同增加,肝脏抗氧化酶类SOD酶活性(F=4.15,P<0.05)和GPX酶活性(F=3.97,P<0.05)协同降低。对12种肝脏脂质代谢相关基因mRNA表达水平检测发现,高脂饮食与低剂量TCDD联合作用增加三酰甘油脂肪酶的限速酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)(F=3.69,P<0.05)及脂肪酸转位酶(cluster of differentiation 36,CD36)的mRNA表达(F=5.58,P<0.01),抑制激素敏感脂肪酶(hormone-sensitive lipase,HSL)的mRNA表达(F=4.01,P<0.05),其余9种基因表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论高脂饮食与低剂量TCDD联合作用可能协同增加肥胖诱导雌性大鼠肝脏脂质代谢异常。

免疫磁珠负性富集结合免疫荧光抗体技术检测卵巢癌患者外周血CTCs的方法建立和应用

目的建立基于细胞学水平的循环肿瘤细胞负性富集技术来检测卵巢上皮性癌(卵巢癌)患者外周血循环肿瘤细胞。方法体外培养卵巢癌SKOV-3细胞,按一定比例掺入到2 ml健康人外周静脉血中,应用免疫磁珠为基础的负性富集结合免疫荧光抗体技术对循环肿瘤细胞进行定量检测。评价该方法富集靶细胞的回收率,并用上述方法检测32例卵巢癌患者和10例对照者外周血中的循环肿瘤细胞。结果①在健康志愿者2 ml外周血掺入不同数目SKOV-3细胞的条件下,肿瘤细胞的回收率在64%~80%之间,掺入细胞间回归方程为Y=0.782X-1.408,相关系数为0.998。②10例对照者外周血中未检测到CK8/18+,18例卵巢癌患者的外周血中检测到CK8/18+,阳性率为56.3%(18/32,X^2=7.681,P<0.01)。③CTCs阳性与远处转移密切相关(X^2=5.776,P<0.05)。结论免疫磁珠负性富集结合免疫荧光抗体技术检测卵巢癌患者外周血循环肿瘤细胞的方法可能具有一定的临床应用价值。

上皮性卵巢癌患者外周血循环肿瘤细胞检测的临床意义

目的评估循环肿瘤细胞检测对上皮性卵巢癌的诊断价值,并探讨上皮性卵巢癌患者循环肿瘤细胞与临床病理特征的关系。方法应用免疫磁珠为基础的阴性筛选结合流式细胞术检测南通市第一人民医院65例上皮性卵巢癌患者、21例卵巢良性疾病患者及10例健康者外周血循环肿瘤细胞。多组比较采用Kruskal-Wallis H检验,两组比较采用MannWhitneyU检验,阳性率比较采用卡方检验,并绘制ROC曲线分析。结果根据受试者工作特性曲线分析:外周血循环肿瘤细胞的临界值为4.5(>4)个时,其AUC为0.806,诊断上皮性卵巢癌的灵敏度、特异度和阳性预测值分别为55.4%,96.8%和97.3%;外周血循环肿瘤细胞含量与上皮性卵巢癌患者的年龄、组织学类型、病理分化程度、腹腔积液量、肿瘤大小以及有无淋巴结转移无关(均P>0.05),而与肿瘤的国际妇产科联盟(FIGO)分期和远处转移有关(均P<0.05)。结论外周血循环肿瘤细胞检测对上皮性卵巢癌的诊断有一定的价值,与FIGO分期和存在远处转移相关。

BMI-1蛋白在慢性粒细胞白血病中的表达及意义

目的探讨BMI-1蛋白在慢性粒细胞白血病各期中的表达及意义。方法采用免疫化学SP法测定BMI-1蛋白在对照组及CML各期中的表达。结果 BMI-1蛋白在CML-AP/BP组的表达显著高于对照组和CML-CP组(P<0.05),CMLCP组和对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);BMI-1蛋白在CML-AP/BP未缓解组明显高于缓解组(P<0.05)。结论 BMI-1蛋白在CML-AP/BP骨髓单个核细胞中高表达且与CML发生急变及预后相关。

循环肿瘤细胞对卵巢癌的诊断价值

目的:通过与糖类抗原125(CA125)相比较分析循环肿瘤细胞在卵巢癌中的诊断价值。方法:采用免疫磁珠为基础的负性富集结合流式细胞技术定量检测65例卵巢癌患者、21例卵巢良性肿瘤患者及10例女性健康对照者外周血中的循环肿瘤细胞,同时用电化学发光法检测血清CA125浓度;并以受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC)评估循环肿瘤细胞检测对卵巢癌的诊断效能。结果:ROC分析显示,外周血循环肿瘤细胞的临界值为5. 5 (> 5)时,AUC为0. 679,诊断早期卵巢癌(Ⅰ/Ⅱ期)的灵敏度、特异度和阳性预测值分别为41. 7%、100%和100%;临界值为4. 5(> 4)时,AUC为0. 806,诊断卵巢癌的灵敏度、特异度和阳性预测值分别为55. 4%、96. 8%和97. 3%。而CA125检测在诊断早期卵巢癌(Ⅰ/Ⅱ期)和卵巢癌的阳性预测值均比较低,分别为61. 5%和91. 9%。结论:与CA125相比,在诊断卵巢癌方面循环肿瘤细胞具有较高的特异性和更好的阳性预测值。

不同检测系统尿微量清蛋白测定结果的可比性及偏倚评估

目的对两种不同检测系统尿微量清蛋白测定结果进行方法比对和偏倚评估,探讨其可比性。方法参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A2文件要求,以BeckmanIMMAGE800全自动免疫分析仪作为比对方法(X),日立7600全自动生化分析仪为实验方法(Y),用患者新鲜尿液分别用上述不同检测系统同时检测微量清蛋白,计算实验方法(Y)和比对方法(X)之间的相对偏差(SE%),以卫生部临检中心室间质评允许误差(Ea)范围的1/2为判断标准,评价各系统测定结果的可比性。结果实验系统与比较系统间具有良好的相关性(r=0.998);比较方法检测结果为(80.8±55.2)mg/L,实验方法为(84.9±57.7)mg/L,经配对设计的t检验,差异有统计学意义(t=9.504,P<0.01),实验方法明显高于比较方法;但以临床可接受性能判断标准(SE%<1/2CLIA′88TEa),认为实验系统的检测结果可接受。结论上述不同检测系统检测结果具有较好的相关性,临床可接受性能评价具有可比性。经过方法对比及偏差评估确定在该实验室使用生化仪替代免疫仪检测是可行的。

心脏瓣膜置换术后检测sEPCR的临床价值分析

目的分析血浆可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)对心脏瓣膜置换术后抗凝治疗及检测的临床价值。方法收集2005年1月~2016年6月于南通大学第二附属医院开展心脏瓣膜置换术的78例患者为研究对象,将其分为栓塞组(38例)和对照组(40例),两组均于术前1天、术后监测INR稳定后检测INR和sEPCR,两组间INR和sEPCR值的比较分析采用t检验。结果两组间术前1天及术后INR(术前:1.24±0.32 vs 1.23±0.19;术后:1.86±0.95 vs 1.93±0.97)的差异均无统计学意义(术前t=0.17,P=0.868;术后:t=0.32,P=0.748);sEPCR术前(34.91±9.14μg/L vs 35.56±10.22μg/L)差异均无统计学意义(t=0.30,P=0.768)。栓塞组栓塞时sEPCR(101.33±27.15μg/L)显著高于对照组(41.67±11.82μg/L)(t=12.69,P=0.000)。结论栓塞组sEPCR显著高于对照组,对其进行检测可以有效地指导临床开展抗凝治疗。

225例老年新型冠状病毒肺炎患者的临床特点分析

目的探讨老年新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者的临床特点。方法回顾性分析2020年1月25日至3月20日在武汉市第四医院收治的225例确诊的65岁以上的COVID-19患者,将其分为轻型、普通型、重型及危重型4组,收集并比较4组患者的临床资料,分析临床特点。结果225例患者中轻型4例(1.8%),普通型150例(66.7%),重型51例(22.7%),危重型20例(8.9%)。临床表现包括不同程度的发热、咳嗽、咳痰、胸闷喘息、胸痛、呼吸困难、乏力、腹泻、纳差、头昏、头痛,少数患者有咽部不适、鼻塞、流涕、全身肌痛、心悸等症状。白细胞计数(WBC)可正常、升高或降低,淋巴细胞计数(LYM)正常或不同程度的降低。绝大多数患者出现了不同程度的低蛋白血症,部分患者出现了红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、D-二聚体升高,少数患者有乳酸脱氢酶(LDH)升高。肺部影像改变以双侧病变居多。225例患者中死亡15例(6.7%),其中重型2例,危重型13例。结论老年COVID-19患者以呼吸道症状表现居多,合并多系统临床表现,重型、危重型患者病死率较高。

免疫增强型肠内营养治疗脓毒性休克合并急性胃肠损伤的临床疗效

目的 探讨免疫增强型肠内营养治疗脓毒性休克合并急性胃肠损伤(AGI)的临床疗效。方法 选择南通市妇幼保健院重症医学科2019年12月-2020年12月脓毒性休克患者64例为研究对象,随机分为研究组和对照组各32例。研究组使用免疫增强型肠内营养制剂给予肠内营养,对照组使用普通型肠内营养制剂给予肠内营养。比较两组治疗7 d后AGI改善情况、统计重症监护室(ICU)住院时间、抗感染治疗时间和机械通气时间。抽取外周血并分离血清,检测治疗前后肠屏障功能指标[D-乳酸和内毒素(ET)]以及核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)通路因子[NLRP3、Casepase-1和白细胞介素-1B(IL-1B)]水平。结果 研究组AGI总有效率高于对照组(P<0.05);研究组患者ICU住院时间、抗感染治疗时间和机械通气时间短于对照组(P<0.05),但两组28 d死亡例数比较,无统计学差异;治疗前两组血清中D-乳酸、ET、NLRP3、Casepase-1和IL-1B水平比较,无统计学差异;治疗后两组血清中D-乳酸、ET、NLRP3、Casepase-1和IL-1B水平均较治疗前降低(P<0.05);治疗后研究组血清中D-乳酸、ET、NLRP3、Casepase-1和IL-1B水平低于对照组(P<0.05)。结论 免疫增强型肠内营养可显著改善脓毒性休克的AGI状态,在一定程度上恢复肠黏膜屏障功能,并降低NLRP3/Casepase-1/IL-1B介导的过度炎症损伤。