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猪圆环病毒2型感染PK-15细胞中外泌体的鉴定及其对细胞增殖和凋亡的影响
被引量:
5
1
作者
陈洪博
段滇宁
+5 位作者
胡瑶
杨润泽
洪麒翔
李煜
邱龙新
杨小燕
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第7期1688-1698,共11页
旨在分离感染PCV2的PK-15细胞分泌的外泌体,探讨其在PCV2感染淋巴细胞中的作用。提取PCV2感染PK-15细胞上清液中的外泌体,利用透射电镜观察外泌体形态、纳米颗粒跟踪分析测定外泌体粒径、Western blot检测外泌体标记蛋白分子(CD81、TSG1...
旨在分离感染PCV2的PK-15细胞分泌的外泌体,探讨其在PCV2感染淋巴细胞中的作用。提取PCV2感染PK-15细胞上清液中的外泌体,利用透射电镜观察外泌体形态、纳米颗粒跟踪分析测定外泌体粒径、Western blot检测外泌体标记蛋白分子(CD81、TSG101);PKH67标记外泌体后检测细胞对外泌体的摄取;提取PCV2-外泌体基因组,检测PCV2 Rep和Cap基因;利用间接免疫荧光试验检测PCV2-外泌体感染PK-15细胞后PCV2病毒定位;通过绝对定量PCR检测PCV2-外泌体对淋巴细胞的感染率;利用CCK-8法检测淋巴细胞增殖;利用Annexin V-FITC/PI检测淋巴细胞凋亡率。透射电镜和外泌体粒径分析结果显示,PK-15细胞分泌的外泌体为双层膜的囊泡,直径30~200 nm;Western blot结果显示PK-15细胞分泌的外泌体存在特异性标记蛋白CD81和TSG101;外泌体摄取试验结果显示PCV2-外泌体能够被细胞摄取;PCR结果表明PCV2-外泌体基因组中含有PCV2 Rep和Cap基因;间接免疫荧光结果显示,与PCV2直接感染相比,PCV2-外泌体感染的淋巴细胞中,PCV2病毒拷贝显著升高,差异明显(P<0.01),外泌体裂解后感染淋巴细胞能力与PCV2病毒无显著差异;PCV2-外泌体可显著抑制淋巴细胞增殖(P<0.01或P<0.05);PCV2-外泌体显著提高淋巴细胞凋亡率。PCV2感染PK-15细胞的外泌体中携带病毒基因,感染淋巴细胞后使细胞增殖降低和细胞凋亡增加。
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关键词
外泌体
PCV2
淋巴细胞
细胞增殖
细胞凋亡
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职称材料
急性热应激对鸡呼吸系统损伤及肺脏热休克蛋白表达的影响
被引量:
6
2
作者
段滇宁
陈超
+4 位作者
杨润泽
洪麒翔
陈洪博
唐姝
张晓辉
《畜牧与兽医》
北大核心
2021年第3期65-70,共6页
为探讨热应激对鸡肺脏组织损伤的影响,将60只35日龄SPF鸡随机分为对照组,热应激1、2、3、5、10 h组,每组10只,试验开始后环境温度迅速从25℃升高到35℃,观察热应激组鸡临床症状,热应激结束迅速剖杀、取病料,检测血清pH值、乳酸脱氢酶(L...
为探讨热应激对鸡肺脏组织损伤的影响,将60只35日龄SPF鸡随机分为对照组,热应激1、2、3、5、10 h组,每组10只,试验开始后环境温度迅速从25℃升高到35℃,观察热应激组鸡临床症状,热应激结束迅速剖杀、取病料,检测血清pH值、乳酸脱氢酶(LDH)、钾离子和钙离子浓度,石蜡切片检测肺脏组织结构,Western blot检测肺脏组织中热休克蛋白(HSPs)表达量。结果显示:与对照组相比,热应激组血清pH值显著升高(P<0.05),LDH水平均极显著升高(P<0.01),随着热应激时间增加,血钾和血钙浓度开始降低,热应激5、10 h后血钾和血钙浓度显著减低(P<0.05);病理组织学结果显示热应激后,肺组织内血管充血,肺房结构基本完整,热应激5 h后肺房内有大量的红细胞存在,热应激10 h肺房内的异物减少,但肺上皮细胞大量脱落,组织结构损伤严重;Western blot结果显示与对照组相比,HSP27和HSP72表达量极显著升高(P<0.01)HSP60表达量在热应激1 h后显著升高(P<0.05),随后呈降低的趋势,HSP90表达量在热应激5 h后显著升高(P<0.05),随后呈降低的趋势,HSC70表达量无明显变化。热应激可对鸡呼吸系统造成损伤,提高肺脏HSPs表达量。
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关键词
热应激
鸡
肺脏
损伤
热休克蛋白
原文传递
题名
猪圆环病毒2型感染PK-15细胞中外泌体的鉴定及其对细胞增殖和凋亡的影响
被引量:
5
1
作者
陈洪博
段滇宁
胡瑶
杨润泽
洪麒翔
李煜
邱龙新
杨小燕
机构
龙岩学院生命科学学院
福建省预防兽医学与兽医生物技术重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第7期1688-1698,共11页
基金
福建省科技重大专项(2019NZ09005)
福建省自然科学基金(2018J01461,2019J01803)
+2 种基金
福建省中青年教师教育科研项目(JAT160480)
龙岩市科技计划项目(2018LYF8012)
龙岩学院青年教师攀登项目(LQ2015028)。
文摘
旨在分离感染PCV2的PK-15细胞分泌的外泌体,探讨其在PCV2感染淋巴细胞中的作用。提取PCV2感染PK-15细胞上清液中的外泌体,利用透射电镜观察外泌体形态、纳米颗粒跟踪分析测定外泌体粒径、Western blot检测外泌体标记蛋白分子(CD81、TSG101);PKH67标记外泌体后检测细胞对外泌体的摄取;提取PCV2-外泌体基因组,检测PCV2 Rep和Cap基因;利用间接免疫荧光试验检测PCV2-外泌体感染PK-15细胞后PCV2病毒定位;通过绝对定量PCR检测PCV2-外泌体对淋巴细胞的感染率;利用CCK-8法检测淋巴细胞增殖;利用Annexin V-FITC/PI检测淋巴细胞凋亡率。透射电镜和外泌体粒径分析结果显示,PK-15细胞分泌的外泌体为双层膜的囊泡,直径30~200 nm;Western blot结果显示PK-15细胞分泌的外泌体存在特异性标记蛋白CD81和TSG101;外泌体摄取试验结果显示PCV2-外泌体能够被细胞摄取;PCR结果表明PCV2-外泌体基因组中含有PCV2 Rep和Cap基因;间接免疫荧光结果显示,与PCV2直接感染相比,PCV2-外泌体感染的淋巴细胞中,PCV2病毒拷贝显著升高,差异明显(P<0.01),外泌体裂解后感染淋巴细胞能力与PCV2病毒无显著差异;PCV2-外泌体可显著抑制淋巴细胞增殖(P<0.01或P<0.05);PCV2-外泌体显著提高淋巴细胞凋亡率。PCV2感染PK-15细胞的外泌体中携带病毒基因,感染淋巴细胞后使细胞增殖降低和细胞凋亡增加。
关键词
外泌体
PCV2
淋巴细胞
细胞增殖
细胞凋亡
Keywords
exosome
PCV2
lymphocyte
cell proliferation
apoptosis
分类号
S852.659.2 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
急性热应激对鸡呼吸系统损伤及肺脏热休克蛋白表达的影响
被引量:
6
2
作者
段滇宁
陈超
杨润泽
洪麒翔
陈洪博
唐姝
张晓辉
机构
龙岩学院生命科学学院
福建省预防兽医学与兽医生物技术重点实验室
南京农业大学动物医学院
出处
《畜牧与兽医》
北大核心
2021年第3期65-70,共6页
基金
福建省自然科学基金(2018J01461
2019J01803)
+3 种基金
福建省中青年教师教育科研项目(JAT170570)
龙岩市科技计划项目(2019lyf12001)
龙岩学院产学研项目(LC2016007)
龙岩学院青年教师攀登项目(LQ2015028)。
文摘
为探讨热应激对鸡肺脏组织损伤的影响,将60只35日龄SPF鸡随机分为对照组,热应激1、2、3、5、10 h组,每组10只,试验开始后环境温度迅速从25℃升高到35℃,观察热应激组鸡临床症状,热应激结束迅速剖杀、取病料,检测血清pH值、乳酸脱氢酶(LDH)、钾离子和钙离子浓度,石蜡切片检测肺脏组织结构,Western blot检测肺脏组织中热休克蛋白(HSPs)表达量。结果显示:与对照组相比,热应激组血清pH值显著升高(P<0.05),LDH水平均极显著升高(P<0.01),随着热应激时间增加,血钾和血钙浓度开始降低,热应激5、10 h后血钾和血钙浓度显著减低(P<0.05);病理组织学结果显示热应激后,肺组织内血管充血,肺房结构基本完整,热应激5 h后肺房内有大量的红细胞存在,热应激10 h肺房内的异物减少,但肺上皮细胞大量脱落,组织结构损伤严重;Western blot结果显示与对照组相比,HSP27和HSP72表达量极显著升高(P<0.01)HSP60表达量在热应激1 h后显著升高(P<0.05),随后呈降低的趋势,HSP90表达量在热应激5 h后显著升高(P<0.05),随后呈降低的趋势,HSC70表达量无明显变化。热应激可对鸡呼吸系统造成损伤,提高肺脏HSPs表达量。
关键词
热应激
鸡
肺脏
损伤
热休克蛋白
Keywords
heat stress
chicken
lung
injury
heat shock protein
分类号
S852.3 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪圆环病毒2型感染PK-15细胞中外泌体的鉴定及其对细胞增殖和凋亡的影响
陈洪博
段滇宁
胡瑶
杨润泽
洪麒翔
李煜
邱龙新
杨小燕
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
5
下载PDF
职称材料
2
急性热应激对鸡呼吸系统损伤及肺脏热休克蛋白表达的影响
段滇宁
陈超
杨润泽
洪麒翔
陈洪博
唐姝
张晓辉
《畜牧与兽医》
北大核心
2021
6
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