2021—2022年温州市细菌性食源性疾病暴发事件流行病学及病原学特征分析

目的分析细菌性食源性疾病暴发事件的流行病学特征,探讨各致病菌分离株的血清学、分子分型、耐药性特点,为细菌性食源性疾病防控提供依据。方法对温州市2021—2022年细菌性食源性疾病暴发事件进行流行病学调查,对分离的副溶血弧菌、弯曲菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌、致泻大肠埃希菌用血清学分型、质谱、PCR等方法进行病原菌型别确定,采用微量肉汤稀释法、琼脂稀释法进行药敏试验及脉冲场凝胶电泳(PFGE)、全基因组测序技术进行分子分型分析。结果温州市细菌性食源性疾病暴发事件发生最多的场所为酒店餐饮,诱发原因较多为生熟交叉污染,发生季节大多在5-11月。114株目标菌从19起食源性疾病聚集事件分离出。55株副溶血弧菌以O10∶K4为主要血清型,其引起暴发事件的PFGE带型相似度较高。6株沙门菌为肠炎沙门菌血清型,MLST型别为ST11。44株空肠弯曲菌包含7种ST型,ST9079为主要的ST型。6株金黄色葡萄球菌均携带A型肠毒素,MLST型别包括ST88、ST188、ST25等3种ST型。3株致泻大肠埃希菌为肠聚集性大肠埃希菌(EAEC),包括ST156、ST4383两种ST型。空肠弯曲菌以四环素、萘啶酸、环丙沙星耐药率最高,肠炎沙门菌有多重耐药现象,副溶血弧菌除对头孢唑啉普遍耐药,对其他药物基本敏感。结论温州市细菌性暴发事件致病因素复杂,同一起事件有多克隆株污染致病的现象,以副溶血弧菌和弯曲菌为主要病原菌。在暴发事件处理中,应用PFGE、全基因组测序等多种分子分型技术可以进行全面溯源分析。

食品中李斯特菌检测方法探讨及药敏结果分析

目的探讨食品中李斯特菌(LM)检测的方法,以提高李斯特菌检出率。方法以国标法、MiniVIDAS和改良方法平行检测,结果经API鉴定;药敏试验用琼脂扩散法。结果在8类食品45件样品中,国标法检出7株可疑菌株,改良方法检出9株可疑菌株,经国标生化法鉴定其中均有1株为默氏李斯特菌,其他均为LM,而检出的所有菌株经API鉴定均为LM。MiniVIDAS法均未检出LM。药敏试验显示LM对万古霉素、红霉素、麦迪霉素、先锋Ⅴ、SMZ、庆大霉素、氨苄青霉素等全部敏感;而对萘啶酸、头孢氨塞肟、头孢克肟、奥普托欣、多粘菌素B等则全部耐药。结论改良方法对LM检出高于国标法,MiniVIDAS检测LM需进一步摸索,API法鉴定LM方便快捷。

室内游泳池水中各种病原菌的研究

目的:为全面分析室内游泳池水中存在的病原菌,以掌握游泳池水中微生物的污染情况。方法:采用增菌、平板分离和系统生化的方法分离鉴定病原菌,并对检出的某些病原菌菌株进行毒素分析。结果:333份游泳池水中共检出各种病原菌49株,检出率达14.71%,其中以嗜水气单胞菌检出率最高,检出率为5.7%。其次为金黄色葡萄球菌,检出率为3.9%。嗜水气单胞菌菌株中含H lyA基因的菌株占78.94%,含Aero基因的菌株占73.68%。金黄色葡萄球菌菌株中产肠毒素的占46.15%。结论:室内游泳池水中存在各种病原菌,且许多病原菌含毒力基因。显示目前游泳池的消毒方法不够完善。建议国家标准修订时增加致病菌检测项目,以便更好地对游泳池水的卫生状况进行综合评价。

温州市卖淫女性病感染情况分析

目的 为了解性病在高危人群中的分布情况和流行规律 ,更好地开展性病防治工作。方法 对温州市公安局收容教育所 2 0 8名卖淫女进行妇科检查 ,分泌物涂片、培养 ,血清做HIV抗体、梅毒RPR和TPHA检测。结果 2 0 8名卖淫女中有 15 4人患病。其中隐性梅毒 6.2 2 % (7/2 0 9) ,淋病 0 .48% (1/2 0 9)、非淋菌性宫颈炎 5 .74% (12 /2 0 9) ,尖锐湿疣 3 .3 5 % (7/2 0 9)霉菌性阴道炎 48.3 3 % (10 1/2 0 9)、细菌引起的阴道炎 3 5 .89% (75 /2 0 9)。这些人中许多为双重或多重感染者。结论 必须加强对该人群性病知识的宣传教育 ,做到防治结合 。

温州市流行性脑脊髓膜炎监测分析

目的了解浙江省温州市流行性脑脊髓膜炎(流脑)带菌状况,菌群分布,耐药特性和免疫抗体水平等情况,从而为合理制定有效的预防措施提供依据。方法按流脑监测方案,选择温州市鹿城区、瓯海区作为监测点,采集各年龄组健康人群咽拭子接种含双抗的巧克力色血琼脂进行脑膜炎奈瑟菌(Nm)分离培养,鉴定和药敏试验,同时采集血液分离血清用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测流脑A群和C群抗体。结果检出C群流脑患者1例(男,20岁);健康人群,Nm的带菌率为2.98%(10/336);健康人群流脑A群抗体的总阳性率47.09%(81/172),健康人群流脑C群抗体总阳性率35.47%(61/172)。结论流脑的发病率低和健康人群Nm的带菌率低,大部分人对A群流脑有免疫力有关,而对C群流脑的免疫力低,有必要加强A+C群流脑疫苗的接种,同时应密切注视流脑菌群的变迁,关注不同血清群菌株耐药性变化。

与O139霍乱弧菌血清交叉凝集的麦氏弧菌

目的:对基层实验室上送的6株疑似O139霍乱弧菌进行检测及研究。方法:参照1999年《霍乱防治手册》第五版及相关资料进行检测。结果:该6株菌均系与O139霍乱弧菌血清有交叉凝集的麦氏弧菌。结论:该批菌株不是O139霍乱弧菌,而是麦氏弧菌。

温州市食源性产单核李斯特菌污染调查

目的:掌握温州市各类食品中产单核李斯特菌(LM)的污染状况,初步确定易受污染的食品,为食源性疾病监测提供科学依据。方法:采集8大类食品及冰箱内壁涂抹物,按国标GB/T4789-30方法[1]进行分离培养,然后用生化、API鉴定。结果:218件样品中检出LM13株,检出率为5.96%。冰箱内壁涂抹物96件均未检出。结论:LM主要污染的食品为家禽类、熟食制品、淡水鱼及涮羊肉等。

温州地区鼠类携带耶尔森菌检测研究

目的:了解温州地区鼠类携带耶尔森菌的类型、其抗生素敏感试验以及小肠结肠炎耶尔森菌毒力基因分布等情况。方法:利用常规细菌分离方法从鼠类肠道内容物中分离耶尔森菌,同时进行抗生素敏感试验,并对小肠结肠炎耶尔森菌进行5种毒力基因检测。结果:2008年从温州地区采集的331份鼠类标本中共分离到18株小肠结肠炎耶尔森菌,9株中间型耶尔森菌、1株假结核耶尔森菌、1株弗氏耶尔森菌、1株克氏耶尔森菌。对18株小肠结肠炎耶尔森菌利用PCR方法检测毒力基因,只有一株仅携带ail毒力基因,其它菌株ail、ystA、ystB、yadA、virF毒力基因全部阴性。除对头孢唑啉、呋喃唑酮、阿莫西林有比较高的耐药性外,其他常用抗生素敏感率在73.7%～100.0%。结论:温州地区分离到的耶尔森菌以非致病性菌株居多且存在一定的地区差异。鼠类中小肠结肠炎耶尔森菌检出率最高为5.44%,应警惕小肠结肠炎耶尔森菌通过鼠类感染人和其它动物以及水、食品的危险。

单增李斯特菌阳性样品细菌存活检测及VIDAS检测LMO效率

目的:观察单增李斯特菌(L.monocytohenes以下简称LMO)存活率,探讨LMO检测的方法。方法:用国标GB/T4789-30-2003[1]与Mini VIDAS[2]平行检测。结果:10份阳性样品置冰箱(0℃以下)存放12个月后,用国标GB/T4789-30-2003检出8株菌株,检出率为80%,用Mini VIDAS法LMO阳性3份。结论:10件阳性样品存活率(国标法检出率)为80%,而Mini VIDAS法阳性率仅为30%。

一起由肠炎沙门菌引起食物中毒的实验室检测分析

目的食物中毒的病原菌检测。方法分别采集当日食物中毒学生肛拭子45份,当日相关工作人员肛拭子55份,剩余食物共34份,当日砧板、刀等物表涂抹物5份,饮用水样品5份等,样品参照GB/T4789-2003、WS/T.9-1996、WS/T81-1996、GB17012-1997进行检测。结果45份学生肛拭子检出肠炎沙门菌14株,占31.11%,同时在剩余食物凉拌豆芽和海带检出肠炎沙门菌。结论此次食物中毒是由凉拌豆芽和海带引起的肠炎型沙门菌食物中毒。

游泳池水中弧菌科病原菌的调查研究

目的:为了解室内游泳池中弧菌科病原菌的分布情况,预防和控制病原菌在游泳池中的传播流行。方法:采用碱性胨水增菌、TCBS平板分离和系统生化鉴定分离病原菌。并对分离到的菌株进行小白鼠毒力试验及药敏试验。结果:60份游泳池水中有25份水样检出了弧菌科病原菌,其中以嗜水气单胞菌为优势菌,其次为温和气单胞菌与非O1群霍乱弧菌。小白鼠毒力试验等证明了这些菌株都具一定的毒力。药敏试验结果表明这些弧菌科细菌存在一定的耐药现象,特别是对羟氨苄青霉素100%耐药,且嗜水气单胞菌、非O1群霍乱弧菌对头孢噻吩、头孢西丁也100%耐药。结论:弧菌科病原菌在室内游泳池水中具有较高的检出率。常规方法结合病原菌分析,能综合评价游泳池水的卫生状况。

2021年—2022年温州市食源性致病菌耐药特征及分子分型研究

目的 分析温州市食源性疾病监测中分离的致病菌的耐药及分子分型特征,提高本市食源性疾病暴发的早期识别与防控能力。方法 2021年—2022年选取1家哨点医院采集的腹泻粪便标本开展6种致病菌检测,对分离菌株进行PFGE分子分型和全基因组测序分析,并采用微量肉汤稀释法和琼脂稀释法进行药敏试验。结果 2021年—2022年监测标本中沙门菌、副溶血性弧菌、致泻性大肠埃希菌检出率分别为0.81%(15/1 849)、2.00%(37/1 849)、1.51%(28/1 849),弯曲菌、气单胞菌的检出率分别为8.57%(75/875)、3.54%(31/875)。其中沙门菌血清型以鼠伤寒沙门菌为主(33.33%,5/15),副溶血性弧菌以O10:K4血清型为主(89.19%,33/37),致泻性大肠埃希菌血清型以肠道集聚性大肠埃希菌(EAEC)为主(67.86%,19/28)。药敏结果表明,沙门菌、弯曲菌出现多重耐药。分子分型研究结果表明37株副溶血性弧菌分成10种PFGE型,75株弯曲菌分为59种ST型。结论 弯曲菌成为本监测点最重要的腹泻病原菌,并具很高的多重耐药性。副溶血性弧菌O10:K4血清型成为绝对优势血清型。重要致病菌病原谱的变化应得到关注。

2016—2020年温州市学生餐微生物污染状况监测分析

目的了解近5年温州市幼儿园及中小学食堂自制的学生餐微生物污染状况,为进一步保障学生餐安全提供依据。方法对2016—2020年温州市各县(市、区)采集的学生餐样品中的卫生指标菌(菌落总数及大肠埃希菌)和常见食源性致病菌(金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、沙门菌、单核细胞增生李斯特菌)进行检测,并用SPSS 18.0对测定结果进行统计学分析。结果2016年学生餐微生物污染状况较为严重,样品不合格率达23.58%,此后4年学生餐样品不合格率依次为6.27%、6.80%、9.06%、3.82%,5年来温州市学生餐样品不合格率总体呈逐年下降趋势(χ2=60.852,P<0.001)。主要表现为卫生指标菌中的大肠埃希菌污染严重,5年来不合格率依次为9.43%、5.64%、6.47%、6.41%、1.91%,呈逐年下降趋势(χ2=5.225,P=0.022);除2016年金黄色葡萄球菌和沙门菌的检出率(7.35%和9.91%)较高外,其余各年食源性致病菌的不合格率均处于较低水平。从学校类型来看,2016—2020年温州市幼儿园、小学和中学学生餐样品不合格率分别为10.34%、12.81%、6.90%,差异具有统计学意义(χ2=8.341,P=0.015)。2016—2020年温州市不同采样季度和监测地点学生餐微生物污染状况均未见显著差异(P>0.05)。在调整了监测学校类型、采样季度和监测地点等影响因素后,相对于2016年,2017—2020年学生餐微生物污染均显著降低(P<0.01)。结论2016年温州市幼儿园及中小学学生餐微生物污染状况最为严重,此后4年学生餐卫生状况有所改善,但仍存在不同程度的微生物污染。相关监管部门应根据监测结果进一步加强食品监管力度,防止学校食源性疾病的发生。

公共场所人群嗜肺军团菌血清抗体水平的调查研究

目的:了解温州市部分人群血清嗜肺军团菌的抗体阳性率以及嗜肺军团菌抗体(LP1～10)的分布特点。方法:采用微量凝集试验(MAT)测定就业人员血清中嗜肺军团菌1至10型抗体滴度。结果:1000例人群血清抗嗜肺军团菌抗体阳性89例,总阳性率为8.9%,其中暴露人群血清中嗜肺军团菌感染的阳性率11.6%(58/500),对照人群血清中嗜肺军团菌感染的阳性率6.2%(31/500),阳性率有显著性差异,暴露人群高于对照人群(χ2=8.991,P<0.05)。在阳性结果中,2种及以上血清型同时阳性为17份,占19.10%(17/89)。结论:我市健康人群普遍存在不同程度和不同血清型的嗜肺军团菌隐性感染,使用中央空调的场所是嗜肺军团菌感染的高危场所,应加强监测。

婴幼儿感染性腹泻病原微生物及耐药性分析

目的了解婴幼儿感染性腹泻微生物病原谱及耐药性。方法收集2013年3月—12月在温州市2家三甲医院门诊就诊的婴幼儿(≤5岁)腹泻患者的粪便标本,进行常见感染性腹泻致病菌培养与病毒核酸检测。结果 517份粪便标本中检出病原微生物201份,总检出率为38.88%。其中肠道致病菌检出74份(14.31%),以致泻性大肠埃希菌(36份)最多,其中O抗原分布广泛,2份带有STX2肠毒素基因;其次为沙门菌31份,其中肠炎沙门菌(7份)和鼠伤寒沙门菌(6份)为优势菌;腹泻相关病毒检出127份(24.56%),其中诺如病毒Ⅱ型(56份)、A组轮状病毒(40份)和诺如病毒Ⅰ型(24份)检出较多。沙门菌对氨苄西林耐药率达64.52%,致泻大肠埃希菌对氨苄西林、四环素和复方新诺明等耐药率均>70.00%,阪崎肠杆菌和嗜水气单胞菌对17种药物中的大部分敏感。利福平、新生霉素对所有细菌均100%耐药。结论温州市婴幼儿感染性腹泻病原菌以致泻性大肠埃希菌、沙门菌为主要流行株;病毒以诺如病毒、A组轮状病毒为主要流行株,应加强主动监测,选择合适的抗生素治疗细菌性腹泻。

温州市婴幼儿感染性腹泻疾病中阪崎肠杆菌的检测研究

目的了解温州市婴幼儿感染性腹泻疾病中阪崎肠杆菌的感染情况,为腹泻病的防治提供依据。方法收集某医院2013年2月-2013年11月儿科门诊5岁以下婴幼儿感染性腹泻肛拭标本256份,参考GB 4789.40-2010进行检测,采用纸片扩散法对检出菌株进行药敏试验、血清学分型和生化分型。结果从256份婴幼儿感染性腹泻中检出3株阪崎肠杆菌,检出率为1.17%。5株阪崎肠杆菌(其中2株为标准菌株)耐药性分析结果,对诺氟沙星、四环素、复方新诺明、阿米卡星、氨苄西林、壮观霉素、阿莫西林/克拉维酸等100%敏感,对红霉素、利福平、新生霉素、头孢噻吩等100%耐药。血清学结果 A1株为01型,A2和A3株为03型。生化分型结果 A1、A2、A3和标准菌株CICC21560全部为阪崎克罗诺杆菌,标准菌株ATCC51329为穆汀斯克罗诺杆菌。结论温州市5岁以下婴幼儿存在阪崎肠杆菌感染,应加强奶粉和腹泻婴幼儿的监测力度,预防和控制阪崎肠杆菌污染引起的婴幼儿腹泻。

温州市单核细胞增生李斯特菌的毒力基因及血清学分型和分子分型研究

目的了解温州市近十年单核细胞增生李斯特菌分离株的血清型、毒力基因及分子分型特征。方法用聚合酶链式反应(PCR)方法对单核细胞增生李斯特菌进行血清型及毒力基因检测;用多位点序列分型(MLST)方法对单核细胞增生李斯特菌进行分子分型,并绘制MLST数据的最小生成树。结果 97株单核细胞增生李斯特菌分离株分为4种血清型,以血清型1/2b、1/2a为优势血清型,占比分别为48.45%(47/97)、35.05%(34/97);而毒力基因iap、prfA基因阳性率均为100.00%(97/97),hlyA、inlA基因阳性率均为97.94%(95/97),plcB基因阳性率为96.91%(94/97)。其中患者分离株5种毒力基因阳性率均为100.00%(6/6)。97株单核细胞增生李斯特菌分离株得到20个MLST型别,其中ST87型是优势型别,其次为ST121和ST9,ST1和ST779型是患者特有的,ST2、ST3、ST5型分布于食品和患者分离株。结论温州市不同来源的单核细胞增生李斯特菌分离株分子型别呈多态性,食品和患者分离株存在相同的ST型,且这些菌株大部分携带毒力基因,具有潜在的致病性,因此食品中单核细胞增生李斯特菌污染的潜在风险不容忽视。