丹参提取物对大鼠心肌缺血后血管新生的保护作用研究

目的血管新生是治疗缺血性心脏病(ischemic heart disease,IHD)非常有效的一种方法。本研究的主要目的是探究丹参提取物对大鼠心肌缺血后血管新生的保护作用及其机制。方法48只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、丹参提取物组和阳性药组,每组12只。手术结扎左冠状动脉前降支(left anterior descending,LAD)建立心肌缺血模型,造模成功后丹参提取物组以浓度为0.2928 g/kg的丹参提取物药液灌胃,阳性药组以浓度为1 mg/kg瑞舒伐他汀药液灌胃,模型组、假手术组给予生理盐水灌胃。干预28天后通过超声评估心功能,通过激光多普勒评估心脏血流的变化。体外实验采用氧—葡萄糖剥夺法(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),通过CCK-8实验和Matrigel成管实验评估丹参提取物对HUVECs的保护作用,通过Western blots检测通路蛋白的表达变化。结果丹参提取物不仅可以改善心肌缺血大鼠的心功能(P<0.01),增加心脏血流量(P<0.01),改善心肌细胞形态和炎症,还可以增加内皮细胞的活力(P<0.05),促进细胞体外成管。机制上丹参提取物能够促进OGD诱导的内皮细胞分泌骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP2)(P<0.01),下调Delta-Like配体蛋白-4(Delta-like 4,Dll4)和Notch1蛋白的表达(P<0.01,P<0.01)。结论丹参提取物可能通过调节BMP2-Dll4/Notch1通路促进血管新生进而保护心功能。

基于HSP27-TLR4/NF-κB通路的芪参颗粒对大鼠心肌梗死后炎症反应的影响

目的基于HSP27-TLR4/NF-κB通路探讨芪参颗粒对大鼠心肌梗死后炎症反应的影响及潜在机制。方法48只雄性SD大鼠分别进行左冠状动脉前降支结扎术造模或假手术,将假手术大鼠分为对照组、芪参颗粒对照组,造模大鼠分为模型组和芪参颗粒组。术后24 h予芪参颗粒(2.352 g/kg)或蒸馏水灌胃,每日1次,连续1周。超声检测大鼠心功能,免疫荧光、HE和Masson染色评估心肌结构、炎症及纤维化改变,ELISA检测血浆热休克蛋白27(HSP27)含量,Western blot检测心肌组织Toll样受体(TLR)4和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠左室舒张末期前壁厚度、左室收缩末期前壁厚度(LVAWs)、左室舒张末期后壁厚度(LVPWd)、左心室收缩末期后壁厚度、射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)显著降低(P<0.01),左室舒张末期内径、左室收缩末期内径(LVIDs)、左室舒张末期容积、左室收缩末期容积(LVESV)显著升高(P<0.05,P<0.01);心肌细胞大量坏死,梗死边缘区心肌细胞代偿性肥大且排列紊乱,血管旁和心肌间质内大量炎性细胞浸润和胶原纤维沉积;血浆HSP27含量显著增加(P<0.01),心肌组织TLR4、NF-κB p65蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,芪参颗粒组大鼠LVAWs、LVPWd、EF和FS显著升高,LVIDs、LVESV显著降低(P<0.05,P<0.01);心肌组织炎性细胞浸润、心肌细胞存活情况和间质纤维化情况显著改善;血浆HSP27含量显著减少(P<0.01),心肌组织TLR4、NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论芪参颗粒可能通过降低血浆HSP27含量抑制TLR4/NF-κB通路,从而减轻炎症反应,改善心肌梗死后心室重构和心功能下降。

芪参颗粒及其拆方对压力负荷所致心肌肥厚作用的实验研究

目的 研究芪参颗粒及其拆方对压力负荷所致心肌肥厚的改善作用。方法 通过微创主动脉弓缩窄术建立C57BL/6J小鼠心肌肥厚模型,术后随机分为模型组及芪参颗粒组、益气组、温阳活血解毒组。另设假手术组为对照,每日灌胃给予相应药物或溶剂。治疗4周后通过超声心动图评价小鼠生理状态下左室舒张末期后壁厚度(Left ventricular posterior wall thickness at end-diastolic, LVPWd)、左室收缩末期后壁厚度(Ieft ventricular posterior wall thickness at end-systolic posterior, LVPWs)、左室舒张末期内径(Left ventricular internal dimension at end-diastolic, LVIDd)、左室收缩末期内径(Left ventricular internal dimension at end-systolic, LVIDs)和收缩功能[左室射血分数(Ejection fraction, EF)、短轴缩短率(Short-axis shortening rate, FS)];称量[体重(Body weight, BW)、心脏质量(Heart weight, HW)、肺脏质量(Lung weight, LW)、胫骨长度(Tibial length, TL)]并计算脏器系数;通过大体标本、WGA染色和Masson染色观察心脏、心肌细胞形态改变及纤维化程度。结果 与假手术组比较,模型组小鼠的LVPWd、LVPWs、LVIDd、LVIDs值增加,EF、FS值降低;HW/BW、HW/TL升高;心脏明显增大,心肌细胞平均横截面积增加,心肌纤维化严重(P<0.01)。与模型组比较,芪参颗粒组及其拆方组上述指标的异常变化得到不同程度的改善(P<0.05,P<0.01),但全方组效果最佳。温阳活血解毒组作用与芪参颗粒组相似,而益气组显示出改善的趋势,仅部分指标达到显著性差异。结论 芪参颗粒及其拆方具有改善心肌肥厚、心肌纤维化、心脏功能的作用,方中益气药、温阳活血解毒药存在协同作用,全方可发挥最佳疗效。

不同细胞来源外泌体调节心肌梗死后血管新生及其机制的研究进展

综述外泌体的形成和分离、鉴定方法及不同细胞来源的外泌体在调节心肌梗死后血管新生中的作用及机制,为心肌梗死的治疗提供新思路。心肌梗死是由动脉粥样硬化血栓形成或心肌氧失衡引起的一种冠状动脉疾病,是世界范围内死亡的主要原因。成年哺乳动物心脏再生能力有限,且心肌自身所能调动的促血管生成能力也非常有限,因此,寻找合适的治疗方法来促进心肌梗死后的血管新生是目前心肌梗死治疗研究的热点。外泌体是细胞外小泡中的一部分,携有脂质、蛋白质、microRNAs(miRNAs)、mRNAs、长链非编码RNA(LncRNAs)和DNA等物质,而且外泌体是细胞通讯的重要传递物质,能够参与调节心肌梗死后血管新生过程。

丹七片基于CaMKⅡ-NLRP3通路改善心肌纤维化的药效机制研究

本研究旨在基于CaMKⅡ-NLRP3通路探究丹七片改善心功能、减轻心肌纤维化的药效机制。采用左冠状动脉前降支结扎术制备小鼠心肌纤维化模型,利用BATMAN数据库和分子对接分析、苏木精-伊红染色、马松染色、免疫荧光染色、蛋白免疫印迹等技术评价小鼠心功能、病理改变和通路蛋白表达情况。结果显示,丹七片治疗后小鼠心功能明显改善、胶原沉积减少、纤维化程度减轻,钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase typeⅡ,CaMKⅡ)活化以及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)通路的蛋白质表达明显减少。结果表明,丹七片通过抑制CaMKⅡ-NLRP3通路改善心功能,减轻心肌纤维化。