经尾动脉入路原发性肝癌大鼠TACE模型的构建

目的建立经尾动脉途径肝癌大鼠经导管肝动脉化疗栓塞术(TACE)模型,并探讨其可行性、有效性和安全性。方法 0.01%二乙基亚硝胺(DEN)溶液连续诱导大鼠12周建立肝癌模型,12周后通过MRI明确肿瘤大小。当最大肿瘤长径>5 mm时,在DSA引导下经尾动脉插管,并将微导管置于肝固有动脉进行TACE,治疗后复查CT了解瘤内碘油沉积。观察大鼠术后1周生存率及相关并发症情况。检测术前及术后3、7 d大鼠ALT、AST、TBil及CRE水平。术后7 d行肝、肺、双肾及脾脏组织病理学检查。结果 TACE模型成功建立,尾动脉置管用时(6.9±1.4) min。造影显示大鼠肝内肿瘤染色明显,术后CT显示瘤内碘油沉积密实,组织病理学结果显示肿瘤大面积坏死,坏死区周缘Caspase3、HIF-1 alpha表达水平明显升高。肺、肾、脾脏大体标本未发现明显异位栓塞。所有大鼠行为无异常。术后3 d大鼠ALT、AST、TBil较术前明显上升(P<0.05),术后7 d明显下降,但仍高于术前(P<0.05),手术前后CRE水平无明显差异(P>0.05)。结论 经尾动脉入路可以安全、有效地完成对大鼠原发性肝癌的TACE治疗。

TIPS治疗肝细胞癌伴门静脉癌栓及食管胃静脉曲张出血

目的 观察TIPS治疗肝细胞癌(HCC)伴门静脉癌栓(PVTT)及食管胃静脉曲张出血(EGVB)的价值。方法 回顾性分析30例因EGVB接受TIPS的HCC伴PVTT患者,观察TIPS技术成功率、止血率,TIPS前后门静脉压力梯度(PPG),术后再出血率、支架分流道通畅率、相关并发症发生率及患者总生存期(OS)。结果 30例TIPS技术成功率和止血率均为100%;TIPS前后平均PPG分别为(30.9±8.5)mmHg及(20.6±6.3)mmHg,差异有统计学意义(t=11.587,P<0.001)。TIPS并发症包括胆管损伤2例、肝动脉损伤1例、Ⅰ~Ⅱ级肝性脑病5例、Ⅲ级肝性脑病1例;未见肿瘤破裂或术后急性肝衰竭等并发症。随访过程中3例再出血,5例支架分流道闭塞。截至随访末共25例死亡,死因包括感染性休克1例、消化道出血1例、肿瘤进展或肝衰竭23例;中位OS为6.5个月。结论 TIPS治疗HCC伴PVTT及EGVB较为安全,可为后续局部治疗及联合药物系统治疗提供机会。

原位肝癌小鼠微波消融术后复发模型的构建

目的构建可模拟亚致死热应激状态的体外细胞及活体小鼠原位肝癌不完全热消融模型。方法将悬浮的单层H22细胞分为4组(37℃、42℃、47℃、50℃)分别置于6孔培养板中培养,热处理前8 h更换新鲜完全培养基,随后恒温水浴15 min进行热处理以构建亚致死热应激体外模型并置于37℃培养箱中继续培养。48 h后进行Western Blot实验检测EMT表型,并通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测细胞活力。沿小鼠腹中线开腹后暴露肝脏并于肝包膜下注射H22细胞(5×10^(6)个),待瘤体长径约等于8 mm后将小鼠随机分为完全消融组(complete ablation group,cMWA)、不完全消融组(incomplete ablation group,iMWA)及假手术组,并在开腹直视下沿瘤体长轴行微波消融以建立原位肝癌不完全热消融模型。消融后第14天复查MRI并采集肝脏标本进行组织病理学检查。结果接种H22细胞约14天后小鼠肿瘤达到预定肿瘤长径范围,肿瘤平均长径为(9.32±0.83)mm。消融术后14天,不完全消融组肿瘤平均长径(12.93±1.51)mm,且较消融前明显增大。免疫荧光染色结果显示iMWA组残瘤内见大量中性粒细胞浸润。Western blot结果显示亚致死热应激状态下肝癌细胞EMT表型的恶性转变,其中波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达上调,E钙黏附蛋白(E-cadherin)表达下调。结论亚致死热应激状态的体外细胞及活体小鼠原位肝癌不完全热消融模型成功构建,该状态下残瘤内大量中性粒细胞浸润,同时肝癌细胞可能转变为更具侵袭性的间充质表型并导致肿瘤进展。