人小细胞肺癌定位显象的实验研究

用单克隆抗体进行肿瘤诊断治疗研究是目前解决肿瘤诊治的新途径。大量肿瘤动物模型、临床病例的定位研究表明,放射免疫定位(Radioimmuno-localization)结合了单抗特异性强、放射性同位素灵敏度高的优点,对肿瘤原发灶、转移灶的体内检测可能有着较好的前景。

抗人小细胞肺癌单克隆抗体导向治疗的实验研究

用移植人小细胞肺癌的裸鼠作为肿瘤模型,研究了碘标记单克隆抗体2F7在体内的肿瘤显fi,抗体、药物偶合物的连接,导向药物2F7-HSA-MTX的体外细胞毒及体内肿瘤抑制作用。结果显示,碘标记抗体在荷瘤小鼠体内有确切的肿瘤定位作用,清晰的肿瘤显像持续到168h以后。间接连接的导向药物可携带更多的MTX分子,细胞毒作用比直接连接提高2倍。导向药物可使荷瘤小鼠的长瘤潜伏期延长,长瘤率降低,抑瘤率为84％和自然生存期延长。

单克隆抗体及F(ab′)_2片段在小鼠体内的药物动力学研究

用^(125)I标记单克隆抗体(IgG2a)和相应片段F(ab′)_2,比较它们经静脉或腹腔不同途径注射后在小鼠体内的药物动力学变化。结果显示,同一种抗体形式(完整抗体或F(ab′)_2经iv或ip不同途径给药时,整体排泄率、血液清除率和生物半衰期等无明显差异(P>0.05);而相同途径给药时,完整抗体与F(ab′)_2比较,二者的Ke、T1/2、TBCL显著差异(P<0.05-0.01),完整抗体腹腔注射的生物利用度94％。提示:F(ab′)_2片段有利于改善肿瘤体内定位显象,腹腔注射是有效的给药途径。

抗人小细胞肺癌单克隆抗体的重链变区基因的体外扩增、克隆和序列分析

本文从抗人小细胞肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,合成第一链cDNA,直接用PCR技术(polymerase chain reaction)扩增出351bp的重链变区基因(V_H),克隆至pUCV_(NP)-PCR载体上,经筛选得一批插入片段为351bp的阳性克隆,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了该单克隆抗体的重链可变区基因。

用基因定点突变技术改建—免疫球蛋白重链可变区基因的通用表达载体

本文介绍了一种简便的、具有高突变率的基因定点突变方法。应用Bio-Rad Muta-Gene Phagemid Kit,在一装有表达载体上的抗NP(4-hydroxyl-3-nitrophenacetyl)免疫球蛋白重链可变区基因的J_a区引进BstE Ⅱ酶切位点,从而改建成一种能用于表达免疫球蛋白重链可变区基因的通用表达载体。应用该Kit,基因定点突变率达43％。

PCR技术在单克隆抗体cDNA的筛选及标记同位素探针上的应用

以往对cDNA克隆鉴定过程中,经斑点杂交筛选出的克隆数较多,在进一步的鉴定中不可避免地要进行质粒扩增、抽提、纯化酶解、片段分离等许多步骤。本文对这一步的鉴定采用了PCR技术,这样便可省去酶解及片段分离等繁琐步骤。且由于扩增片段纯净,故可直接用于Southern blot鉴定及DNA序列分析。 本文另一新的探索是利用PCR法标记探针,尤其是小片段DNA探针,其不同于常用的缺口平移和随机引物延伸标记。由于它在扩增过程中只有位于两个引物间的片段才能标上同位素,所以标记后的探针量大、比放射性强,加之PCR合成仪的出现,使此法更加高效、简便安全。

一种简便的适用于特异扩增单抗可变区基因的杂交瘤细胞的RNA制备方法

在分子生物学实验中,欲合成cDNA必先制备高纯度、未降解的RNA。目前较为常用的有氯化铯超速离心,但因该法操作时间长需要昂贵的实验试剂和设备,给实验带来较大的不便。

抗原分子量50KD和42KD的人体小细胞肺癌单克隆抗体

利用人体小细胞肺癌细胞株为免疫原,从融合的杂交瘤中筛选出4B3,2F7和6H10等一批小细胞肺癌单克隆抗体。杂交瘤染色体数为101~105,分泌抗体都是鼠IgG2a型在体外用ELISA进行的结合反应中,4B3和2F7只与小细胞肺癌细胞株起反应,而与肺腺癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、白血病、正常肺等无明显反应。

人小细胞肺癌2F_7抗原的特性研究

肿瘤抗原有肿瘤特异抗原(TSA)、病毒诱导抗原和癌胚抗原,后两者又称为肿瘤相关抗原(TAA)。本世纪五十年代就已证实了近交系小鼠中经化学致癌剂诱发的肿瘤含有肿瘤特异性移植抗原(TSTA)。2F_7抗原是存在于人小细胞肺癌(SCLC)H128细胞株上的与2F_7单抗相应的肿瘤抗原,在SCLC的瘤组织中明显表达。

小鼠抗人小细胞肺癌单抗轻链可变区基因的体外扩增、克隆及序列分析

本文通过一对分别位于小鼠免疫球蛋白轻链可变区基因 FR1骨架区和 FR4骨架区的通用引物,利用 PCR 技术首次从小鼠抗人小细胞肺癌2F7杂交瘤细胞染色体组总 DNA 中直接扩增出相应的免疫球蛋白轻链可变区基因,扩增出的基因片段经引物上引进的两个限制性内切酶位点直接克隆到装有人免疫球蛋白轻链恒区的克隆载体 pGEM-7Zf(+)-V_kPCR 中的 EcoR1和 BglⅡ内切酶位点之间.通过对其进行顺序分析,结果表明我们克隆得到了免疫球蛋白轻链可变区基因,其长度为318bp.

粒系白血病白细胞分化抗原的表达与白血病分型

近年来,生物技术的迅速发展,使白血病的诊断及研究进入了一个较高的水平。单克隆抗体(单抗)的应用,超越了形态及组织化学的局限,能从另一角度观察正常和恶性细胞的表型,充实了血液细胞分化发育过程与发病关系的概念,并在临床诊治及预后评价方面起到一定作用。本实验探讨粒系白血病的白细胞分化抗原的表达以及白血病分型。

全国首届单克隆抗体和肿瘤讨论会在杭州举行

由中华医学会肿瘤分会、中国抗癌协会基础研究组召开的我国首次单克隆抗体和肿瘤讨论会于1986年9月21日~24日在杭州举行。参加会议的有来自辽宁、河北、内蒙、宁夏、陕西、四川、河南、江苏、浙江、湖北、湖南、江西、广东、福建、北京、上海、天津等省市及中国人民解放军医学科研系统的140余名代表,会上共交流了70余篇论文。

23例白血病患者ets-2癌基因分析

应用人ets-2特异探针pH33基因片段,通过Southern印迹杂交,对23例白血病患者进行ets-2癌基因分析。结果显示:3例白血病病人细胞出现ets-2基因重排。这在文献中尚未见报道。作者同时讨论了癌基因在白血病发病中的作用。

单克隆抗体在淋巴细胞白血病中的临床应用

本实验应用二十一种抗人白细胞分化抗原的单克隆抗体。通过ABC(avidin-biotin peroxidase complex)免疫酶标方法对十二例淋巴细胞白血病病人进行了免疫表型分析。提示单克隆抗体在淋巴细胞白血病病人的临床分型、治疗及预后估计上很有意义。粒、淋双表达白血病其本质不明,因而治疗上至今还没有一个理想的方案。

抗ras P_(21)单克隆抗体在恶性组织和正常组织中ras P_(21)表达的研究

ras P_(21)是ras癌基因族的产物。为探索抗rasP_(21)单克隆抗体(简称P_(21)单抗)临床应用的可能性及肿瘤的癌变机理,作者通过ABC免疫试验和免疫印迹试验,用我室研制的P_(21)单抗SCI-oncogemaI分析了约137例人肿瘤组织和正常组织的ras P_(21)表达。 材料和方法 一、标本的组织类型 原发性肺癌38例,其中腺癌19例、鳞癌15例。

人小细胞肺癌放射免疫治疗的实验研究

本文介绍了^(131)I标记抗人小细胞肺癌单克隆抗体(2F_7)免疫显像及免疫治疗的实验结果。^(131)I2F_7能与荷瘤裸鼠体内的小细胞肺癌是特异性结合,使肿瘤清晰显示。与对照组相比,能明显地抑制肿瘤的生长和延长荷瘤裸鼠的存活期。

建立Ig基因富集的DNA库进行2F7单克隆抗体基因克隆

用小鼠型抗人小细胞肺癌单克隆抗体的2F7杂交瘤细胞DNA,经限制性内切酶EcoRI或BamHI完全酶解,通过Southern blot,用小鼠Ig基因Cr_(2a)、V_(H)、J_(H)和E_(H)作探针,富集阳性DNA,同时用pSV_2neo质粒为载体与这些DNA重组,经筛选获得了一批杂交阳性的克隆。

STUDY OF RADIOIMMUNOIMAGING WITH MONOCLONAL ANTIBODY AGAINST THE PATIENTS WITH SCLC

It is an Innovative way to diagnose with cancer with monoclonal antibody (MAb) in vivo. 1-3 After proving MAb 2F7 (IgG2a) had a higher affinity and better specificity to human small cell lung cancer cells in vitro, 4.5 and gave a very clear cut γ- camera pictures for the xenografts of human small cell lung cancer (SCLC) born by nude mice, 6 the possibility of clinical radioimmunoimaging was studied with the MAb 2F7 and its fragment F (ab') 2.

抗人纤维蛋白原降解产物单克隆抗体4D4的研制

肿瘤患者易出现DIC,并人纤维蛋白原降解产物(FDP)与肿瘤的相关性已从病理上得到肯定。我们用人纤维蛋白原免疫小鼠,得到抗人纤维蛋白原降解产物单抗4D4,免疫双扩散鉴定为小鼠IgG2a型。

抗体分子结构改造与基因工程抗体

近十年来,由于免疫学技术的发展并与分子生物学、生物物理学、基因工程及电子计算机等知识技术的渗透和融合,使科学家能从分子水平对抗体分子(Ab)——即免疫球蛋白(Ig)分子的蛋白结构、空间构型、编码基因及各功能区的结构与功能特点等进行较深入的研究,从而开始了按人们的要求对Ab分子作结构的改造,设计研制具有特定反应性及功能性的Ab—Ig分子的研究领域,形成了规代免疫学与蛋白质工程结合的高技术研究——抗体基因工程。这样把70年代中期以单克隆抗体——杂交瘤技术为重要标志的现代免疫学变革继续深入进行,为免疫学的基础研究及抗体的应用研究开拓了新的方向。